Tutaj prezentujemy przegląd procedur przygotowania i obchodzenia się ze zwierzętami wymaganych do bezpiecznego przeprowadzenia obrazowania medycznego w laboratorium o poziomie bezpieczeństwa biologicznego 4 dla zwierząt. Tomografia komputerowa pozorowanej zakażonej świnki morskiej ilustruje te procedury, które można wykorzystać do oceny choroby wywołanej przez patogen o wysokich konsekwencjach.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Środki ostrożności i procedury operacyjne w laboratorium (a)BSL-4: 4. Procedury obrazowania medycznego
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Obrazowanie medyczne z wykorzystaniem modeli zwierzęcych do leczenia chorób ludzkich było wykorzystywane od dziesięcioleci; jednak do niedawna obrazowanie medyczne chorób wywołanych przez patogeny o wysokich konsekwencjach nie było możliwe. W 2014 roku National Institutes of Health, National Institute of Allergy and Infectious Diseases, Integrated Research Facility w Fort Detrick otworzyły placówkę Animal Biosafety Level 4 (ABSL-4) w celu oceny przebiegu klinicznego i patologii chorób zakaźnych u eksperymentalnie zakażonych zwierząt. Do tych ocen badacze mają dostęp do wielu metod obrazowania, w tym tomografii komputerowej (CT), rezonansu magnetycznego, pozytonowej tomografii emisyjnej i tomografii komputerowej z emisją pojedynczych fotonów. Celem tego artykułu jest opisanie procesu bezpiecznego uzyskiwania obrazu CT żywej świnki morskiej w obiekcie ABSL-4. Procedury te obejmują obchodzenie się ze zwierzęciem, znieczulenie oraz przygotowanie i monitorowanie zwierzęcia do czasu wyzdrowienia z sedacji. Omówimy również przygotowanie sprzętu do obrazowania, przeprowadzanie kontroli jakości, metody komunikacji ze strony "gorącej" (zawierającej patogeny) na "zimną" oraz przenoszenie zwierzęcia z pomieszczenia przetrzymywania do pracowni obrazowania.
Wprowadzenie
Misją Zintegrowanego Ośrodka Badawczego Narodowego Instytutu Alergii i Chorób Zakaźnych (NIAID) w Fort Detrick w Frederick MD (IRF-Frederick) jest przeprowadzanie nowych badań nad chorobami zakaźnymi w celu zrozumienia klinicznych procesów chorobowych, które korelują z ciężkością choroby wywołanej przez mikroorganizmy. IRF-Frederick ma unikalną zdolność do wykonywania obrazowania medycznego w modelach zwierzęcych patogenów o wysokich konsekwencjach w laboratorium ABSL-41. Metody obrazowania dostępne dla badaczy obejmują: tomografię komputerową (CT), rezonans magnetyczny (MRI), pozytonową tomografię emisyjną (PET), tomografię komputerową pojedynczych fotonów (SPECT), ultrasonografię, promieniowanie rentgenowskie i fluoroskopię. Naukowcy wykorzystują dostępne możliwości obrazowania do monitorowania postępu choroby i oceny skuteczności interwencji, takich jak leczenie farmakologiczne i szczepienia, w badaniach podłużnych.
Metody obrazowania w IRF-Frederick zostały specjalnie zaprojektowane, aby utrzymać kluczowe komponenty sprzętu poza wysokim poziomem hermetyczności2,3 i dostępne do konserwacji i naprawy. Taka konstrukcja rozdziela zestaw obrazowania na "gorącą" (zawierającą patogen) i "zimną stronę". Aby osiągnąć tę separację, skonstruowano specjalnie zaprojektowane rurki, które rozszerzają przestrzeń o wysokim stopniu hermetyzacji do otworów każdej metody obrazowania (ryc. 1). Rurki te nie tylko zapewniają biologiczną hermetyczność, ale także chronią sprzęt do obrazowania przed gazami i chemikaliami używanymi do dekontaminacji laboratorium o wysokim stopniu hermetyzacji. Naukowcy i technolodzy zajmujący się obrazowaniem obsługują skanery po "zimnej stronie", podczas gdy pracownicy medycyny porównawczej (CM) zajmują się i monitorują zwierzęta po "gorącej stronie". Ponieważ personel CM musi ściśle współpracować z naukowcami zajmującymi się obrazowaniem, aby koordynować te eksperymenty, ta separacja może powodować problemy z komunikacją.
