Eksperymentalny model niedokrwienia obwodowego: procedura generowania niedokrwienia obwodowego poprzez podwiązanie tętnicy udowej u królika

Streszczenie

Źródło: Sligar, A. D., et al. Przedkliniczny model niedokrwienia kończyn tylnych u królików z cukrzycą. J. Vis. Exp. (2019).

W tym filmie pokazujemy zabieg chirurgiczny mający na celu wywołanie niedokrwienia obwodowego poprzez podwiązanie tętnicy udowej u królika. Metoda ta stanowi skuteczny model eksperymentalny do badań nad chorobami naczyń obwodowych.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Izolacja tętnicy udowej

1. Znieczulenie królika nowozelandzkiego (w wieku 4–6 miesięcy) z wcześniej wywołaną cukrzycą i hiperlipidemią należy znieczulić, stosując 20–40 mg/kg ketaminy i 2 mg/kg midazolamu we wstrzyknięciu podskórnym. Umieść królika na 1,5%-3% izofluranu (zwykle 2%) podczas początkowej sedacji za pomocą maski.
2. Wykonaj podłużne nacięcie w skórze nad prawą tętnicą udową za pomocą skalpela (ostrze #15). Upewnij się, że nacięcie rozciąga się niżej od więzadła pachwinowego, kończąc się w obszarze tuż proksymalnym do rzepki (około 6 cm).
3. Użyj rozwarstwienia zakrzywionymi nożyczkami Metzenbauma lub zakrzywionym hemostatem komara, aby odsłonić tętnicę udową.
4. Użyj zwijaczy Weitlanera, aby utrzymać nacięcie otwarte.
5. Dodaj miejscowo 0,5 ml 1% lidokainy, aby zmniejszyć podrażnienie nerwów i przyspieszyć rozszerzenie naczyń krwionośnych.
6. Kontynuuj rozwarstwianie tkanek, aby uwolnić całą długość tętnicy udowej wraz ze wszystkimi gałęziami tętnicy udowej, w tym dolną tętnicą nadbrzusza, głęboką kością udową, bocznym obwodem i powierzchowną tętnicą nadbrzusza (ryc. 1A).
7. Przeprowadź sekcję dalej wzdłuż tętnic podkolanowych i odpiszczelowych, a także tętnicy biodrowej zewnętrznej (ryc. 1A). Okresowo nawilżaj obszar solą fizjologiczną, aby chronić przed uszkodzeniem tkanek. Jeśli rozwarstwienie jest wykonywane wzdłuż rowka udowego (między mięśniami), nie ma potrzeby przecinania mięśnia.
8. Ostrożnie oddziel tętnicę od żyły i nerwu, jak pokazano na rysunku 1B, C. Podwiązać tętnice wskazane na schemacie za pomocą jedwabnych szwów 4.0, umieszczając dwie opaski z wystarczającą ilością miejsca między nimi, aby przeciąć tętnicę. Wiązania te są wykonywane za pomocą węzła chirurgicznego, po którym następują cztery węzły kwadratowe.
9. Przeciąć między dwoma wiązaniami na podwiązanych tętnicach za pomocą małych nożyczek Metzenbaum. Wyciąć tętnicę udową od jej bliższego początku jako odgałęzienia tętnicy biodrowej zewnętrznej do punktu, w którym rozdziela się, tworząc tętnice odpiszczelowe i podkolanowe.

Wyniki

Rysunek 1: Indukcja niedokrwienia kończyn tylnych u królików poprzez podwiązanie i wycięcie tętnicy udowej. (A) Ilustracja anatomii naczyniowej kończyny tylnej królika. Umieść krawaty we wszystkich zaznaczonych punktach, aby podwiązać tętnice. (B) Pole operacyjne pokazujące przecięcie tętnicy udowej przed podwiązaniem. (C) Tętnice udowe z podwiązaniami w celu wywołania niedokrwienia kończyn tylnych.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
0,9% chlorek sodu	Henry Schein Medycyna	1537468 / 1531434	Worek 250 ml / 1000 ml do nawadniania btl
Strzykawka 10 ml	Firma VWR	BD309695
Igła 27G	Firma VWR	89219-288
Acepromazyna	Patterson Weterynaryjny	VEDC207
Samodzielny Alfax	Patterson Weterynaryjny	Numer katalogowy: 07-891-6051
Buprenorfina SR	Ogród ZooPharm
Maszynki do strzyżenia włosów	Amazonka	B000CQZI3Q	Ostrze Oster #40
Poduszka grzewcza	Cincinnati Poniżej zera	Rozdział 273
Pompa poduszki grzewczej	Gaymar powiedział:		Gaymar T/Pompa
Hemostat	Narzędzia naukowe	Numer katalogowy: 13009-12	Zakrzywiony hemostat komara
Izofluran	Henry Schein Medycyna	1100734
Ketamina	Patterson Weterynaryjny	856440301
Lidokainy	McKesson Medyczno-Chirurgiczny	239936
Krem z lidokainą/prylokainą	McKesson Medyczno-Chirurgiczny	Numer telefonu 761240
Nożyczki Metzenbaum	Narzędzia naukowe	Numer katalogowy 14019-13
Midazolam	Henry Schein Medycyna	1215470
skalpel	Narzędzia naukowe	Numer katalogowy 10003-12
Ostrze skalpela	Narzędzia naukowe	Numer katalogowy 10015-00	Ostrze #15
Szwy jedwabne	Firma Ethicon-Johnson & Johnson	A183H	4-0 Krawaty jedwabne 18"
Obłożenia chirurgiczne	Gepco powiedział:	Zobacz materiał 8204S
Zwijacz Weitlaner	Narzędzia naukowe	Numer katalogowy: 17012-13