$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.
1. Indukcja ekspresji genu zależnego od tetracykliny lub shRNA
UWAGA: Doksycyklina może być szkodliwa. Proszę zapoznać się z kartą charakterystyki.
UWAGA: W zależności od rodzaju i czasu trwania eksperymentu, doksycyklina może być dostarczana do wody pitnej.
- W przypadku eksperymentów krótkoterminowych (<10 dni) należy podawać doksycyklinę z wodą pitną, stosując następujący protokół.
- Rozpuść 5 g sacharozy w 100 ml wody z kranu. Autoklaw.
- Rozpuścić 100 mg hykulanu doksycykliny w 5 ml roztworu sacharozy (krok 1.1.1) w stożkowej probówce o pojemności 15 ml.
- Za pomocą strzykawki o pojemności 10 ml sterylnie przefiltruj roztwór przez filtr 0,2 μm. Dodać do roztworu sacharozy przygotowanego w kroku 1.1.1.
- Dostarczyć myszowi roztwór doksycykliny i sacharozy jako wodę pitną. Sprawdzaj codziennie i wymieniaj, gdy roztwór stanie się mętny, co wskazuje na przerost bakterii (wymień klarowny roztwór najpóźniej po trzech dniach).