Po ocenie dostępnych opcji, pracownicy CM zostali wyposażeni w słuchawki Bluetooth, które przesyłają krótkofalowe fale radiowe o ultrawysokiej częstotliwości do telefonów używanych do dzwonienia do personelu obrazującego poza przechowalnią. Ze względu na konstrukcję obiektu, w każdym z pomieszczeń musiały zostać zainstalowane bezprzewodowe punkty dostępowe, aby zniwelować zakłócenia sygnału spowodowane warstwami cementu i stali między "gorącą" i "zimną stroną". W ten sposób komunikacja między personelem CM noszącym hałaśliwe skafandry nadciśnieniowe a personelem obrazującym na zewnątrz wysokiego poziomu hermetyczności jest teraz niezawodna. Kamery zostały również zainstalowane po gorącej stronie pomieszczeń do obrazowania, aby personel zajmujący się obrazowaniem mógł zobaczyć aktywność po "gorącej stronie". Dzięki kamerom personel zajmujący się obrazowaniem może kierować technikami CM w zakresie pozycjonowania zwierząt lub wszelkich zmian w protokole obrazowania w ostatniej chwili.
Wszystkie prace w laboratorium kombinezonów IRF-Frederick ABSL-4 wymagają od personelu noszenia skafandrów do hermetyzacji nadciśnieniowej4. Noszenie tych kombinezonów zmniejsza mobilność, a ciężkie lateksowe rękawice dołączone do kombinezonu oraz do trzech dodatkowych warstw rękawic pogarszają zręczność. W rezultacie procedury trwają dłużej, a zadania wymagające umiejętności motorycznych są znacznie trudniejsze. Wraz ze wzrostem poziomu bezpieczeństwa biologicznego obchodzenie się ze zwierzętami i manipulacje nimi stają się coraz trudniejsze i bardziej czasochłonne, szczególnie w przypadku małych zwierząt. Procedury w laboratorium ABSL-4 mogą trwać do 2-3 razy dłużej niż w laboratorium ABSL-2.
Celem tego artykułu jest wizualne pokazanie wyzwań związanych z obrazowaniem modeli zwierzęcych w środowisku ABSL-4 na przykładzie tomografii komputerowej świnki morskiej.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Ten protokół jest zgodny z poniższymi wytycznymi dotyczącymi opieki nad zwierzętami. Zwierzęta były trzymane w placówce akredytowanej przez Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care International. Wszystkie procedury eksperymentalne zostały zatwierdzone przez Narodowy Instytut Alergii i Chorób Zakaźnych, Zakład Badań Klinicznych, Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt i były zgodne z przepisami ustawy o dobrostanie zwierząt, polityką Publicznej Służby Zdrowia oraz zaleceniami Przewodnika dotyczącego opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych.
1. Przygotuj tomograf komputerowy (po "zimnej stronie")
- Kondycjonuj lampę rentgenowską
- Sprawdź, czy w pomieszczeniu skanowania nie ma żadnego pracownika, a tabela tematów jest pusta.
- Uruchom procedurę kondycjonowania rurki zgodnie ze specyfikacjami producenta skanera.
- Wykonaj kalibrację powietrza
- Upewnij się, że w polu skanowania nie ma żadnych obiektów.
- Procedurę kalibracji powietrza należy przeprowadzić zgodnie ze specyfikacją producenta skanera. Na wielu platformach kalibracja ta jest automatyczna lub półautomatyczna.
- Wykonaj skanowanie kontroli jakości (po "gorącej stronie")
- Wykonaj procedury wejścia do laboratorium skafandra ABSL-4 (szczegółowo opisane w odnośniku5) dodając dodatkowy krok. Jeśli procedury wiążą się z narażeniem na materiały radioaktywne, przypnij dozymetr do fartuchów pod kombinezonem ochronnym. Zwracaj dozymetr co 2 miesiące w celu obliczenia narażenia na promieniowanie.
- Umieść fantom tomografii komputerowej głowy i ciała, który jest wykonany z powietrza, wody i teflonu, w odpowiednim uchwycie na stole skanującym.
