Wywoływanie ubytku słuchu u myszy poprzez długotrwałą ekspozycję na dźwięk o dużej głośności

Streszczenie

Źródło: Lee, D. et. al., Zmodyfikowane warunki eksperymentalne dla ubytku słuchu wywołanego hałasem u myszy oraz ocena funkcji słuchu i uszkodzenia zewnętrznych komórek rzęsatych. J. Vis. Exp. (2023)

Ten film przedstawia procedurę ubytku słuchu wywołanego hałasem u myszy. Głośne dźwięki uszkadzają komórki rzęsate w uchu wewnętrznym i zaburzają drogi słuchowe, powodując upośledzenie słuchu.

Protokół

Wszystkie procedury z udziałem modeli zwierzęcych zostały zweryfikowane przez lokalną instytucjonalną komisję ds. opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Indukcja ubytku słuchu wywołanego hałasem (NIHL) u myszy

1. Przygotuj klatkę dla myszy eksperymentalnych
   1. Aby to zrobić, użyj klatki pułapki na szczury o wymiarach 14 cm × 17 cm × 24 cm. Pokrój cztery kawałki tektury falistej na odpowiednie rozmiary, tak aby zmieściły się w klatce (13 cm × 23 cm i 13 cm × 16 cm).
   2. Aby zapobiec przecięciu stóp myszy przez siatkę, umieść dwa kawałki odpowiednio na dole i z tyłu. Umieść pozostałe dwa elementy prostopadle do siebie, aby podzielić przestrzeń w klatce na ćwiartki.
2. Przeprowadź to badanie w dźwiękoszczelnym pudełku. Umieść głośnik 8.5 cm przed klatką i umieść zarówno głośnik, jak i klatkę w dźwiękoszczelnym pudełku.
3. Otwórz aplikację CLIO.
4. Przesuń kursor na ikonę głośnika, a następnie kliknij TwoSin. Wprowadź i zmień wartość Freq 1 na 1000 Hz i Freq 2 na 6000 Hz i kliknij OK , aby rozpocząć odtwarzanie dźwięku.
5. Na karcie Leq zmień decybele woltów (dBV) na decybele Poziom ciśnienia akustycznego (dBSPL). Po ustawieniu czasu w interfejsie oprogramowania kliknij przycisk zielonego trójkąta, aby odtworzyć dźwięk.
6. Umieść mikrofon przed głośnikiem w odległości 8.5 cm, aby skalibrować poziom hałasu (Rysunek 1). Dostosuj poziom hałasu do 125 dB SPL-A i stale monitoruj przez co najmniej 3 minuty, aby upewnić się, że poziom hałasu jest wystarczająco stabilny. Użyj generatora, analizatora i wzmacniacza, aby tworzyć i kontrolować hałas. (Rysunek 2)
   UWAGA: Wykonaj ten krok w dźwiękoszczelnym pudełku, aby uniknąć uszkodzenia słuchu operatora.
7. Umieść cztery samce myszy C57BL/6J w klatce (po jednej na każdą ćwiartkę) w celu narażenia na hałas. Losowo przypisz myszy w każdej ćwiartce podczas ekspozycji na hałas. Umieść mikrofon na górze klatki, aby monitorować poziom hałasu podczas ekspozycji na hałas (Rysunek 3).
   UWAGA: Wykonaj ten krok w dźwiękoszczelnym pudełku, aby uniknąć uszkodzenia słuchu operatora.
8. Wystawiaj myszy na działanie hałasu o częstotliwościach 1 kHz i 6 kHz nieprzerwanie przez 6 godzin dziennie przez 5 kolejnych dni.

Wyniki

Rysunek 1: Obliczanie napięcia na podstawie kalibracji. Dla każdej określonej częstotliwości wartość wybranego napięcia (oś pozioma) zostanie wprowadzona do krzywej kalibracyjnej w celu uzyskania ...

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
1/4" CCP Standardowy zestaw mikrofonów swobodnego pola	GRAS	428158	Dla ekspozycji
klatka pułapka na szczury			14 cm x 17 cm x 24cm
Wzmacniacz dźwięku, MT-1000	unika		Dla ekspozycji na hałas
Generator/analizator dźwięku/różne, FW-02	CLIO	620300719	Dla ekspozycji
Komora dźwiękoszczelna	Technologia elektroakustyczna IEA		Dla ekspozycji na hałas i ABR
Głośnik	IEA Electro-Acoustic Technologia		Dla ekspozycji na hałas

na hałas na hałas