Indukcja i ocena depresji u myszy poprzez przewlekłą ekspozycję na stres

Wszystkie procedury z udziałem modeli zwierzęcych zostały zweryfikowane przez lokalną instytucjonalną komisję ds. opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Przygotowanie myszy do procedury eksperymentalnej

UWAGA: Do procedury eksperymentalnej wybrano zdrowe samce myszy C57BL/6J w wieku 12 tygodni, przy czym każda mysz ważyła od 18 do 22 g.

1. Trzymaj myszy pojedynczo w klatkach w typowym pomieszczeniu dla zwierząt laboratoryjnych wolnych od specyficznych patogenów (SPF) (22 ± 1 °C, 12 h/12 h cykl ciemny/jasny, wilgotność względna: 30–40%) przez tydzień przed zabiegiem CUMS.
2. Losowo podziel wszystkie myszy na grupę kontrolną i grupę modelową według ich masy ciała. Każda grupa składa się z 15 myszy.
3. Przed rozpoczęciem eksperymentu ponumeruj myszy w każdej grupie na ogonie za pomocą pisaka.

2. Indukcja depresji u myszy

UWAGA: Aby wywołać depresję, myszy w grupie modelowej i dwie grupy leczone przechodziły przewlekły nieprzewidywalny łagodny stres (CUMS) przez 21 dni. Plan można zmieniać w zależności od sytuacji praktycznej, ale należy przestrzegać zasady, że ten sam stresor nie może być używany w sposób ciągły.

1. Codziennie wystawiaj myszy na działanie dowolnych dwóch z następujących siedmiu czynników stresogennych przez 21 kolejnych dni. Nasz plan modelowania jest zaprojektowany w następujący sposób:
   1. W poniedziałek wystaw myszy na brak pożywienia (opróżnij karmę z każdej klatki na 24 godziny, od 8:00 do 8:00) i brak wody (usuń butelkę do picia z każdej klatki na 24 godziny, od 8:00 do 8:00).
   2. We wtorek wystaw myszy na stres związany z ograniczeniami (trzymaj myszy w małej plastikowej wannie przez 3 godziny, od 8:00 do 11:00) i puste klatki (usuń wyściółkę z każdej klatki na 11 godzin, od 8:00 do 19:00).
   3. W środę wystaw myszy na działanie mokrych i zabrudzonych klatek (wlej wodę do każdej klatki i trzymaj mokre przez 24 godziny, od 8:00 do 8:00) i zatłoczonych klatek (umieść pięć myszy w jednej klatce na 24 godziny, od 8:00 do 8:00).
   4. W czwartek wystaw myszy na stres związany z ograniczeniami i lodowato pływanie (zmuś każdą mysz do pływania w przezroczystym szklanym akwarium z lodowatą wodą przez 5 minut).
   5. W piątek wystawiaj myszy na mokre i zabrudzone klatki oraz pozbawienie jedzenia.
   6. W sobotę wystawiaj myszy na stres związany z ograniczeniami i zatłoczonymi klatkami.
   7. W niedzielę wystawiaj myszy na puste klatki i lodowate pływanie.
2. Rejestruj stan sierści i masę ciała co tydzień, aż do końca modelowania (dzień 21). Oblicz całkowity wynik stanu sierści jako sumę wyników z siedmiu różnych części ciała: głowy, szyi, sierści grzbietowej, sierści brzusznej, łap przednich, ogona i łap tylnych. Wynik jeden oznacza zadbaną sierść, a wynik zero oznacza zaniedbaną sierść.