- Wykonaj skanowanie kontroli jakości (po "zimnej stronie")
- Od zimnej strony przesuń fantom do środka otworu6.
- Uzyskaj skan przy użyciu laboratoryjnie znormalizowanych parametrów kontroli jakości (QC), aby upewnić się, że skaner jest zgodny ze specyfikacjami producenta.
- Wykonaj komputerową analizę obrazów QC w celu obliczenia średnich i odchyleń standardowych natężenia sygnału w obszarach zainteresowania wyśrodkowanych na każdym rodzaju materiału (powietrze, woda lub teflon) zgodnie z protokołem producenta.
- Powiadom personel CM, że tomograf komputerowy jest gotowy do użycia.
- Zweryfikuj informacje o zwierzęciu (numer identyfikacyjny, wagę, datę urodzenia) z personelem CM.
- Zarejestruj informacje o uczestniku w Bazie Danych Pacjenta.
- Na konsoli tomografu komputerowego (po "zimnej stronie") uzyskaj dostęp do systemu informacji radiologicznej (RIS) skanera. Sprawdź, czy w usługach RIS są wypełnione szczegółowe informacje o harmonogramie skanowania.
- Wybierz bieżący przedmiot i dane demograficzne, takie jak numer identyfikacyjny, wiek, data urodzenia i data egzaminu, a następnie typ egzaminu powinien zostać automatycznie wypełniony.
- Ręcznie wprowadź wagę obiektu.
- Wybierz prawidłową orientację obiektu w gantry CT (np. głowa do przodu, stopy do przodu, leżące, na wznak).
2. Przygotowanie miejsc pracy w laboratorium kombinezonów ABSL-4
- Przygotuj Komorę Bezpieczeństwa Biologicznego II (BSC) lub stół zstępujący w sali zabiegowej dla zwierząt. Włącz BSC (lub stół zstępujący) co najmniej 10 minut przed użyciem.
- Oczyścić i zdezynfekować wewnętrzne powierzchnie BSC lub górną powierzchnię stołu zstępującego za pomocą zatwierdzonego środka dezynfekującego, takiego jak 5% roztwór dezynfekujący dwutorzędowego amoniaku (chlorek n-alkilo-dimetylobenzyloamoniowy, chlorek n-alkilodimetyloetylobenzyloamoniowy). Spryskać wewnętrzne powierzchnie BSC lub górną powierzchnię stołu zstępującego i wytrzeć powierzchnie do sucha po 10 minutach kontaktu. Spryskaj i przetrzyj powierzchnie 70% etanolem, aby usunąć resztki środka dezynfekującego.
- Umieść potrzebny sprzęt i materiały w BSC lub stole zstępującym, w tym skrzynkę indukcyjną do znieczulenia i rękawice do obchodzenia się ze zwierzętami.
- Przygotuj łóżko tomografu komputerowego.
- Ustaw urządzenie do przytrzymywania zwierząt na łóżku tomografii komputerowej.
- Ustaw monitor parametrów życiowych, aby wykrywać tętno i nasycenie tlenem. Jeśli sesja skanowania jest dłuższa niż 10 minut, monitoruj temperaturę.
- Przygotuj maszynę do znieczulenia.
- Sprawdź objętość izofluranu w waporyzatorze i w razie potrzeby dodaj więcej izofluranu.
- Wykonaj próbę szczelności, zwiększając ciśnienie w obwodzie oddechowym środka znieczulającego tlenem, sprawdzając, czy nie ulatnia się gaz i wizualnie sprawdzając maszynę do znieczulania pod kątem wycieków1.
- Jeśli zostanie wykryty wyciek, określ jego źródło, rozwiąż problem i wykonaj kolejny test szczelności, aby sprawdzić, czy poprawki zostały prawidłowo wdrożone.
- Zważ jednorazowy kanister do oczyszczania, który wychwytuje odpadowy gaz znieczulający. Jeśli kanister ma o ≥50 g więcej niż początkowa masa, należy wymienić kanister7.
