$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Badania neuroobrazowe ludzkich procesów poznawczych, sensorycznych i motorycznych opierają się zazwyczaj na technikach nieinwazyjnych, takich jak elektroencefalografia (EEG), magnetoencefalografia lub funkcjonalny rezonans magnetyczny. Techniki te charakteryzują się albo immanentnie niską rozdzielczością czasową, albo niską rozdzielczością przestrzenną, a ponadto cierpią z powodu niskiego stosunku sygnału do szumu i/lub słabej czułości na wysokie częstotliwości. W związku z tym są one suboptimalne do badania krótkotrwałej dynamiki czasowo-przestrzennej wielu podstawowych procesów mózgowych. W przeciwieństwie do nich, inwazyjna technika elektrokortykografii (ECoG) dostarcza sygnałów mózgowych o wyjątkowo wysokim stosunku sygnału do szumu, mniejszej podatności na artefakty niż EEG oraz wysokiej rozdzielczości przestrzennej i czasowej (tj. odpowiednio <1 cm/<1 millisecond). ECoG polega na pomiarze elektrycznych sygnałów mózgowych przy użyciu elektrod implantowanych podtwardówkowo na powierzchni mózgu. Niedawne badania wykazały, że amplitudy ECoG w określonych pasmach częstotliwości niosą istotne informacje o aktywności związanej z zadaniem, takiej jak wykonanie i planowanie ruchowe1, przetwarzanie słuchowe2 oraz uwaga wizualno-przestrzenna3. Większość tych informacji jest rejestrowana w wysokim zakresie gamma (około 70-110 Hz). W związku z tym aktywność gamma została zaproponowana jako wiarygodny i ogólny wskaźnik lokalnej funkcji kory1-5. ECoG może również ujawniać łączność funkcjonalną i rozdzielać subtelniejszą dynamikę czasowo-przestrzenną związaną z zadaniem, poszerzając tym samym naszą wiedzę na temat wielkoskalowych procesów korowych. Okazało się to szczególnie przydatne w rozwoju technologii interfejsów mózg-komputer (BCI) do dekodowania intencji użytkownika w celu usprawnienia lub poprawy komunikacji6 oraz kontroli7. Niemniej jednak, ludzkie dane ECoG są często trudne do uzyskania ze względu na ryzyko i ograniczenia związane z inwazyjnymi procedurami oraz konieczność rejestracji w warunkach klinicznych. Mimo to, monitorowanie kliniczne w celu lokalizacji ognisk epileptycznych stwarza wyjątkową i cenną okazję do gromadzenia ludzkich danych ECoG. Opisujemy nasze metody rejestracji ECoG i demonstrujemy, jak wykorzystać te sygnały w ważnych zastosowaniach w czasie rzeczywistym, takich jak mapowanie kliniczne i interfejsy mózg-komputer. Nasz przykład wykorzystuje platformę programową BCI20008,9 oraz metodę SIGFRIED10, aplikację do mapowania funkcji mózgu w czasie rzeczywistym. Procedura ta dostarcza informacji, które klinicyści mogą następnie wykorzystać do prowadzenia złożonego i żmudnego procesu mapowania funkcjonalnego za pomocą stymulacji elektrycznej.
