Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Zwężenie lewego przedsionka wywołane tętnicą żylną płuc i nadciśnienie płucne grupy 2 u szczura

7.3K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/58787

⸱

18 listopada 2018

 ,  ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

Zwężenie lewego przedsionka (LAS) jest nowatorską techniką chirurgiczną używaną do badania nadciśnienia płucnego grupy 2 (PH) i mechanizmów leżących u podstaw tętnicy żylnej płucnej. Tutaj przedstawiamy protokół zwężania lewego przedsionka za pomocą tytanowego klipsa w celu spowodowania tętnicy żylnej płuc i umiarkowanego PH u szczura.

Streszczenie

Mechanizm indukowanej zwężeniem zastawki mitralnej tętnicy żylnej płucnej i nadciśnienia płucnego grupy 2 (PH) jest niejasny. Nie ma modelu PH grupy 2 u gryzoni ze względu na zwężenie zastawki mitralnej (SM), co ułatwiłoby badanie mechanizmów chorobowych i potencjalnych strategii terapeutycznych. Przedstawiamy nowy szczurzy model tętnicy żylnej płuc wywołanej przekrwieniem żylnym płuc i PH grupy 2 spowodowanej zwężeniem lewego przedsionka (LAS). LAS uzyskuje się poprzez zwężenie lewego przedsionka za pomocą półzamkniętego tytanowego klipsa. Po operacji LAS model szczura z prędkością napływu strumieniowego większą lub równą 2,0 m/s w badaniu echokardiograficznym stopniowo rozwija tętnicę żylną płuc i PH grupy 2 w okresie od 8 do 10 tygodni. W tym protokole przedstawiamy krok po kroku procedurę, jak wykonać operację LAS. Prezentowany model szczurzy LAS naśladuje stwardnienie rozsiane u ludzi i jest przydatny do badania mechanizmu molekularnego leżącego u podstaw tętnic żylnych płuc oraz do przedklinicznej oceny terapii PH grupy 2.

Wprowadzenie

Celem tego artykułu jest pokazanie krok po kroku, jak przeprowadzić operację LAS u szczurów. Chirurgicznie indukowany LAS ściśle naśladuje stwardnienie rozsiane i triatriatum u ludzi, co wiąże się z powstaniem mechanicznej przeszkody w lewym przedsionku1. Niedrożność dopływu do lewej komory (LV) często powoduje przekrwienie krążenia żylnego w płucach, a u pacjentów stopniowo rozwija się PH. Światowa Organizacja Zdrowia klasyfikuje PH spowodowane chorobami lewego serca jako grupę 2, która jest najbardziej rozpowszechnioną grupą PH2,3,4. Rozpoznanie PH u....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Protokół eksperymentalny LAS został zatwierdzony przez Komitet Opieki nad Zwierzętami Jikei University School of Medicine oraz Uniwersytecki Komitet ds. Badań i Etyki (protokół #2015-118).

1. Przygotowanie przedoperacyjne

  1. Po przybyciu do obiektu dla zwierząt należy zapewnić 5-tygodniowym samcom szczurów Sprague Dawley o wadze od 150 do 200 g z 1 tygodniem na aklimatyzację w nowym domu przed operacją.
  2. Przed zabiegiem należy przygotować następujący sprzęt przez autoklawowanie: 1) respirator dla małych zwierząt, 2) urządzenie do znieczulenia, 3) zestaw do intubacji (składający się z pary kleszczy hemostatycznych, depresor....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Skuteczność LAS jest potwierdzana za pomocą echokardiografii 2 tygodnie po operacji. Szczury z prędkością przepływu wlotowego do LV przekraczającą 2,0 m/s, mierzoną w rzucie czterojamowym, uznaje się za zwierzęta z rozwiniętą istotną stenozą (Rycina 1), u których w 8–10 tygodniu po zabiegu LAS niezawodnie rozwija się umiarkowana PH oraz arterjalizacja żył płucnych.

Dziesięć tygodni po operacji LAS s.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Szczur LAS jest nowym modelem PH grupy 2, który spotkał się już z dużym zainteresowaniem ze strony naukowców z tej dziedziny12,13. W porównaniu z dwoma istniejącymi modelami grupy 2, a mianowicie zwężeniem żyły płucnej (PVS) model14, wykorzystującym prosięta,oraz modelem szczura z pasmem nadwieńcowym aorty (SAB) 8,9,10, model szczurzy LAS ma kilka zalet.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Autorzy dziękują za letni program Mitacs-Japan Society for the Promotion of Science (JSPS). Ping Yu Xiong otrzymał wsparcie finansowe z Letniego Programu Mitacs-JSPS na wizytę w Jikei University School of Medicine. Dr Minamisawa jest częściowo wspierany przez Ministerstwo Edukacji, Kultury, Sportu, Nauki i Technologii Japonii (S.M.), Program wspierany przez MEXT dla Fundacji Badań Strategicznych na Uniwersytetach Prywatnych (S.M.), Fundację Upamiętniającą Wyścigi Pojazdów (S.M.) oraz Fundusz Badań Podyplomowych Uniwersytetu Jikei (S.M.) ze wsparciem finansowym dla tego projektu. Dr Archer jest częściowo wspierany przez amerykańskie Narodowe Instytuty Zdrowia (NIH), gr....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
5-0 Szew prolenowyJohnson & Johnson - Ethicon8725HSzew polipropylenowy z technologią HEMO-SEAL
Aparat do znieczuleniaWakenyaku Co., Ltd.BRTK-100A Pompapowietrza i aparat do znieczulania
Drut prowadnikowy angiocewnikaSamodzielnie wykonanyprowadnik 10 cm przyklejony do strzykawki o pojemności 1 cm 
Retraktor klatki piersiowejNatsume Seisakusho Co., Ltd.F-2
Rurka na klatkę piersiową 23GSamodzielnie wykonanastrzykawka o pojemności 10 ml przymocowana do igły 23G plus plastikowa rurka
Zakrzywione kleszczeNatsume Seisakusho Co., Ltd.A-14
Poduszka grzewczaVivariaMP-916-NVUtrzymuj temperaturę ciała na poziomie 37 stopni Celsjusza
Klipsy podwiązywalne HorizonTeleflex REF 003200Rozmiar Średnio-duży
Aplikator do podwiązywania Horizon do średniego i dużego rozmiaru HorizonTeleflexREF 337085Klipsy do podwiązywania Kątowa szczęka, (20 cm)
Uchwyt na igłęNatsume Seisakusho Co., Ltd.MC-40
Respirator dla gryzoniCWE IncSAR-830/PRespirator dla małych zwierząt
NożyczkiNatsume Seisakusho Co., Ltd.B-12Nożyczki proste, najlepiej z okrągłymi końcówkami
Kleszcze prosteNatsume Seisakusho Co., Ltd.A-7
Depresor językaUchida Yoko Co., Ltd.8-615-2417Użyj szerokiego końca

Bibliografia

  1. McGuire, L. B., Nolan, T. B., Reeve, R., Dammann Jr, J. F. Cor Triatriatum as a Problem of Adult Heart Disease. Circulation. 31, 263-272 (1965).
  2. Strange, G., et al. Pulmonary hypertension: prevalence and mortality in the Armadale echocardiography cohort. Heart. ....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Przeglądaj więcej artykułów

Model szczuraechokardiografiaaplikacja klipsa tytanowegowprowadzenie drenażu klatki piersiowejbadanie histologiczneciśnienie w prawej komorzenaśladowanie zwężenia zastawki mitralnej