3. Transport zwierząt z sali zabiegowej dla zwierząt i przygotowanie indukcji znieczulenia w pomieszczeniu tomografu komputerowego (po "gorącej stronie")
- Przenieść klatkę, w której trzyma się świnkę morską, z jednego z pomieszczeń do przetrzymywania gryzoni przylegających do zestawu obrazowania do BSC klasy II.
- Zweryfikuj identyfikator zwierzęcia.
- Wyjmij kartę klatki i trzymaj ją ze zwierzęciem.
- Otwórz pokrywę klatki i załóż rękawice ze skóry zwierzęcej na rękawice kombinezonu nadciśnieniowego. Delikatnie podnieś świnkę morską, umieść zwierzę w pudełku indukcyjnym do znieczulenia i przykryj pudełko pokrywką.
- Wyjąć pudełko indukcyjne znieczulenia zawierające zwierzę z BSC klasy II i umieścić je na wózku transportowym.
- Za pomocą wózka zabierz zwierzę do pomieszczenia tomografu komputerowego.
- W pomieszczeniu tomografu komputerowego natychmiast podłącz kanister do znieczulenia i urządzenie do znieczulenia do skrzynki indukcyjnej. Włącz gazowy tlen do skrzynki indukcyjnej i ustaw parownik tak, aby dostarczał 4% izofluranu w celu wstępnej indukcji znieczulenia8.
- Monitoruj zwierzę podczas indukcji znieczulenia pod kątem odpowiedniej głębokości znieczulenia (np. brak reakcji na bodźce zewnętrzne, napięcie mięśniowe, stabilne tempo oddychania i serca)8.
- Wyłącz znieczulenie do skrzynki indukcyjnej, gdy świnka morska jest w pełni znieczulona.
4. Ułóż obiekt na łóżku do obrazowania w tomografie komputerowym (po "gorącej stronie")
- Wyjmij znieczuloną świnkę morską z pudełka indukcyjnego i umieść na łóżku do obrazowania.
- Umieść świnkę morską na poduszce do trzymania w pozycji leżącej.
- Nałóż maść okulistyczną w oba oczy, aby chronić nabłonek rogówki przed wysuszeniem.
- Podać podtrzymujące znieczulenie izofluranem.
- Umieść stożek nosowy na śwince morskiej i włącz gaz, aby dostarczyć 1 l/min tlenu do stożka nosowego8.
- Ustaw waporyzator tak, aby dostarczał 2-3% izofluranu do świnki morskiej przez stożek nosowy.
- Gdy pacjent osiągnie pożądaną płaszczyznę znieczulenia (brak ruchu, ~60 oddechów na minutę), zmniejsz ustawienie parownika, aby dostarczyć 1,0-1,5% izofluranu w celu utrzymania znieczulenia.
- Monitoruj parametry życiowe, w tym temperaturę ciała, tętno i częstość oddechów. Jeśli częstość oddechów zacznie przyspieszać lub zwalniać, zwiększ lub zmniejsz zawartość procentową izofluranu, odpowiednio9.
- W razie potrzeby zapewnić dodatkowe źródło ciepła w celu utrzymania temperatury ciała świnki morskiej w zakresie od 37 do 39 °C, w zależności od oczekiwanej długości zbierania danych i głębokości utrzymywanego znieczulenia8,9.
- Przymocuj plastikową osłonę na górze poduszki do trzymania.
- Przesuń łoże obrazowania do probówki zabezpieczającej.
5. Ustawianie pola widzenia obrazu
- Aktywuj system laserowy (personel do obrazowania) po "zimnej stronie" pomieszczenia tomografu komputerowego, aby ustawić świnkę morską do badania TK. Użyj przycisków "in" i "out" tabeli, aby zakryć interesującą Cię anatomię pod celownikiem lasera.
- Aby ustawić pole widzenia, użyj przycisku lasera, aby ustawić punkt początkowy nad badaną anatomią.
- Skontaktuj się z personelem CM po "gorącej stronie", aby umieścić ołowianą osłonę między sobą a tomografem komputerowym.
6. Pobieranie obrazów
- Uzyskaj skan ankiety w celu umieszczenia plasterków dla obrazów badania CT zgodnie z protokołem producenta.
- Określ rozmieszczenie plasterków dla obrazów badania CT na obrazach ankietowych.
- Koordynuj działania z personelem "po gorącej stronie", jeśli ma być zastosowana iniekcja kontrastowa.