Wymagania wstępne i planowanie:
Pacjenci z lekooporną padaczką częściową mogą być kandydatami do chirurgicznej resekcji ogniska padaczkowego w celu zminimalizowania częstotliwości napadów. Przed resekcją pacjenci poddawani są monitorowaniu za pomocą elektrod podtwardówkowych w dwóch celach: po pierwsze, aby zlokalizować ognisko padaczkowe, a po drugie, aby zidentyfikować pobliskie krytyczne obszary mózgu (tj. korę elokwentną), w których resekcja mogłaby doprowadzić do trwałych deficytów funkcjonalnych. W celu implantacji elektrod przeprowadza się kraniotomię w celu otwarcia czaszki. Następnie siatki i/lub paski elektrod są umieszczane na korze, zazwyczaj pod oponą twardą. Typowa siatka składa się z zestawu 8 x 8 elektrod platynowo-irydowych o średnicy 4 mm (powierzchnia eksponowana 2,3 mm) zatopionych w silikonie, z odległością międzyelektrodową wynoszącą 1 cm. Pasek zazwyczaj zawiera 4 lub 6 takich elektrod w jednej linii. Lokalizacja tych siatek/pasków jest planowana przez zespół neurologów i neurochirurgów na podstawie wcześniejszego monitorowania EEG, strukturalnego MRI mózgu pacjenta oraz istotnych czynników z historii choroby pacjenta. Ciągły zapis w okresie od 5 do 12 dni służy do lokalizacji ognisk padaczkowych, a stymulacja elektryczna za pomocą implantowanych elektrod pozwala klinicystom na mapowanie kory elokwentnej. Po zakończeniu okresu monitorowania eksplantacja elektrod oraz resekcja terapeutyczna są przeprowadzane wspólnie w ramach jednego zabiegu.
Poza głównym celem klinicznym, monitorowanie inwazyjne stwarza również wyjątkową okazję do pozyskiwania ludzkich danych ECoG na potrzeby badań neuronaukowych. Decyzja o włączeniu potencjalnego pacjenta do badania opiera się na planowanej lokalizacji elektrod, wynikach neuropsychologicznych pacjenta oraz jego świadomej zgodzie, która wynika ze zrozumienia, że udział w badaniach jest opcjonalny i nie jest powiązany z leczeniem. Jak w przypadku wszystkich badań z udziałem ludzi, protokół badawczy musi zostać zatwierdzony przez szpitalną komisję bioetyczną. Decyzja o przeprowadzeniu poszczególnych zadań eksperymentalnych jest podejmowana każdego dnia i zależy od wytrzymałości oraz chęci pacjenta do udziału. Niektóre lub wszystkie eksperymenty mogą zostać uniemożliwione przez problemy związane ze stanem klinicznym pacjenta, takie jak pooperacyjny obrzęk twarzy, przejściowa afazja, częste napady, zmęczenie i splątanie po napadzie oraz ogólny ból lub dyskomfort.
W Oddziale Monitorowania Padaczki w Albany Medical Center w Albany w stanie Nowy Jork monitorowanie kliniczne jest prowadzone całą dobę z wykorzystaniem 192-kanałowego systemu monitorującego Nihon-Kohden Neurofax. Nagrania badawcze są realizowane we współpracy z Wadsworth Center Departamentu Zdrowia Stanu Nowy Jork w Albany. Sygnały z elektrod ECoG są przesyłane jednocześnie do systemów badawczych i klinicznych za pomocą rozdzielaczy. Aby zapewnić brak zakłóceń między systemem klinicznym a badawczym, oba systemy zazwyczaj wykorzystują oddzielne uziemienia. W rzeczywistości czasami implantuje się epiduralny pasek elektrod w celu zapewnienia uziemienia dla systemu klinicznego. Niezależnie od tego, czy stosowany jest system rejestracji badawczej, czy klinicznej, elektrodę uziemiającą wybiera się w taki sposób, aby znajdowała się ona w odległości od przewidywanego ogniska padaczkowego oraz od obszarów kory istotnych dla badania. Nasz system badawczy składa się z ośmiu zsynchronizowanych 16-kanałowych jednostek wzmacniająco-cyfryzujących g.USBamp (g.tec, Graz, Austria). Wybrano je ze względu na certyfikację bezpieczeństwa oraz zatwierdzenie przez FDA do rejestracji inwazyjnych, bardzo niski poziom szumów w zakresie wysokich częstotliwości, w którym znajdują się interesujące nas sygnały, a także dzięki dostarczonemu zestawowi SDK, który umożliwia ich integrację z autorskim oprogramowaniem badawczym. Aby dokładnie zarejestrować sygnał wysokiej gamma, sygnały są nabywane z częstotliwością próbkowania 1200Hz, co jest wartością znacznie wyższą niż w typowym badaniu EEG lub w wielu systemach monitorowania klinicznego. Wbudowany filtr dolnoprzepustowy automatycznie zapobiega powstawaniu aliasingu sygnałów o częstotliwości wyższej, niż jest w stanie zarejestrować cyfryzer. Kierunek spojrzenia pacjenta jest śledzony za pomocą monitora z wbudowanym systemem eye-trackingowym Tobii T-60 (Tobii Tech., Sztokholm, Szwecja). Dodatkowe akcesoria, takie jak joystick, bluetooth Wiimote (Nintendo Co.), rękawica danych (5th Dimension Technologies), klawiatura, mikrofon, słuchawki lub kamera wideo, są podłączane w zależności od wymagań konkretnego eksperymentu.
