Mikroskopia dwufotonowa astrocytów i neuronów pobudzających w oczyszczonej tkance hipokampa myszy

Streszczenie

Źródło: Refaeli, R., i wsp., Badanie interakcji przestrzennej między astrocytami a neuronami w oczyszczonych mózgach. J. Vis. Exp. (2022)

Film przedstawia przygotowanie komora i neuroobrazowanie oczyszczonej tkanki hipokampa myszy przy użyciu mikroskopii dwufotonowej w celu wizualizacji interakcji przestrzennych między fluorescencyjnie znakowanymi astrocytami a neuronami pobudzającymi.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące próbek zwierzęcych zostały sprawdzone i zatwierdzone przez odpowiednią komisję ds. oceny etycznej zwierząt.

Wyniki

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
AAV1-GFAP::TdTomato	ELSC Vector Core Facility (EVCF)		Wektor wirusowy używany do wykrywania astrocytów
AAV5-CaMKII::eGFP	ELSC Vector Core Facility (EVCF)		Wektor wirusowy używany do wykrywania neuronów
AAV5-CaMKII::H2B-eGFP	ELSC Vector Core Facility (EVCF)		Wektor wirusowy używany do wykrywania jąder neuronalnych
AAV5-CaMKII::TdTomato	ELSC Vector Core Facility (EVCF)		Wektor wirusowy używany do wykrywania neuronów
Imaris software	Bitplane, UK<	Oprogramowanie, które umożliwia analizę 3D obrazów
RapiClear	SunJin lab	#RC147002
RapiClear CS	SunJin lab	#RCCS002
SyGlass software			Oprogramowanie, które umożliwia analizę 3D obrazów przy użyciu rzeczywistości wirtualnej
Mikroskop dwufotonowy	Neurolabware		Ti:laser szafirowy (Chameleon Discovery TPC, Coherent), lampy foto-powielacza GaAsP (Hamamatsu, H10770-40) , filtr pasmowo-przepustowy (Semrock), obiektyw zanurzeniowy 16x (Nikon, 0.8 NA)
VA-044 Inicjator	Wako	#011-19365

td style='overflow:hidden;padding:0px 3px;vertical-align:bottom;'>