- Pobierz skan badania zgodnie z protokołem producenta.
- Rekonstrukcja obrazów TK na konsoli skanera zgodnie z protokołem producenta.
- Wysyłaj obrazy do systemu archiwizacji i komunikacji obrazów. Z tego systemu archiwizacji należy przeprowadzić dalsze analizy jakościowe i ilościowe zgodnie z protokołem producenta.
7. Odzyskiwanie po skanowaniu
- Przenieś świnkę morską z łóżka skanera do czystej klatki z mikroizolatorem z jedzeniem i smakołykami.
- Za pomocą wózka przetransportuj klatkę ze zwierzęciem z powrotem do jego pomieszczenia.
- Monitoruj zwierzę aż do całkowitego wyzdrowienia ze znieczulenia.
- Po całkowitym odzyskaniu umieść klatkę z powrotem w wentylowanych stojakach z filtrem HEPA (High Efficiency Particulate Air).
8. Dezynfekcja stanowiska skanera i sprzętu
- Zdezynfekować obszar wnęki skanera (np. powierzchnie, które miały bezpośredni kontakt ze zwierzęciem, łóżko skanera, podłoga w pomieszczeniu skanera, klamki) 5% podwójnym czwartorzędowym roztworem amoniowym przez czas kontaktu wynoszący 10 minut.
- Spłukać powierzchnie 70% roztworem etanolu po 10 minutach ekspozycji na podwójny czwartorzędowy roztwór amoniowy.
- Wytrzyj przedmioty, których nie można spryskać bezpośrednio podwójnym czwartorzędowym roztworem amoniowym (wrażliwy sprzęt elektroniczny), szmatką nasyconą podwójnym czwartorzędowym amoniem, a następnie szmatką nasączoną etanolem.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Ścisłe przestrzeganie wszystkich procedur bezpieczeństwa oraz standardowych procedur operacyjnych dotyczących obchodzenia się ze zwierzętami jest niezbędne do bezpiecznej pracy w laboratorium poziomu ABSL-4. Przenoszenie zainfekowanych zwierząt wewnątrz boksu indukcyjnego z pomieszczenia zabiegowego do zestawu obrazującego minimalizuje ryzyko skażenia wspólnych korytarzy. Dzięki stosowaniu wymaganych procedur, podczas prowadzenia badań w standardzie ABSL-4 w IRF-Frederick nie odnotowano ż...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Poprzednie artykuły z tej serii kładły nacisk na obszerne szkolenie, dbałość o szczegóły, procedury bezpieczeństwa i dodatkowe kontrole inżynieryjne wymagane do bezpiecznej pracy w laboratorium o maksymalnym stopniu hermetyczności12,13. Bezpieczne wykonywanie pracy jest najwyższym priorytetem w tych laboratoriach. Filozofia ta jest jeszcze ważniejsza w przypadku pracy z żywymi zwierzętami ze względu na dodatkowe zagrożenia, takie jak możliwość zadawania przez zakażone zwierzęta ugryzień lub zadrapań lub genero...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy nie mają nic do ujawnienia.
