$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Wszystkie procedury z udziałem modeli zwierzęcych zostały zweryfikowane przez lokalną instytucjonalną komisję ds. opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.
1. Opracowanie jednostronnego modelu niedrożności/reperfuzji tętnicy środkowej mózgu (MCAO/R) u szczurów
UWAGA: Podczas operacji delikatnie używaj mikrokleszczyków, aby zapobiec pęknięciu naczynia krwionośnego. Unikaj uszkodzenia nerwów i innych naczyń krwionośnych w szyi szczura, gdy naczynie jest odizolowane. Należy dołożyć starań, aby zastosować odpowiednią technikę aseptyczną dla wszystkich zabiegów chirurgicznych mających na celu przetrwanie. Technika zilustrowana w dalszej części filmu powinna być ćwiczona przez całą procedurę.
- Przez cały czas trwania operacji należy utrzymywać temperaturę ciała szczurów na poziomie 37,0 ± 0,5 °C w termostacie dla małych zwierząt. Przygotuj cztery 6-centymetrowe szwy 5-0.
- Ustaw natężenie przepływu tlenu w urządzeniu do znieczulania małych zwierząt (z urządzeniem do oczyszczania gazów odlotowych) na 0,4−0,6 l/min, a stężenie izofluranu na 5%. Umieść szczura w aparacie do znieczulenia.
- Po tym, jak zwierzę zemdleje, umieść szczura na chirurgicznym stole mocującym. Podłącz pysk szczura do maski aparatu do znieczulenia (natężenie przepływu tlenu pozostaje niezmienione; dostosuj stężenie izofluranu na 3%). Potwierdź, że zwierzę weszło w głęboką narkozę, obserwując brak napięcia kończyn, odruchy rogówkowe i ból.
- Przymocuj jego kończyny tak, aby leżały na stole operacyjnym za pomocą papierowych bandaży (lub innych narzędzi).
- Zdejmij okrycie szyi golarką elektryczną i wysterylizuj 75% alkoholem (lepszy jest jodofor). Przymocuj pysk szczura za pomocą haka.
- Wytnij 2−3 cm wzdłuż środkowego podłużnego kształtu szyi za pomocą nożyczek okulistycznych.
- Oddziel wspólną tętnicę szyjną. Oddziel mięsień podskórny za pomocą kleszczy ocznych. Użyj domowego zwijacza, aby w pełni naświetlić pole widzenia. Po oddzieleniu mięśnia przedniego tchawicy za pomocą kleszczy ocznych należy oddzielić wzdłuż prawego ścięgna mostkowo-obojczykowo-sutkowego, aż do wyświetlenia tętnicy szyjnej wspólnej.
- Odizoluj wspólną tętnicę szyjną, tętnicę szyjną zewnętrzną i tętnicę szyjną wewnętrzną za pomocą kleszczy okulistycznych. Podwiązywać tętnicę szyjną wspólną (węzeł twardy), tętnicę szyjną zewnętrzną daleko od końca serca (węzeł twardy) i tętnicę szyjną wewnętrzną (węzeł luźny) za pomocą szwów 5-0. Wyłóż tętnicę szyjną zewnętrzną w pobliżu końca serca szwami 5-0.
- Włóż śrubę gwintowaną. Wytnij mały otwór w tętnicy szyjnej zewnętrznej za pomocą nożyczek okulistycznych i delikatnie włóż śrubę gwintowaną. Podwiązać szew tętnicy szyjnej zewnętrznej, która była w luźnym węźle i odciąć tętnicę szyjną zewnętrzną.
- Poluzuj luźny węzeł tętnicy szyjnej wewnętrznej i kontynuuj wkładanie śruby gwintowanej do początku środkowej tętnicy mózgowej (zaznaczony szew). Następnie odetnij odsłoniętą śrubę gwintu.
- Po osiągnięciu czasu niedokrwiennego (2-3 h) należy unieruchomić złamanie tętnicy szyjnej zewnętrznej za pomocą jednego mikrokleszcza i delikatnie wyciągnąć śrubę gwintowaną za pomocą innych mikrokleszczyków. Gdy przedni koniec śruby gwintowanej zostanie całkowicie wycofany z tętnicy szyjnej wewnętrznej, podwiąż zewnętrzną tętnicę szyjną, która była wyłożona szwami 5-0, a następnie całkowicie wyciągnij śrubę gwintowaną.
- Poluzuj wspólną tętnicę szyjną i nałóż ~ 50 000 U proszku sodowego penicyliny na powierzchnię rany, aby zapobiec infekcji. Zszyj mięśnie podskórne i skórę za pomocą 4 szwów.
- Podaj szczurowi ~0,2 ml sterylnego soli fizjologicznej doustnie za pomocą strzykawki o pojemności 1 ml (lepsze jest wstrzyknięcie SQ-PEN), aby zapobiec pooperacyjnemu niedoborowi wody po umieszczeniu szczura z powrotem w klatce.