Generowanie modelu ubytku kości nazębnej królika: zabieg chirurgiczny mający na celu utworzenie okrągłych ubytków w górnej części czaszki królika w celu oceny materiałów substytucyjnych kości pod kątem zdolności regeneracji kości

Streszczenie

Źródło: Marger, L. et al., Calvarial Model of bone augmentation in Queen for Assessment of Bone Growth and Neovascularization in Bone Substitution Materials. J. Vis. Exp. (2019).

W tym filmie opisujemy procedurę chirurgiczną polegającą na wygenerowaniu modelu kalwaryjnego królika w celu oceny zdolności do regeneracji kości interesujących materiałów do substytucji próbek kości.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Chirurgia

1. Przygotowanie strony
   1. Umieść królika na podgrzewanej podkładce (39 °C) przykrytej podkładką pod materac (aby uniknąć poparzeń) na stole operacyjnym. Ogol skórę głowy.
   2. Nałóż żel nawilżający na oczy, aby uniknąć podrażnień i wysuszenia. Zdezynfekuj miejsce, szorując skórę jodonem powidonu (10%). Następnie ułóż królika sterylną serwetą chirurgiczną i wytnij obszar dostępu do czaszki.
   3. Zdezynfekuj miejsce operowane jodem powidonu (10%) po raz drugi. Nałóż żel nawilżający na oczy, aby uniknąć podrażnień i wysuszenia.
   4. Przygotuj udrapowany stół (sterylną serwetę), na którym umieścisz całą tacę chirurgiczną.
2. Otwarcie pola operacyjnego
   1. Znieczulenie miejscowe za pomocą podskórnego (SC) wstrzyknięcia lidokainy 2% (1 ml) w czaszkę.
   2. Naciąć skórę (skalpelem) wzdłuż linii strzałkowej kalwarii, od oczodołów do zewnętrznej wypukłości potylicznej (~4 cm długości). Upewnij się, że okostna jest nacięta.
   3. Delikatnie podnieś okostną (z windą okostną) po obu stronach nacięcia. Spłucz miejsce sterylną solą fizjologiczną.
3. Rozmieszczenie cylindrów
   1. Zlokalizuj szwy środkowe i koronalne na czaszce (ryc. 2A, B). Zauważ, że te linie anatomiczne tworzą krzyż. Cylindry zostaną umieszczone w każdym z kwadrantów określonych przez krzyż, upewniając się, że krawędź cylindra nie znajduje się nad szwem (Rysunek 2C).
   2. Umieść pierwszy cylinder w lewym górnym kwadrancie (lewa kość czołowa) i spróbuj położyć urządzenie płasko. Zamocuj w pozycji z silnym naciskiem dłoni i wkręć mikrośrubę, aż poczujesz opór. Upewnij się, że jest równo z powierzchnią zaczepu cylindra.
   3. Powtórz tę samą procedurę na drugiej zakładce, aby mocno przymocować cylinder do czaszki. Upewnij się, że cylinder jest hermetycznie przymocowany do kości.
   4. Powtórz procedurę na prawej górnej ćwiartce (prawa kość czołowa), lewej dolnej ćwiartce (lewa kość ciemieniowa) i prawej dolnej ćwiartce (prawa kość ciemieniowa).
4. Wiercenie kości w 5 otworach śródszpikowych w obszarze opisanym przez cylindry (ryc. 1)
   1. Wywierć otwór śródszpikowy pod irygacją solą fizjologiczną (średnica 0,8 mm, głębokość ~1 mm) z okrągłym wiertłem na kości, pośrodku obszaru opisanego przez cylinder. Upewnij się, że pojawia się krwawienie.
   2. Wywierć dwa dodatkowe otwory śródszpikowe wzdłuż osi przechodzącej przez dwie z zakładką, na wewnętrznych krawędziach cylindra. Wzdłuż prostopadłej osi wywierć jeszcze dwa otwory śródszpikowe na wewnętrznych krawędziach cylindra. Upewnij się, że pojawia się krwawienie.
   3. Powtórz operację w trzech pozostałych cylindrach.
5. Napełnianie butli próbkami materiału i zakręcanie (rysunek 3)
   1. Przygotuj żądany materiał kościozastępczy zgodnie z instrukcjami producenta lub specyfikacjami materiału.
   2. Napełnij pierwszy cylinder po brzegi próbką materiału i zamknij cylinder, zakładając nakrętkę. Powtórz ten proces w pozostałych 3 cylindrach.
6. Zamknięcie pola operacyjnego
   1. Zamknij skórę nad cylindrami za pomocą przerywanego, niewchłanialnego szwu.
   2. Na ranę nałożyć opatrunek w sprayu.