Podziękowania
Treść tej publikacji niekoniecznie odzwierciedla poglądy lub politykę Departamentu Zdrowia i Opieki Społecznej Stanów Zjednoczonych (DHHS) lub instytucji i firm powiązanych z autorami. Prace te zostały częściowo sfinansowane z głównego kontraktu Battelle Memorial Institute z amerykańskim Narodowym Instytutem Alergii i Chorób Zakaźnych (NIAID) na podstawie umowy nr 1. HHSN272200700016I. M.R.H., K.J., D.P., L.B. i J.W. wykonywali tę pracę jako pracownicy Battelle Memorial Institute. Podwykonawcami Battelle Memorial Institute, którzy wykonali te prace, są: R.B., pracownik Charles River Laboratories - Insourcing Solutions; L.K. i M.R.L., pracownicy MEDRelief Staffing Inc.; M.G.L. jako pracownik Lovelace Respiratory Research Institute, Inc.; oraz J.H.K. jako pracownik Tunnell Government Services, Inc.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Micro-Chem Plus | Narodowe Laboratoria Chemiczne | 255 | |
| Tomograf komputerowy | Philips Healthcare | ||
| CT fantom | Philips Healthcare | ||
| Isovue-300 (odczynnik kontrastowy CT) | Bracco Diagnostics | NDC 0270-1315-30 | |
| Wentylowany stojak | Produkty laboratoryjne Klatka | ||
| z mikroizolatorem | Produkty | ||
| Szafa bezpieczeństwa biologicznego | Aparat | ||
| Skrzynka indukcyjna do znieczulenia | |||
| Maska anestezjologiczna | Henry Schein | ||
| Isoflurane | Henry Schein | ||
| Fisher | F/AIR | ||
| Poduszka | |||
| Maść okulistyczna | |||
| Monitor parametrów życiowych | Bionet | BM3Vet | |
| Telefon komórkowy | Spectralink | 8440 | |
| Słuchawka | |||
| Bezprzewodowe punkty | |||
| Sperian kombinezon nadciśnieniowy | Honeywell Safety Products | BSL 4-2 | |
| Rękawice do skafandrów zewnętrznych (lateks, Ansell Canners and Handlers) | Fisher | 19-019-601 | |
| Rękawice do skafandrów zewnętrznych (nitryl/guma, MAPA) | Fisher | 2MYU1 | |
| Scrubs | Cintas | 60975/60976 | |
| Skarpety | Cintas | 944 | |
| Taśma klejąca | Pack-N-Tape | ||
| 51131069695 Ręczniki | Cintas | 2720 | |
| Zip lubrykant | Amazon | B000GKBEJA |
Bibliografia
- Jahrling, P. B., et al. The NIAID Integrated Research Facility at Frederick, Maryland: a unique international resource to facilitate medical countermeasure development for BSL-4 pathogens. Pathog Dis. , (2014).
- de Kok-Mercado, F., Kutlak, F. M., Jahrling, P. B. The NIAID Integrated Research Facility at Fort Detrick. Appl Biosafety. 16, 58-66 (2011).
- Keith, L., et al. Preclinical imaging in BSL-3 and BSL-4 envrionments: imaging pathophysiology of highly pathogenic infectious diseases. Moyer, B. R., Cheruvu, N. P. S., Hu, T. , Springer-Verlag. New York, NY. (2014).
- Chosewood, L. C., Wilson, D. E. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories. , 5th, U.S. Dept. of Health and Human Services. Washington, D.C. . Accessed Sept. 4, 2014 (2009) http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/. (2009).
- Janosko, K., et al. Safety precautions and operating procedures in an (A)BSL-4 laboratory: 1. Laboratory suite entry and exit procedures. J Vis Exp. , (2016).
- Diagnostic Radiology Committee Task Force on CT Scanner Phantoms. Phantoms for evaluation and quality assurance of CT scanners. , American Association of Physicists in Medicine. Chicago, IL. (1977).
- Collins, B. ACUP 712.01 Waste anesthetic gas scavenging systems. Institutional Animal Care and Use Committee. , Cornell University. Ithaca, NY. Available from: http://www.research.cornell.edu/care/documents/ACUPs/ACUP712.pdf (2013).
- Gargiulo, S., et al. Mice anesthesia, analgesia, and care, Part I: anesthetic considerations in preclinical research. ILAR J. 53, E55-E69 (2012).
- Office of the Press Secretary. Executive order 13546. Optimizing the security of Biological Select Agents and Toxins in the United States. The White House. , Washington, DC. Available from: http://www.whitehouse.gov/the-press-office/executive-order-optimizing-security-biological-select-agents-and-toxins-united-stat (2010).
- Escaffre, O., Borisevich, V., Rockx, B. Pathogenesis of Hendra and Nipah virus infection in humans. J Infect Dev Ctries. 7, 308-311 (2013).
- Sueblinvong, V., et al. Critical care for multiple organ failure secondary to Ebola virus disease in the United States. Crit Care Med. , (2015).
- Mazur, S., et al. Safety precautions and operating procedures in an (A)BSL-4 laboratory: 2. General practices. J Vis Exp. , (2016).
- Bohannon, J. K., et al. Safety precautions and operating procedures in an (A)BSL-4 laboratory: 3. Aerobiology. J Vis Exp. , (2016).
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
