Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Powtarzalny deficyt motoryczny po niedrożności aorty w szczurzym modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego

6.8K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/55814

⸱

22 lipca 2017

 ,  ,  ,  ,  ,  , 

W tym artykule

Podsumowanie

To badanie demonstruje technikę tworzenia minimalnie inwazyjnego i łatwego do odtworzenia modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego u szczurów. Różne stopnie deficytu motorycznego kończyn tylnych mogą być wytwarzane przez kontrolowanie czasu zgryzu aorty.

Streszczenie

Niedokrwienie rdzenia kręgowego jest śmiertelnym powikłaniem po operacji tętniaka aorty piersiowo-brzusznej. Naukowcy mogą badać strategie zapobiegania i leczenia tego powikłania za pomocą eksperymentalnych modeli niedokrwienia rdzenia kręgowego. Opisany tutaj model pokazuje różne stopnie paraplegii, które odnoszą się do długości okluzji po zamknięciu aorty piersiowej w modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego szczura.

Cewnik z balonem o średnicy 2 stopni był wprowadzany przez tętnicę udową do zstępującej aorty piersiowej, aż końcówka cewnika została umieszczona na lewej tętnicy podobojczykowej u znieczulonych samców szczurów Sprague-Dawley. Niedokrwienie rdzenia kręgowego zostało wywołane przez napompowanie balonu cewnika. Po określonym czasie okluzji (9, 10 lub 11 minut) balon został opróżniony. Ocenę neurologiczną wykonano za pomocą wskaźnika deficytu ruchowego po 24 godzinach od zabiegu chirurgicznego, a rdzeń kręgowy pobrano do badania histopatologicznego.

Szczury, które przeszły 9-minutową niedrożność aorty, wykazały łagodne i odwracalne upośledzenie motoryczne kończyny tylnej. Szczury poddane 10-minutowej niedrożności aorty wykazywały umiarkowane, ale odwracalne upośledzenie motoryczne. Szczury poddane 11-minutowej niedrożności aorty wykazywały całkowity i trwały paraliż. Neurony ruchowe w odcinkach rdzenia kręgowego były bardziej zachowane u szczurów poddanych krótszemu czasowi niedrożności aorty.

Badacze mogą osiągnąć powtarzalny deficyt motoryczny kończyn tylnych po zamknięciu aorty piersiowej za pomocą tego modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego.

Wprowadzenie

Paraplegia jest śmiertelnym powikłaniem operacji tętniaka aorty piersiowo-brzusznej. Wynika to z uszkodzenia niedokrwienno-reperfuzyjnego rdzenia kręgowego, do którego dochodzi podczas krzyżowego zaciskania i odpinania aorty. 1 Wprowadzono kilka strategii, w tym ogólnoustrojową hipotermię i drenaż mózgowo-rdzeniowy, aby chronić rdzeń kręgowy,2,3,4 ale wielu pacjentów nadal odczuwa skutki urazu.

Wprowadzono kilka modeli niedokrwienia rdzenia kręgowego u zwierząt, aby zbadać jego patogenezę i opracować strategie ochronne przed....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Ten protokół został zatwierdzony przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami i Użytkowania Szpitala Bundang Uniwersytetu Narodowego w Seulu. Opieka nad zwierzętami i eksperymenty zostały przeprowadzone zgodnie z Przewodnikiem Narodowego Instytutu Zdrowia Stanów Zjednoczonych dotyczącym opieki i wykorzystania zwierząt laboratoryjnych.

