Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Generowanie zamkniętych złamań kości udowej u myszy: model do badania gojenia kości

15.2K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/58122

⸱

16 sierpnia 2018

 ,  ,  , 

W tym artykule

Podsumowanie

Model mysiego zamkniętego złamania kości udowej jest potężną platformą do badania gojenia złamań i nowatorskich strategii terapeutycznych przyspieszających regenerację kości. Celem tego protokołu chirurgicznego jest wygenerowanie jednostronnie zamkniętych złamań kości udowej u myszy za pomocą śródszpikowego pręta stalowego do stabilizacji kości udowej.

Streszczenie

Złamania kości stanowią ogromne obciążenie społeczno-ekonomiczne dla pacjentów, a także znacząco wpływają na jakość ich życia. Strategie terapeutyczne, które sprzyjają skutecznemu gojeniu się kości, nie istnieją i jest na nie duże zapotrzebowanie. Skuteczne i powtarzalne modele zwierzęce gojenia złamań są potrzebne do zrozumienia złożonych procesów biologicznych związanych z regeneracją kości. Na przestrzeni lat powstało wiele zwierzęcych modeli gojenia złamań; Jednak mysie modele złamań pojawiły się ostatnio jako potężne narzędzia do badania gojenia kości. Opracowano wiele modeli otwartych i zamkniętych, ale model zamkniętego złamania kości udowej wyróżnia się jako prosta metoda generowania szybkich i powtarzalnych wyników w fizjologicznie odpowiedni sposób. Celem tego protokołu chirurgicznego jest wygenerowanie jednostronnie zamkniętych złamań kości udowej u myszy i ułatwienie stabilizacji kości udowej po złamaniu poprzez wprowadzenie stalowego pręta śródszpikowego. Chociaż urządzenia takie jak gwóźdź lub śruba zapewniają większą stabilność osiową i obrotową, zastosowanie pręta śródszpikowego zapewnia wystarczającą stabilizację dla spójnych wyników gojenia bez powodowania nowych ubytków w tkance kostnej lub uszkadzania pobliskich tkanek miękkich. Obrazowanie radiograficzne służy do monitorowania postępu tworzenia się kalusa, zrostu kostnego, a następnie przebudowy kalusa kostnego. Wyniki gojenia kości są zwykle związane z wytrzymałością zagojonej kości i mierzone za pomocą testów skrętnych. Mimo to zrozumienie wczesnych zdarzeń komórkowych i molekularnych związanych z naprawą złamań ma kluczowe znaczenie w badaniach nad regeneracją tkanki kostnej. Model zamkniętego złamania kości udowej u myszy z stabilizacją śródszpikową służy jako atrakcyjna platforma do badania gojenia złamań kości i oceny strategii terapeutycznych przyspieszających gojenie.

Wprowadzenie

Złamania należą do najczęstszych urazów układu mięśniowo-szkieletowego i wiążą się z ogromnym obciążeniem społeczno-ekonomicznym, w tym kosztami leczenia, które według prognoz przekroczą 25 miliardów dolarów rocznie w Stanach Zjednoczonych1,2. Chociaż większość złamań goi się bez incydentów, gojenie wiąże się ze znacznymi przestojami i utratą wydajności. Około 5 - 10% wszystkich złamań powoduje opóźnione gojenie lub brak zrostu z powodu wieku lub innych przewlekłych schorzeń, takich jak osteoporoza i cukrzyca3,4,5. Ob....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Poniższa procedura została przeprowadzona za zgodą Indiana University School of Medicine Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC). Wszystkie operacje przeżycia zostały przeprowadzone w sterylnych warunkach, zgodnie z wytycznymi NIH. Ból i ryzyko infekcji były kontrolowane za pomocą odpowiednich leków przeciwbólowych i antybiotyków, aby zapewnić pomyślny wynik.

