$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Wszystkie procedury z udziałem modeli zwierzęcych zostały zweryfikowane przez lokalną instytucjonalną komisję ds. opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.
1. Chirurgia hemisekcji klatki piersiowej
- Nosić odpowiedni sprzęt ochronny (rękawice, maskę i fartuch), aby utrzymać aseptyczne środowisko podczas operacji. Oczyść obszar operacyjny chusteczkami nasączonymi alkoholem i umieść sterylne obłożenia chirurgiczne na polu operacyjnym. Wysterylizuj narzędzia chirurgiczne i umieść je na polu operacyjnym.
- Znieczulić szczura mieszaniną izofluranu (3% indukcji, 0,5-3% konserwacji) i tlenu (1 l/min). Potwierdź odpowiednią głębokość znieczulenia chirurgicznego, sprawdzając brak szczypania palców u nóg i odruchów rogówkowych. Stale monitoruj szczura podczas całego zabiegu i dostosuj ilość podawanego środka znieczulającego zgodnie z wymaganiami, aby utrzymać głębokość znieczulenia chirurgicznego.
- Ogolić grzbietowy tułów między biodrem a szyją, umieścić szczura na polu operacyjnym, zdezynfekować miejsce nacięcia chusteczkami nasączonymi alkoholem i roztworem prowiodu i utrzymać temperaturę ciała na poziomie 37 °C za pomocą poduszki grzewczej sterowanej sprzężeniem zwrotnym, monitorowanej przez termometr doodbytniczy.
- Umieść maść okulistyczną na oczach, aby utrzymać ich nawilżenie i w razie potrzeby nakładaj ją ponownie przez cały zabieg.
- Wykonać skalpelem 2,5 cm nacięcie w skórze pokrywające kręgi T6−T10. Wycofaj skórę i powierzchowny tłuszcz za pomocą tępych nożyczek preparacyjnych.
UWAGA: Segmenty kręgów T6−T10 można zidentyfikować albo rostralnie przez delikatne badanie palpacyjne grzbietowych segmentów kręgosłupa od podstawy czaszki, zaczynając od zauważalnej wypukłości kręgu piersiowego 2nd, albo doogonowo przez badanie palpacyjne najbardziej wysuniętego do tyłu żebra, które wywoła ruch w 13th kręgach piersiowych.
- Oddziel mięśnie przykręgosłupowe przyczepiające się do grzbietowej strony kręgów T7−T9 za pomocą tępych nożyczek preparacyjnych i samozatrzymującego się retraktora. Oczyścić i usunąć pozostałą tkankę za pomocą cienkich kleszczyków i aplikatorów z bawełnianą końcówką, aby odsłonić wyrostki kolczyste i blaszki kręgowe.
UWAGA: Ten i następne kroki są znacznie wspomagane przez wizualizację mikroskopową (~5−15x).
- Ostrożnie odetnij fasety (stawy zygapofizyjne) obustronnie na kręgach T7 i T8 za pomocą delikatnych trymerów do kości. Przeciąć grzbietową tkankę łączną między blaszkami kręgowymi T8 i T9 powierzchownie skalpelem (głębokość 1 mm), uważając, aby nie uszkodzić leżącego poniżej rdzenia.
- Usuń wyrostek kolczysty kręgu T8 za pomocą trymerów do kości. Za pomocą zakrzywionych kleszczy hemostatycznych ostrożnie zaciśniętych na wyrostku kolczystym T7, obróć ogonowy koniec blaszek T8 lekko obrotowo (~ 20 °), włóż trymery do kości pod blaszkę T8 i wykonaj cięcie linii środkowej rozciągające się wzdłuż blaszki. Kontynuuj laminektomię, powtarzając nacięcia po lewej i prawej stronie blaszki kręgowej przyśrodkowej do wyrostków poprzecznych, aby odsłonić rdzeń kręgowy.
UWAGA: Uważaj, aby usunąć wszystkie fragmenty kości powstałe w wyniku laminektomii.
- Wlej lidokainę (2%, 0,1 ml) do odsłoniętego kanału kręgowego i usuń oponę twardą pokrywającą odcinek kręgosłupa T8 za pomocą cienkich kleszczy i nożyczek do irydektomii. Powtórz podawanie lidokainy do odsłoniętego rdzenia i zidentyfikuj linię środkową sznura, wizualizując linię środkową utworzoną między wyrostkami kolczystymi rozciągającymi się między odsłoniętym kręgiem T7−T9.
UWAGA: Wraz z wyrostkami kolczystymi na T7 i T9, odsłonięte zwoje korzenia grzbietowego na T8 mogą być również wykorzystane do pomocy w identyfikacji linii środkowej. Igła o wadze 30 G może być umieszczona w linii środkowej sznurka, aby pomóc w późniejszej hemisekcji.
- Wyciąć rdzeń kręgowy od linii środkowej w kierunku jednej strony za pomocą noża preparacyjnego. Uważaj, aby nie przeciąć przedniej tętnicy rdzeniowej po stronie brzusznej (nie wywieraj mocnego nacisku na trzon kręgu). Za pomocą nożyczek do irydektomii ostrożnie przeciąć pozostałą tkankę po uszkodzonej stronie rdzenia kręgowego, aby upewnić się, że ćwiartka brzuszno-boczna jest odpowiednio przecięta.
- Umieść sterylną gąbkę hemostatyczną nasączoną solą fizjologiczną (~6 x 2 mm) w odsłoniętej jamie nad rdzeniem kręgowym i zszyj warstwy mięśniowe (4-0 poliglaktyna 910). Następnie zszyj skórę wokół miejsca nacięcia.
- Natychmiast po zabiegu należy podać odpowiednie leki przeciwbólowe (buprenorfina 0,05 mg/kg podskórnie [s.c.]), antybiotyk (enrofloksacyna, 10 mg/kg s.c.) i uzupełnić utracone płyny 5 ml roztworu Ringera z mleczanami (dootrzewnowo [i.p.]).
- Usuń szczura ze znieczulenia. Umieść szczura w ciepłym miejscu pod poduszką grzewczą lub lampą (~ 33 °C), aż zwierzę całkowicie się obudzi.
- Zapewnij dodatkową analgezję codziennie przez pierwsze 3 dni po operacji i stale monitoruj oznaki bólu, utraty wagi, nieprawidłowego oddawania moczu, infekcji, problemów z gojeniem się ran lub autofagii.