Ten artykuł zawiera protokół do echokardiograficznej oceny wielkości prawej komory i nadciśnienia płucnego u myszy. Zastosowania obejmują określanie fenotypu i seryjną ocenę w transgenicznych i indukowanych toksynami mysich modelach kardiomiopatii i chorób naczyń płucnych.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Echokardiograficzna ocena prawego serca u myszy
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Transgeniczne i toksyczne modele tętniczego nadciśnienia płucnego (PAH) są szeroko stosowane do badania patofizjologii PAH i do badania potencjalnych terapii. Biorąc pod uwagę koszty i czas związany z tworzeniem zwierzęcych modeli chorób, niezwykle ważne jest, aby naukowcy dysponowali narzędziami do dokładnej oceny fenotypowej ekspresji choroby. Dysfunkcja prawej komory jest głównym objawem nadciśnienia płucnego. Echokardiografia jest podstawą nieinwazyjnej oceny funkcji prawej komory serca w modelach gryzoni i ma tę zaletę, że zapewnia wyraźną translację na ludzi, u których stosuje się to samo narzędzie. Brakuje opublikowanych protokołów echokardiograficznych w mysich modelach PAH.
W tym artykule opisujemy protokół oceny RV i funkcji naczyń płucnych w mysim modelu PAH z dominującą ujemną mutacją BMPRII; jednak ten protokół ma zastosowanie do wszelkich chorób wpływających na układ naczyniowy płuc lub prawe serce. Zapewniamy szczegółowy opis przygotowania zwierząt, akwizycji obrazu i obliczeń hemodynamicznych objętości wyrzutowej, rzutu serca oraz oszacowania ciśnienia w tętnicy płucnej.
Wprowadzenie
Podwyższone ciśnienie w płucach i dysfunkcja prawej komory (RV) są cechami charakterystycznymi choroby naczyń płucnych u modeli zwierzęcych i u pacjentów z tętniczym nadciśnieniem płucnym (PAH). Transgeniczne i toksyczne (np. monokrotalina lub hipoksja) modele WWA są szeroko stosowane do badania patofizjologii WWA i badania potencjalnych terapii. Biorąc pod uwagę koszty i czas związany z tworzeniem zwierzęcych modeli chorób, niezwykle ważne jest, aby naukowcy dysponowali narzędziami do dokładnej oceny fenotypowej ekspresji choroby.
Echokardiografia jest podstawą nieinwazyjnej oceny funkcji komór w modelach gryzoni1,2. Ec....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
1. Przygotowanie sprzętu
- Sprawdź przetwornik ultradźwiękowy pod kątem wad. W zależności od używanego sprzętu ten krok może być niepotrzebny.
- W przypadku zaobserwowania pęcherzyka powietrza należy odkręcić znajdującą się po prawej stronie głowicy przetwornika i wlać sterylną wodę przez otwór za pomocą igły 26 G. Pęcherzyki powietrza wewnątrz głowicy przetwornika są powszechne. Utrudnią one pozyskiwanie wysokiej jakości obrazów.
- Sprawdź, czy membrana zakrywająca sondę nie jest szczelna lub dziurawa. Wymień w razie potrzeby.
- Otwórz oprogramowanie i zainicjuj sondę.
- Z rozwijanego menu wybierz pakiet k....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Głównymi celami niniejszego protokołu są ilościowe określenie wielkości i funkcji RV oraz zrozumienie stopnia zmian chorobowych w naczyniach płucnych. Odpowiednie przygotowanie zarówno myszy, jak i sprzętu do echokardiografii jest niezbędne do uzyskania dokładnych i powtarzalnych wyników. Klatka piersiowa myszy powinna zostać wydepilowana, a kończyny przymocowane do platformy obrazowej za pomocą taśmy. Anestezję, w tym przypadku izoflurane, podaje się za pomocą stożka nosowego. Należy sprawdzić przetwornik pod kątem defe.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Mysie modele chorób, zarówno transgeniczne, jak i związane z toksynami, wymagają walidacji fenotypowej, że model faktycznie podsumowuje ludzką chorobę, którą ma naśladować. Ta walidacja może być często osiągnięta przez obecność lub brak określonej cechy, na przykład rozwoju guza. Jednak modele, które powodują nieprawidłowości hemodynamiczne, takie jak modele zwężenia aorty przerostu lewej komory lub nasz transgeniczny model PAH, są trudniejsze do zweryfikowania. Modele te wymagają albo końcowego pomiaru hemodynamiki, alb.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy nie mają nic do ujawnienia.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Vevo 770 System mikroultrasonograficzny o wysokiej rozdzielczości | Visualsonics Inc. | Więcej informacji można znaleźć na stronie www.visualsonics.com/products | |
| Głowica skanująca RMV (Real-Time MicroVisualization) 704B 40 mH z hermetyzowanym przetwornikiem | Visualsonics Inc. | Więcej informacji można znaleźć na stronie www.visualsonics.com/products | |
| Vevo Integrated Rail System, w tym Physioogical Monitoring System | Visualsonics Inc. | Więcej informacji można znaleźć na stronie www.visualsonics.com/products | |
| Monitor komputerowy skonfigurowany do użytku z Vevo770 | DELL lub innej myszy | ||
| skonfigurowanej do użytku z Vevo770 | General Supplier | ||
| Vevo770 Pakiet kardiologiczny | Visualsonics Inc. | uzyskaj więcej informacji na stronie www.visualsonics.com/products | |
| Przenośny stacjonarny aparat anestezjologiczny VetEquip z waporyzatorem izofluranowym | VetEquip | uzyskaj więcej informacji na stronie vetequip.com | |
| Pojemniki na gazy odlotowe z węgla aktywowanego | VetEquip/Vaporguard | 931401 | uzyskaj więcej informacji na stronie vetequip.com |
| Puralube Eye Maść | Henry Schein | uzyskaj więcej informacji na stronie henryschein.com | |
| Ecogel 100 Żel ultradźwiękowy | EcoMed Pharmaceuticals | 30GB | Uzyskaj więcej informacji na ecomed.com |
| Taśma transpore 3M | Fisher Scientific | 1527-0 | uzyskaj więcej informacji na fishersci.com |
| Mały śrubokręt płaski | Dostawca | ||
| Sterylny H2O | DDI H2O z kranu, a następnie autoklaw | ||
| 6 w bawełnie Aplikatory z końcówką | Fisher Scientific | uzyskaj więcej informacji na stronie fishersci.com | |
| Nair (krem do depilacji) | Dostawca | ||
| Gąbki 2 cale x 2 cale Gąbki z gazy | Fisher Scientific | uzyskaj więcej informacji na fishersci.com |
Bibliografia
- Urboniene, D., Haber, I., Fang, Y. H., Thenappan, T., Archer, S. L. Validation of high-resolution echocardiography and magnetic resonance imaging vs. high-fidelity catheterization in experimental pulmonary hypertension. Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. 299, 401-412 (2010).
- Rottman, J. N., Ni, G., Brown, M.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