1. Znieczulenie i przygotowanie

  1. Zważ mysz i znieczul ją mieszaniną ketaminy (100 mg/kg) i ksylazyny (10 mg/kg) podawaną drogą dootrzewnową (I.P.). Umieść mysz w pustej klatce i monitoruj ją, aż zostanie całkowicie uspokojona.
  2. Upewnij się, że ....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Prawidłowe przeprowadzenie procedury chirurgicznej monitorowano za pomocą obrazowania radiologicznego. Kluczowe etapy obejmowały wprowadzenie igły śródszpikowej, umieszczenie drutu prowadzącego, wywołanie złamania poprzecznego w połowie trzonu kości udowej oraz właściwą stabilizację za pomocą gwoździa śródszpikowego (Rysunek 2Ai - 2Aiv). Postępy w gojeniu kostniny złamania monitorowano za pomocą cotygodniowych zdjęć rentgenow.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Celem tego zabiegu chirurgicznego jest wygenerowanie standaryzowanych zamkniętych złamań kości udowej u myszy. Kluczową zaletą tego modelu jest to, że wewnętrzne unieruchomienie następuje po wytworzeniu złamania, co pozwala uniknąć kątowania pręta śródszpikowego. Być może najbardziej krytycznym aspektem tego protokołu jest generowanie znormalizowanego złamania poprzecznego na trzonie środkowym kości udowej, ponieważ geometria złamania zależy od przyłożonej siły zginającej i ułożenia kończyny tylnej. Niewłaściwe ustawieni.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy tego manuskryptu nie mają nic do ujawnienia. Autorzy stwierdzają ponadto, że nie ma ograniczeń co do pełnego dostępu do wszystkich materiałów wykorzystanych w badaniu opisanym w tym manuskrypcie.

Podziękowania

Ta praca była wspierana przez granty z Departamentu Obrony (DoD), Dowództwa Badań Medycznych i Materiałów Armii Stanów Zjednoczonych (USAMRMC), Kongresowo Kierowanych Programów Badań Medycznych (CDMRP) (PR121604) oraz Narodowych Instytutów Zapalenia Stawów i Chorób Mięśniowo-Szkieletowych i Skóry (NIAMS), NIH R01 AR068332 dla Umy Sankar. Justin Williams jest wspierany przez Kompleksowy Program Treningowy Układu Mięśniowo-Szkieletowego T32 od NIAMS/NIH (AR065971).

....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Oster Minimax TrymerAnimal World Network78049-100
POWIDON-JODEKThermo Fisher Scientific395516
MAŚĆ OFTALMICZNAThermo Fisher ScientificNC0490117
Styker T/Pump Recyrkulator ciepłej wodyKent Scientific CorporationTP-700
1ml Sub-Q StrzykawkaThermo Fisher Scientific
ENCORE Sensi-Touch PFMoore Medical LLC30347Lateksowa, bezpudrowa rękawica chirurgiczna
Igły podskórne PrecisionGlide 25GThermo Fisher Scientific14-826-49
Drut wolframowy o ultrawysokiej temperaturze,McMaster-Carr3775K37Średnica 0,005 ", szpula 1/16 funta, stal
nierdzewna 380' długa, cienkościenne rurki 24GMicrogroup Inc304h24tw-5ft
#15 Ostrza skalpelaFine Science Tools10015-00
#10 Ostrza skalpelaFine Science Tools10010-00
Kleszcze o wąskim wzorzeFine Science Tools11002-12Ząbkowane/proste/12cm
Kleszcze do tęczówkiFine Science Tools11066-071x2 zęby/proste/7cm
Nożyczki do dyssekcjiNarzędzia do nauki o tematyce naukowej14081-09Wąskie ostrza/Kątowe na boki/Ostre-ostre/10cm
Cienkie nożyczkiFine Science Tools14058-11ToughCut/Proste/Ostre-Ostre/11,5 cm
Olsen-Hegar Uchwyt na igły z obcinaczem do szwówFine Science Tools12002-12Proste/Ząbkowane/12cm/z zamkiem
Crile HemostatFine Science Tools13004-14Ząbkowany / prosty / 14 cm
obcinak do drutu wolframowegoACE Surgical Supply Co., Inc.08-051-90ACE #150 Przecinak do drutu, końcówki z węglika wolframu
3-0 Szew VICRYLEthicon SzewJ423H3-0 VICRYL NIEBARWIONY 27" FS-2 CIĘCIE
piXarray 100 Cyfrowy system radiografii próbekBioptics, IncSzafkowy system rentgenowski
Einhorn 3-punktowe urządzenie do gięcia N/A N/AZbudowany na zamówienie
309597

Bibliografia

  1. Schnell, S., Friedman, S. M., Mendelson, D. A., Bingham, K. W., Kates, S. L. The 1-Year Mortality of Patients Treated in a Hip Fracture Program for Elders. Geriatric Orthopaedic Surgery & Rehabilitation. 1 (1), 6-14 (2010).
  2. Burge, R., et al.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Przeglądaj więcej artykułów

Zamknięte złamanie kości udowejmodel gojenia kościstabilizacja śródszpikowaoperacja złamania u myszyobrazowanie radiologicznebadania skręcaniaanaliza mikro-TKtworzenie się kostninyregeneracja kościprotokół chirurgiczny