Artykuł metodologiczny

Technika wywoływania napadów pourazowych w modelu mysim za pomocą urazu urazowego spowodowanego spadkiem masy ciała

8 lipca 2025

W tym artykule

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Źródło: Shandra, O. et al., Wywoływanie padaczki pourazowej w mysim modelu powtarzalnego rozlanego urazowego uszkodzenia mózgu. J. Vis. Exp. (2020)

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie procedury z udziałem modeli zwierzęcych zostały zweryfikowane przez lokalną instytucjonalną komisję ds. opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Procedura spadku wagi

  1. Umieść mysz w komorze indukcyjnej. Ustaw przepływ tlenu i próżni na 1 l/min, a poziom izofluranu na 3%−5%. Znieczulaj mysz przez 5 minut.
  2. Wyjmij mysz z komory indukcyjnej i umieść ją na podkładce piankowej. Sprawdź, czy nie ma reakcji na uszczypnięcie palca u nogi lub ogona.
  3. Lek przeciwbólowy (0,1 mg/kg buprenorfiny) należy podawać podskórnie. Jeśli operacja elektroencefalografii (EEG) jest wykonywana tego samego dnia, buprenorfinę należy podawać podskórnie w połączeniu z niesteroidowym przeciwzapalnym karprofenem (5 mg/kg).
  4. Roztwór mleczanu sodu (3 μl na gram masy ciała zwierzęcia) należy podawać podskórnie przed lub po ostatnim uderzeniu. Roztwór mleczanu sodu można mieszać z lekami przeciwbólowymi w celu szybkiego podania w jednym wstrzyknięciu.
    UWAGA: Roztwór mleczanu sodu zawiera mieszaninę chlorku sodu, chlorku potasu, chlorku wapnia i mleczanu sodu w wodzie. Ten krok pomaga zastąpić płyny i elektrolity, wspomagając regenerację.
  5. Umieść głowę myszy pod rurką zrzutową (Rysunek 1A) i umieść płaski dysk ze stali nierdzewnej (1,3 cm średnicy, 1 mm grubości i 880 mg wagi) na środku głowy, między linią oczu i uszu.
    UWAGA: Ten dysk rozprasza uderzenie na powierzchni czaszki (Rysunek 1B).
  6. Wyjmij kołek w rurze zrzutowej obciążnika, aby zwolnić pręt o wadze 100 g z wysokości 50 cm. Aby wywołać pozorowane obrażenia u myszy kontrolnych, usuń pręt obciążnikowy z rurki, aby zapobiec przypadkowemu zwolnieniu szpilki i spadkowi wagi.
    UWAGA: Głowa zwierzęcia musi być ułożona płasko, tak aby pręt swobodnie opadał na całą powierzchnię dysku.
  7. Połóż nieprzytomne zwierzę na grzbiecie w celu odzyskania zdrowia na poduszce grzewczej pokrytej sterylnym ręcznikiem chłonnym z polietylem. Czas odzyskiwania odruchu prostującego (tj. czas, w którym mysz prostuje się od grzbietu) może być mierzony jako odczyt czasu spędzonego bez przytomności.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Rycina 1: Mysi model powtarzalnego rozlanego urazowego uszkodzenia mózgu (TBI). (A) Urządzenie do obniżania wagi. (a1) Rurka zrzutowa masy. (a2) Pręt o wadze 100 g. (a3) Kołek przytrzymujący pręt. (a4) Sznurek do podnoszenia pręta w przypadku zmiany wysokości lub wyjmowania pręta z rurki zrzutowej. (a5

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Nie stwierdzono konfliktu interesów.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
BuprenorfinaPar Pharmaceuticals, Cos. Inc., Spring Valley, Nowy Jork, Stany Zjednoczone60969
Myszy C57BL/6Harlan/Envigo Laboratories Incpies, 12-16 tygodni
Myszy C57BL/6Laboratorium Jacksonapies, 12-16 tygodni
KarprofenZoetis Services LLC, Parsippany, NJ, Stany Zjednoczone26357UWAGA: ten lek dodaje się podczas spadku masy ciała tylko wtedy, gdy implantacja elektrody stereotaktycznej zostanie wykonana tego samego dnia
Fluriso płyn do znieczulenia wziewnegoMWI Veterinary Supply Co., Stany Zjednoczone502017
Tarcza ze stali nierdzewnejWykonane na zamówienie
Sterylne chłonne ręczniki z wyściółką polietylenowąKardynał Zdrowia, Stany Zjednoczone3520

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Model urazowego uszkodzenia m zgu metod upadku ci arkamodel mysi napad w potraumatycznychindukcja urazowego uszkodzenia m zgumechanizm nadpobudliwo ci neuronalnejaktywacja receptor w glutaminianunapady wywo ane nap ywem wapniaprzygotowanie znieczulonej myszyumieszczenie dysku ze stali nierdzewnejmechanizm uwalniania pr ta z obci eniemmodel urazowego uszkodzenia m zgu

Powiązane artykuły