2. Leczenie pooperacyjne

1. Zatrzymaj dopływ analgezji i znieczulenia (zatrzymanie perfuzji propofolu i fentanylu) i sprawdź, czy odzyskanie autonomicznego oddychania.
2. Zatrzymaj wentylację, gdy zwierzę odzyska autonomiczne oddychanie. Utrzymuj zwierzę pod czystym tlenem przed całkowitym przebudzeniem.
3. Wstrzyknąć chlorowodorek buprenorfiny SC (0,02 mg/kg, 0,03 mg/ml, 0,67 ml/kg) i powtarzać wstrzyknięcie co 6 godzin przez 3 dni jako analgezja pooperacyjna.
4. Przenieś zwierzę do jego zwykłego pomieszczenia z wodą i pełnym karmieniem.

Wyniki

Rysunek 1: Specyfikacje butli PEEK. Na bocznych zaczepach stabilizujących wywiercono dwa otwory (o średnicy 0,8 mm) do przykręcenia. Położenie 5 otworów śródszpikowych (o średnicy 0,8 mm), które mają zostać wywiercone w czaszce w obszarze ograniczonym przez cylinder, są oznaczone czerwonymi kółkami.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
narkotyki
Fentanylu	Bischel (Bischel		Na przeciwbóle
Ketalar 50mg/ml	Pfizer		Ketamina do znieczulenia
Sześciokąt Lidohex	Bichsel		Żel nawilżający do oczu
Przeciwieństwo	Smith i siostrzeniec	66004978	Opatrunek w sprayu
Powidon jod 10%, Betadina	Mundipharma powiedział:		Środek przeciwinfekcyjny
Propofol 2%	Braun	3538710	Do znieczulenia
Rapidokaina 2%	sintetica powiedział:		Znieczulenie miejscowe
Rompun 2%	Bayer		Ksylazyna do znieczulenia
Sewofluran 5%	Biblioteka		Do znieczulenia
sprzęt
Fresenius Vial pilot C	Imexmed		Pompa infuzyjna
Podgrzewana podkładka	Aparatura Harvarda
Dominująca siła ssania 50	Medela
Rurka ssąca Optimus	Promedyczne	80342.2
Silnik chirurgiczny	Stomatologia Schicka	Qube (Kuba	Wiercenie otworów śródszpikowych
Wentylacja	Serwo Maquet1
materiał
Cylindry i nasadki	Boutyplast (Drewnoplast)	Dostosowane	skład: PEEK (polieteroeteroketon)
Ręczny wał samozabezpieczający	GlobalD	AKT 1K
Ruchomy uchwyt do wału samozabezpieczającego	GlobalD	Mtm
Wkręty samowiercące	GlobalD	VA1.2KL4	z napędem krzyżowym wykonane z tytanu grade5, ISO 5832-3
Taca chirurgiczna
Rurka dotchawicza Shiley średnica 2,5mm	Wirus Covidien	Numer katalogowy: 86233	Do intubacji
Rurka dotchawicza Shiley średnica 4,9mm	Wirus Covidien	107-35G	Do intubacji
Ethicon prolene 4-0	Ehticon powiedział:	8581H	Szew niewchłanialny
Kleszcze	Marcel Blanc	BD027R	145 milimetr
Cewnik do intubacji	Kucharz medyczny		Przewodnik do intubacji
Okrągłe wiertła chirurgiczne	Patterson	78000	Średnica 0,8 mm, Wiercenie otworów śródszpikowych
skalpel	Swann-Morton		nr 10 i nr 15
nożyczki	Marcel Blanc	657	180 milimetr
Strzykawki Omnifix	Braun	4616057V	5 ml, 10 ml i 50 ml
Venflon G22	Braun	Numer katalogowy: 42690985-01	Bezpieczeństwo Vasofix dla linii dożylnej ucha