Wielospektralne obrazowanie odbicia rozproszonego przepływu krwi i struktury tkanek w mózgu szczura

Streszczenie

Źródło: Nishidate, I., et al. Jednoczesna ocena hemodynamiki mózgu i właściwości rozpraszania światła mózgu szczura In Vivo przy użyciu wielospektralnego obrazowania odbicia rozproszonego. J. Vis. Exp. (2017)

Ten film demonstruje zastosowanie wielospektralnego obrazowania odbicia rozproszonego do analizy przepływu krwi w mózgu, poziomu tlenu i zmian struktury tkanek u znieczulonego szczura, zapewniając wgląd w hemodynamikę i morfologię mózgu w różnych warunkach.

Protokół

Wszystkie procedury z udziałem modeli zwierzęcych zostały zweryfikowane przez lokalną instytucjonalną komisję ds. opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Akwizycja przykładowych obrazów
   Uwaga: Obrazy natężenia rozproszonego światła odbitego w naświetlonym mózgu szczura na dziewięciu długościach fal są rejestrowane i zapisywane na dysku twardym komputera osobistego przy użyciu tych samych warunków akwizycji.
   1. Delikatnie umieść szczura na scenie i powoli dostosuj poziom sceny, aby kamera mogła ustawić ostrość na powierzchni mózgu szczura.
   2. Wybierz polecenie "zapisz" z menu plików, aby zapisać obraz do pliku.
   3. Zmień położenie filtra, obracając pokrętło filtra.
   4. Zapisz obraz na innych długościach fal zgodnie z procesem opisanym powyżej. Nazwa pliku powinna identyfikować próbkę i długość fali (e.g., R500, R520, R540 ... R760).
2. Akwizycja ciemnych obrazów
   UWAGA: Kamera CCD (charged-coupled device) może generować natężenie światła w odpowiedzi na sygnał elektryczny. Jednak występuje niewielka moc wyjściowa spowodowana szumami w obwodach elektrycznych i detektorach, nawet jeśli światło nie dostaje się do detektora; Nazywa się to szumem ciemnego prądu. Aby dokładnie zmierzyć natężenie widmowe światła, składową prądu ciemnego należy zarejestrować jako ciemny obraz, a następnie odjąć od mierzonego sygnału. Ciemny obraz to obraz zrobiony z zablokowaną ścieżką światła.
   1. Wyłącz halogen lamp źródło światła.
   2. Zablokuj drogę światła do systemu kamer CCD za pomocą płytki ekranującej.
   3. Wybierz polecenie "zapisz" z menu plików, aby zapisać obraz do pliku. Nazwa pliku powinna identyfikować próbkę (e.g., Dark).

Materiały