$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Hemocyty owadów (odpowiednik białych krwinek ssaków) odgrywają ważną rolę w wielu procesach fizjologicznych w całym cyklu życia owada 1. W stadiach larwalnych owadów należących do rzędów Lepidoptera (i motyle) oraz Diptera (muchówki) hemocyty powstają z gruczołu chłonnego (wyspecjalizowanego narządu krwiotwórczego) lub komórek embrionalnych i mogą być przenoszone do stadium dorosłego. Hemocyty embrionalne biorą udział w migracji komórek podczas rozwoju i regulacji chemotaksji podczas stanu zapalnego. Biorą również udział w apoptozie komórek i są niezbędne do embriogenezy 2. Hemocyty pośredniczą w ramieniu komórkowym wrodzonej odpowiedzi immunologicznej owada, która obejmuje kilka funkcji, takich jak rozprzestrzenianie się komórek, agregacja komórek, tworzenie guzków, fagocytoza i enkapsulacja obcych najeźdźców 3. Są również odpowiedzialne za koordynację specyficznych humoralnych mechanizmów obronnych owadów podczas infekcji, takich jak produkcja peptydów przeciwdrobnoustrojowych i innych cząsteczek efektorowych 4, 5. Morfologia i funkcja hemocytów była badana głównie w genetycznych lub fizjologicznych modelach owadów, w tym muszki owocowej Drosophila melanogaster 6, 7, komarów Aedes aegypti i Anopheles gambiae 8, 9 oraz rogownicy tytoniowej Manduca sexta 10, 11. Obecnie jednak niewiele jest informacji na temat różnorodności, klasyfikacji, morfologii i funkcji hemocytów u niemodelowych gatunków owadów, zwłaszcza tych zebranych ze środowiska naturalnego12.
Tutaj opisujemy prosty i skuteczny protokół ekstrakcji hemocytów z dzikich gąsienic. Używamy gąsienic przedostatniego stadium rozwojowego Lithacodes fasciola (ślimaka żółtoramiennego) (ryc. 1) i Euclea delphinii (ślimak dębu kolczastego) (Lepidoptera: Limacodidae) i wykazujemy, że można wyizolować wystarczającą ilość hemocyfy (krwi owadów) i policzyć liczbę hemocytów z poszczególnych larw. Metoda ta może być stosowana do skutecznego badania typów hemocytów u tych gatunków, a także u innych pokrewnych gąsienic lepidoptera zebranych z pola, lub może być łatwo połączona z testami immunologicznymi przeznaczonymi do badania funkcji hemocytów po zakażeniu organizmami mikrobiologicznymi lub pasożytniczymi 13.