Gromadzenie danych, prezentacja bodźców, synchronizacja z różnymi akcesoriami wejścia/wyjścia oraz analiza i wizualizacja w czasie rzeczywistym są realizowane przy użyciu naszego oprogramowania BCI20008,9. BCI2000 to ogólnodostępny, ogólnego przeznaczenia system programistyczny do akwizycji, przetwarzania i sprzężenia zwrotnego danych biosygnałów w czasie rzeczywistym. Zawiera on zestaw gotowych modułów, które można elastycznie konfigurować dla wielu różnych celów oraz rozszerzać o własny kod badaczy napisany w językach C++, MATLAB lub Python. BCI2000 składa się z czterech modułów komunikujących się ze sobą za pomocą protokołu sieciowego: modułu Source (źródło), który odpowiada za akwizycję sygnałów mózgowych z jednego z 19 różnych systemów sprzętowych od różnych producentów; modułu Signal Processing (przetwarzanie sygnałów), który wyodrębnia istotne cechy ECoG i przekształca je w sygnały wyjściowe; modułu Application (aplikacja), który dostarcza bodźce i sprzężenie zwrotne do badanego; oraz modułu Operator (operator), który zapewnia interfejs graficzny dla badacza.
U danego pacjenta można przeprowadzić szereg różnych eksperymentów. Priorytet poszczególnych badań będzie zależał od lokalizacji elektrod u konkretnego pacjenta. Zazwyczaj jednak rozpoczynamy eksperymenty od zastosowania metody mapowania SIGFRIED (SIGnal modeling For Realtime Identification and Event Detection), która w czasie rzeczywistym wykrywa i wyświetla istotną aktywność związaną z wykonywanym zadaniem. Powstała mapa funkcjonalna pozwala na dalsze dostosowanie kolejnych protokołów eksperymentalnych, a także może stanowić przydatny punkt wyjścia dla tradycyjnego mapowania za pomocą elektrokortykalnej stymulacji (ECS).
Chociaż mapowanie za pomocą elektrycznej stymulacji kory (ECS) pozostaje złotym standardem w przewidywaniu wyniku klinicznego resekcji, proces ten jest czasochłonny i wiąże się z innymi problemami, takimi jak wyładowania pooperacyjne lub napady drgawek. W związku z tym pasywna technika mapowania funkcjonalnego może okazać się cenna w dostarczeniu wstępnej oceny lokalizacji kory elokwentnej, która może być następnie potwierdzona i doprecyzowana za pomocą ECS. Wykazano, że wyniki uzyskane dzięki naszej pasywnej technice mapowania SIGFRIED wykazują znaczną zgodność z wynikami uzyskanymi za pomocą mapowania ECS10.
Protokół opisany w niniejszej pracy ustanawia ogólną metodologię gromadzenia ludzkich danych ECoG, a następnie ilustruje, w jaki sposób można uruchamiać eksperymenty z wykorzystaniem platformy programistycznej BCI2000. Na koniec, jako konkretny przykład, opisujemy sposób przeprowadzania pasywnego mapowania funkcjonalnego z wykorzystaniem systemu SIGFRIED opartego na BCI2000.