1. Przygotowanie chirurgiczne

  1. Przed zabiegiem należy przepłukać cewniki sterylnym roztworem soli fizjologicznej, aby zapewnić drożność.
  2. Połóż koc grzewczy na stole operacyjnym i przykryj stół sterylną serwetą.
  3. Umieść samce szczurów Sprague−Dawley (270-330 g) w akrylo....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

W trakcie okresu niedokrwienia rdzenia kręgowego przeprowadzono zamknięcie aorty na 9 min (n=3), 10 min (n=3) lub 11 min (n=3). Wskaźnik deficytu motorycznego u szczurów przedstawiono w Tabeli 2. Szczury, u których zastosowano 9-minutowe zamknięcie aorty, wykazywały łagodne i odwracalne upośledzenie motoryczne kończyn tylnych. Szczury poddane 10-minutowemu zamknięciu aorty wykazywały umiarkowany deficyt motoryczny, lecz nie całkowity paraliż. Szczury, u których czas zamknięcia wynosił 11 min, wykazywały całkowity i trwał.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

W obecnym badaniu wykazaliśmy szczurzy model niedokrwienia rdzenia kręgowego oparty na metodzie Taira i Marsali5 , który indukuje różne stopnie deficytu motorycznego kończyny tylnej w zależności od czasu zgryzu aorty.

Długość zgryzu aorty może wpływać na stopień deficytu motorycznego. Jeśli czas zgryzu aorty jest dłuższy, deficyt motoryczny staje się bardziej dotkliwy. W ten sposób naukowcy mogą osiągnąć pewien stopień deficytu motorycznego, kontrolując czas okluzji aor.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają konkurencyjnych interesów finansowych. Prace te były wspierane przez grant 2012R1A1A3014010 z Narodowej Fundacji Badawczej Rządu Koreańskiego.

Podziękowania

Autorzy nie mają żadnych podziękowań.

....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Cewnik do embolektomii tętniczej FogartyEdward Life Sciences120602Fcewnik z końcówką balonową wprowadzany do tętnicy udowej
Cewnik dożylny BD Insyte-N Autoguard Shielded BD 381411Cewnik dożylny o rozmiarze 24
strzykawka 50 mlSZCZEPIONKA KOREA KOVAX-SY-STRZYKAWKA 50 mlMaska na twarz
1 ml strzykawkaKOREA VACCINEKOVAX-STRZYKAWKA 1ml
Sonda RecalAPARAT HARVARD50-7221FSonda doodbytnicza do monitorowania temperatury
Mikro nożyczki sprężynowe do preparowaniaJeung do bio & Roślina co.LTD.JD-S-10Nożyczki mikronożycowe
(ostre-ostre)Jeung do bio & Roślina co.LTD.S-51-12-SNożyce
RetraktorJeung do bio & Roślina co.LTD.JD-S-74ARetraktor
Mikro kleszcz Jeung do bio & Roślina co.LTD.JD-S-29Mikrokleszczyki
KLESZCZ DO KOMARÓW (zakrzywiony)Jeung do bio & Roślina co.LTD.S-44-CPKKleszcze zakrzywione
SZCZYPCE OPATRUNKOWEP Jeung do bio & Roślina co.LTD.S-37-16SKleszcze
4/0 jedwab Woori MedicalS4314.0 jedwabny szew
3-kierunkowySeonwon MedcalD-98-013-kierunkowy zawór odcinający
Monitor pacjentaPHILIPSMP20Urządzenie do monitorowania ciśnienia tętniczego. 
Koc grzewczyProdukcja własnaKoc grzewczy
Mikroprobówka i zbiornik zewnętrznyWłasna produkcjaMikroprobówka i zbiornik zewnętrzny
HeparynaJW Heparyna farmaceutyczna
0,9% NS 1000mlJW PharmaceuticalSól fizjologiczna
IsofluraneHana MedIsoflurane

Bibliografia

  1. Greenberg, R. K., et al. Contemporary analysis of descending thoracic and thoracoabdominal aneurysm repair: a comparison of endovascular and open techniques. Circulation. 118 (8), 808-817 (2008).
  2. Okita, Y.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Przeglądaj więcej artykułów

Wskaźnik Deficytu MotorycznegoParaliż Kończyn TylnychAorta PiersiowaCewnik BalonowyOcena NeurologicznaBadanie HistopatologiczneModel Powtarzalny