Wywoływanie zachowań podobnych do depresji u myszy poprzez stres związany z unieruchomieniem

Streszczenie

Źródło: Son, H., et al., Protokół przewlekłego stresu unieruchamiającego w celu wywołania zachowań podobnych do depresji u myszy. J. Vis. Exp. (2019).

Ten film pokazuje metodę wywoływania przewlekłego stresu u myszy poprzez wielokrotne unieruchomienie, prowadzące do uwalniania kortykosteronu i zmniejszonej aktywności receptora glutaminianu w neuronach, co skutkuje zachowaniem podobnym do depresji.

Protokół

Wszystkie procedury z udziałem modeli zwierzęcych zostały zweryfikowane przez lokalną instytucjonalną komisję ds. opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Indukcja depresji przez ograniczenie CIS

UWAGA: Z myszą obchodzić się delikatnie, ale stanowczo, pewnie. Nieostrożne i niepewne obchodzenie się z myszą to kolejny czynnik stresujący w eksperymencie i jest ważny dla zmagania się, gryzienia i drapania myszy.

1. Ustaw światło w pomieszczeniu na warunki światło (200 luksów) za pomocą cyfrowego luksomierza.
2. Umieść mysz w oddzielnej klatce co najmniej tydzień przed badaniem i umieść ją w pomieszczeniu testowym na co najmniej 30 minut przed eksperymentem.
   UWAGA: Dotykaj myszy co najmniej raz dziennie przez co najmniej trzy kolejne dni przed eksperymentem, aby zapoznały się z eksperymentatorem. Okres adaptacyjny przed eksperymentem jest konieczny, aby upewnić się, że myszy zaaklimatyzują się do okoliczności, takich jak pomieszczenie testowe.
3. Delikatnie przytrzymaj ogon myszy, aby uniknąć napinania myszy, a następnie ostrożnie umieść go na szorstkiej powierzchni (górna część drucianej belki klatki lub pokrywy klatki).
4. Przykryj ogranicznik małym białym ręcznikiem, a następnie delikatnie umieść mysz w jego otworze, tak aby dobrowolnie weszła do ogranicznika.
   UWAGA: W tym przypadku mysz jest ustawiona w kierunku przeciwnym do miejsca, w którym wchodzi do ogranicznika. Aby zachęcić mysz do dobrowolnego wejścia do ogranicznika, ogranicznik jest przykryty małym ręcznikiem, aby przyciemnić wnętrze.
5. Umieść zamknięcie, aby jak najmocniej przytrzymać mysz, uważając, aby uniknąć uszkodzenia ciała, takiego jak ogon, stopy i jądra.
6. Unieruchamiaj mysz przez 2 godziny dziennie (od 9:00 do 11:00) przez 15 kolejnych dni.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Dysza kulowa	Jeung Do B&P	JD-C-88
Kamera CCTV	KOCOM	KCB-381
Cyfrowy miernik luksa	TES	TES-1330A
Myszy	Koatech		Szczep C57BL/6
Powściągliwość	Przemysł instrumentów Dae-jong	DJ-428
Butelka na wodę	Jeung Do B&P	JD-C-79