Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.
Użyj królików nowozelandzkich białych (NZW) o wadze 2−3 kg Lekko uspokajające zwierzęta umieszczone w torbie krępującej z podskórną acepromazyną, jak wyżej (1 mg/kg). Usuń całe futro z twarzy i grzbietowej powierzchni czaszki, aby uwidocznić punkty orientacyjne operacji. Przytnij futro nożycami tnącymi, pozostawiając resztki cienkiego futra o długości około 1 mm. Usuń wszystkie resztki sierści za pomocą łagodnego kremu do depilacji, postępując zgodnie z instrukcjami producenta.
1. Usunięcie OSLG
- Naciekać miejsca nacięć (chirurgiczne linie pióra znakującego i górną tylną powiekę) mieszaniną 50:50 2% lidokainy z epinefryną 1:100 000 i 0,5% bupiwakainy za pomocą strzykawki o pojemności 5 cm3 z igłą 30 G (ryc. 1A).
nuta: Rozmiar strzykawki i igły nie ma decydującego znaczenia.
- Użyj igły Colorado podłączonej do jednostki elektrochirurgicznej, aby wykonać nacięcia skóry wzdłuż oznaczeń chirurgicznych. Ustawienia mogą się różnić w zależności od odpowiedzi klinicznej i zazwyczaj wynoszą od 10 do 15 jednostek zarówno w przypadku cięcia, jak i koagulacji (ryc. 1B).
- Zastosuj przeciwstawne napięcie w poprzek nacięcia skóry, aby oddzielić tkanki i odsłonić leżące pod spodem włókna mięśniowe frontoscutularis.
- Zastosuj nacisk przyśrodkowy na kulę ziemską, aby pomóc w wizualizacji OSLG, widzianej jako wybrzuszona tkanka znajdująca się tylko przyśrodkowo lub głęboko do włókien mięśniowych frontoscutularis. W razie potrzeby przesuń te włókna mięśniowe na bok, aby odsłonić leżące pod spodem nacięcie.
- Za pomocą kleszczyków zębatych (0,3) i nożyczek do kapsulotomii delikatnie wycofaj i odetnij włóknistą kapsułkę pokrywającą OSLG. OSLG ma zazwyczaj bladobrązowy kolor (ryc. 1C).
- Za pomocą kleszczy zębatych lub nieząbkowanych chwyć tkankę gruczołu OSLG i delikatnie wyciągnij ją przez górne nacięcie za pomocą techniki "ręka nad ręką". Wytnij małe, włókniste pasma za pomocą nożyczek kapsulotomijnych, aby uwolnić gruczoł z jego pozycji na orbicie (ryc. 1D).
nuta: Gdy tkanka gruczołu OSLG zostanie usunięta, zacznie łączyć się w dużą strukturę przypominającą rurkę (główny przewód wydalniczy).
- Gdy gruczoł zostanie usunięty tak całkowicie, jak to możliwe, użyj obfitej kauteryzacji za pomocą igły Colorado, aby uzyskać zwęglenie tkanki, skracając gruczoł w nacięciu tak głęboko, jak to możliwe. Będzie to później służyć jako punkt orientacyjny potwierdzający podczas usuwania PSLG.
2. Usunięcie PSLG.
- Narysuj górną powiekę za pomocą aplikatora z bawełnianą końcówką. Bulwiasty koniec PSLG jest zwykle dobrze widoczny.
nuta: W niektórych rozwarstwieniach anatomicznych możliwe jest uwidocznienie głównego przewodu wydalniczego jako bladej liniowej struktury o szerokości około 1 lub 2 mm.
- Zaczepić PSLG za pomocą kleszczy zębatych (0.3) i cofnąć go od powierzchni powieki, używając nożyczek do kapsulotomii, aby przeciąć wokół jego podstawy, oddzielając go od leżącego poniżej stępu (ryc. 2A).
- Kontroluj umiarkowane krwawienie za pomocą kauteryzacji monopolarnej.
- Zastosuj ciągłą trakcję na oddzielonej tkance, aby utrzymać płaszczyznę tkanki do rozwarstwienia. Umożliwi to również usunięcie głównego przewodu wydalniczego SLG (ryc. 2B).
nuta: W miarę przeprowadzania sekcji zazwyczaj przesuwa się ona do górnej krawędzi oczodołu, gdzie można zobaczyć ślady kauteryzacji pozostawione po usunięciu bardziej górnego i przyśrodkowo położonego OSLG.