Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Zakopywanie marmuru i rozdrabnianie gniazd jako testy powtarzających się, kompulsywnych zachowań u myszy

29.7K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/50978

⸱

24 grudnia 2013

W tym artykule

Podsumowanie

Choroba, uraz głowy, modyfikacje genetyczne i leczenie myszy lekami mogą mieć głęboki wpływ na zachowanie. Wykorzystując dobrze scharakteryzowane i zweryfikowane podejścia, takie jak zakopywanie marmuru i rozdrabnianie gniazd, zachowania podobne do kompulsywnych można dokładnie udokumentować u myszy jako modele ludzkiego zaburzenia obsesyjno-kompulsywnego i zaburzenia ze spektrum autyzmu.

Streszczenie

Zaburzenia obsesyjno-kompulsywne (OCD) i zaburzenia ze spektrum autyzmu (ASD) są poważnymi i wyniszczającymi schorzeniami psychicznymi, a każde z nich stanowi poważny problem zdrowia publicznego, szczególnie u dzieci. Oba te stany są uwypuklone przez powtarzające się wyrażanie bezsensownych zachowań. Osoby z OCD często wykazują sprawdzanie, częste mycie rąk i liczenie. Dzieci z ASD angażują się również w powtarzające się stukanie, trzepotanie ramionami lub dłońmi oraz kołysanie. Zachowania te mogą się znacznie różnić pod względem intensywności i częstotliwości ekspresji. Bardziej intensywne formy powtarzających się zachowań mogą nawet prowadzić do kontuzji (np. nadmierna pielęgnacja, mycie rąk i samostymulacja). Zachowania te są zatem bardzo destrukcyjne i utrudniają normalny dyskurs społeczny. Możliwości leczenia powtarzających się zachowań w OCD i ASD są nieco ograniczone i istnieje duże zainteresowanie opracowaniem skuteczniejszych terapii dla każdego schorzenia. W ciągu ostatnich trzech dekad opracowano liczne modele zwierzęce do oceny zachowań podobnych do kompulsywnych. Być może modelami zwierzęcymi o największej trafności i łatwości użycia są test zakopywania marmuru i test rozdrabniania gniazda. Oba testy wykorzystują fakt, że zachowania docelowe występują spontanicznie u myszy. W teście zakopywania marmuru 20 kulek jest ułożonych na powierzchni czystej ściółki. Liczba kulek zakopanych podczas 30-minutowej sesji jest oceniana przez badaczy ślepych na leczenie lub status badanych. W teście rozdrabniania gniazda gniazdo składające się z rozdrobnionego włókna bawełnianego jest wstępnie ważone i umieszczane na wierzchu ściółki klatki, a następnie określa się ilość gniazda pozostałą nienaruszoną po 30-minutowej sesji badawczej. Obecnie opisujemy protokoły i pokazujemy dokumentację filmową z zakopywania marmuru i rozdrabniania gniazd. Oba testy są łatwe i dokładne i każdy z nich jest wrażliwy na niewielkie zmiany w ekspresji zachowań kompulsywnych, które wynikają z manipulacji genetycznych, choroby lub urazu głowy.

Wprowadzenie

Mysie modele ludzkich zachowań, a w szczególności zaburzeń psychicznych, stanowią ważne i niezbędne eksperymentalne podejścia do badania mechanizmów chorobowych i opracowywania nowych terapii. Wiele chorób psychicznych pozostaje niezwykle trudnych do modelowania u zwierząt (np. schizofrenia). Jednak zwierzęta wykazują dużą liczbę naturalnych i charakterystycznych zachowań, które można łatwo powiązać z podobnymi zachowaniami u ludzi. Ruch lub aktywność lokomotoryczna to jeden z przykładów zachowania u zwierząt, które ma odpowiednik u ludzi. Gryzonie często angażują się w różne powtarzające się zachowania, a przykładami są pielęgnacja lub kopanie. Jednym ze sta....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Wszystkie protokoły z wykorzystaniem zwierząt zostały przeprowadzone zgodnie z zaleceniami zawartymi w Przewodniku dla Opieki i Użytkowania Zwierząt Laboratoryjnych National Institutes of Health. Protokoły zostały zatwierdzone przez Institutional Care and Use Committee Uniwersytetu Stanowego Wayne (zezwolenie o numerze A3310-01).

1. Przygotowanie klatek do zakopania marmuru i rozdrabniania gniazd

  1. Do testu zakopywania marmuru należy używać standardowych klatek dla szczurów z poliwęglanu (26 cm x 48 cm x 20 cm) z zamontowanymi pokrywami filtrów. Dodaj świeży, bezzapachowy materiał ściółkowy dla myszy do każdej klatki na głębokość ....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Główną zaletą testów zakopywania kulek oraz niszczenia gniazda jest fakt, że każdy z nich opiera się na naturalnych i spontanicznych zachowaniach myszy, które można ilościowo określić po zakończeniu badania, co pozwala jednemu badaczowi na przygotowanie eksperymentu, a następnie pozostanie poza pomieszczeniem testowym aż do końca sesji. Krytycznym elementem testu zakopywania kulek jest ostrożne usunięcie badanego zwierzęcia z klatki po zakończeniu testu. Myszy zazwyczaj próbują uniknąć przechwycenia i w tym procesie mogą.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Testy zakopywania marmuru i rozdrabniania gniazd są dobrymi przykładami behawioralnych metod badania powtarzających się i kompulsywnych zachowań u myszy. Oba testy wykazują doskonałą trafność twarzy, budowy i predykcji dla zaburzeń u ludzi, które modelują6-11. Te powtarzające się zachowania są naturalne i spontaniczne u gryzoni, a ich częstotliwość i intensywność mogą się zmieniać po modyfikacjach genetycznych, jak pokazano obecnie, lub po urazie głowy i leczeniu pacjentów lekami. Wartość tych dwóch testów wyn.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy oświadczają, że nie mają konkurencyjnych interesów finansowych.

Podziękowania

Ta praca była wspierana przez granty z Departamentu Spraw Weteranów i Narodowych Instytutów Zdrowia.

....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Szklane kulki zabawkowelokalny sklep z zabawkamiNie dotyczyróżnych stylów, kolorów, przezroczystych i nieprzezroczystych
GniazdaKlatka na myszy AncareNES3600
serii N10AncareN10standardowa klatka dla gryzoni z drucianym wierzchem
Klatka dla szczurów serii R20AncareR20standardowa klatka dla gryzoni z drucianym wierzchem
Bed-o'CobsAndersons8BStandardowa ściółka dla gryzoni, 1/8 cala

Bibliografia

  1. Chamberlain, S. R., Blackwell, A. D., Fineberg, N. A., Robbins, T. W., Sahakian, B. J. The neuropsychology of obsessive compulsive disorder: the importance of failures in cognitive and behavioural inhibition as candidate endophenotypic markers. Neurosci. Biobehav. Rev. 29, 399-419 (2005).
  2. McGuire, J. F., Lewin, A. B., Horng, B., Murphy, T. K., Storch, E. A.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Test zakopywania kulekTest niszczenia gniazdaTesty behawioralne u myszyZwierzęce modele OCDZwierzęce modele ASDMyszy z knockoutem genu TPH2Przygotowanie ściółkiLiczenie kulekWażenie gniazda