Artykuł metodologiczny

OP-IVM: Połączenie dojrzewania in vitro po pobraniu komórek jajowych z chirurgią ginekologiczną

4.1K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/61647

⸱

9 maja 2021

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Center for Reproductive Medicine, Department of Obstetrics and Gynecology, Peking University Third Hospital, 2National Clinical Research Center for Obstetrics and Gynecology, 3Key Laboratory of Assisted Reproduction, Ministry of Education, 4Beijing Key Laboratory of Reproductive Endocrinology and Assisted Reproduction, 5Research Units of Comprehensive Diagnosis and Treatment of Oocyte Maturation Arrest, Chinese Academy of Medical Sciences

* These authors contributed equally

W tym artykule

Informacja o sprostowaniu

Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice

Podsumowanie

Dojrzewanie in vitro (IVM) przed operacją ginekologiczną (OP-IVM) łączy IVM po pobraniu oocytów z rutynową operacją ginekologiczną i służy jako rozszerzenie konwencjonalnych zastosowań IVM dla zachowania płodności.

Streszczenie

Zastosowanie dojrzewania in vitro (IVM) przed operacją ginekologiczną (OP-IVM) jest rozszerzeniem konwencjonalnego IVM, które łączy IVM po pobraniu oocytów z rutynową operacją ginekologiczną. OP-IVM jest odpowiedni dla pacjentek poddawanych łagodnym zabiegom ginekologicznym, które wymagają zachowania płodności (FP) lub leczenia niepłodności, takiego jak zapłodnienie in vitro i transfer zarodków (IVF-ET). Na sali operacyjnej pacjentki poddawane łagodnym zabiegom ginekologicznym są najpierw znieczulane i poddawane zabiegowi aspiracji niedojrzałych mieszków włosowych pod kontrolą USG (IMFA). W miarę wykonywania kolejnej operacji ginekologicznej bada się kompleksy wzgórek-oocyty (COC), a niedojrzałe COC przenosi się do pożywki IVM i hoduje przez 28-32 godziny w laboratorium IVF. Po ocenie dojrzałe oocyty w stadium MII zostaną wybrane i kriokonserwowane w ciekłym azocie do FP lub zapłodnione przez docytoplazmatyczne wstrzyknięcie plemnika (ICSI) do IVF-ET. Łącząc IVM z chirurgią ginekologiczną, niedojrzałe oocyty, które zostałyby wyrzucone, mogą zostać uratowane i wykorzystane w technologii wspomaganego rozrodu (ART). Procedura, znaczenie i krytyczne aspekty OP-IVM zostały opisane w niniejszym artykule.

Wprowadzenie

IVM to SZTUKA, w której ludzkie niedojrzałe oocyty są hodowane in vitro do dojrzałości do IVF-ET lub FP. W IVM nie stosuje się leków indukujących owulację, co zmniejsza ból, obciążenie finansowe i powikłania, takie jak zespół hiperstymulacji jajników (OHSS)1,2. Ponadto, IVM jest szczególnie przydatny w FP u pacjentów z rakiem i leczeniu niepłodności u pacjentów wrażliwych na hormony, którzy mogą nie być w stanie lub nie mieć czasu na terapię indukcji owulacji3. Dlatego, mimo że liczba pobranych oocytów, wskaźnik ciąż klinicznych (CPR) i wskaźnik żywych urodzeń (LBR) są niższe niż w przypadku IVF4,5, IVM ma swoje unikalne zalety.

Niepłodne pacjentki ze zmianami endometrium, hydrosalpinxem lub torbielami jajników zazwyczaj przechodzą operację ginekologiczną przed leczeniem ART, a ich oocyty są zazwyczaj niedojrzałe. OP-IVM wykorzystuje sterowane przezpochwowe ultrasonografie do pobierania niedojrzałych oocytów i hodowania ich in vitro aż do dojrzewania do IVF-ET lub FP. OP-IVM łączy IVM po pobraniu komórek jajowych i operacji ginekologicznej, zmniejszając w ten sposób powikłania, które są powszechne w kontrolowanych cyklach hiperstymulacji jajników oraz oszczędzając czas i pieniądze. Dla płodnych pacjentek OP-IVM może służyć jako "ubezpieczenie płodności" podczas rutynowych operacji ginekologicznych.

Ponadto, uszkodzenia spowodowane operacjami ginekologicznymi, takimi jak elektrokoagulacja6,7 i resekcja guza jajnika, mogą być zredukowane poprzez pobranie oocytów przed operacją ginekologiczną. W związku z tym, w porównaniu z rutynową chirurgią ginekologiczną, OP-IVM może zmniejszyć liczbę operacji podczas leczenia niepłodności i zapobiec utracie funkcjonalnych komórek jajowych podczas operacji jajników.

Poprzednie badanie wykazało, że dodatkowa procedura pobierania oocytów ani nie zwiększy powikłań chirurgicznych i niekorzystnych wyników ciąży, ani nie przedłuży pobytu w szpitalu8. Niektóre pacjentki rodziły żywe dzieci za pomocą OP-IVM8, co wskazuje na wykonalność tej metody. W pracy opisano charakterystykę pacjentek, u których może dojść do korzyści z OP-IVM, a także procedury i punkty krytyczne OP-IVM, a także omówiono ocenę dojrzałości oocytów człowieka.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

UWAGA: Badania związane z metodą OP-IVM zostały zatwierdzone przez instytucjonalną komisję rewizyjną (IRB) Trzeciego Szpitala Uniwersytetu Pekińskiego oraz Komisję Etyki Uniwersytetu Pekińskiego (2014S2004). Podsumowanie OP-IVM znajduje się w Rysunek 1. Procedura krok po kroku zostanie przedstawiona w następnej sekcji.

1. Wprowadzenie OP-IVM do odpowiednich pacjentów

  1. Zidentyfikuj potencjalnych pacjentów, którzy mogą odnieść korzyści z OP-IVM, takich jak ci opisani w krokach 1.1.1-1.1.3:
    1. Pacjentki z zespołem policystycznych jajników (PCOS) z opornością na klomifen, które wymagają laparoskopowej operacji wiercenia jajników.
    2. Niepłodni pacjenci, którzy wymagają łagodnych operacji ginekologicznych, takich jak histeroskopowa miomektomia, polipektomia, przezszyjkowa resekcja przegrody i laparoskopowa chirurgia jajowodów oraz ooforocystektomia, przed leczeniem ART.
    3. Pacjenci z rakiem lub chorobą hematologiczną, którzy otrzymują chemioradioterapię lub radioterapię.

2. Świadoma zgoda

  1. Przekaż pacjentom pełne informacje, w tym o tym, dlaczego OP-IVM może być korzystny, jego procedurę, zastosowania oocytów IVM (IVF-ET lub krioprezerwacja), szacowane RKO i LBR oraz możliwe powikłania. Poproś pacjentów o wyrażenie świadomej zgody poprzez podpisanie formularza zgody.

3. Przygotuj etykiety i pożywkę z oocytów IVM

  1. Wydrukuj etykiety identyfikacyjne (ID) z imieniem i nazwiskiem pacjenta oraz datami dla szalek i probówek hodowlanych.
  2. Dodaj 0,5 ml pożywki IVM uzupełnionej 0,75 IU / ml hormonu folikulotropowego (FSH) i 0,75 IU / ml hormonu luteinizującego (LH) do każdego dołka 4-dołkowej płytki. Przykryj podłoże olejem.
    UWAGA: Wszystkie te procedury należy wykonywać na ławkach z czystym przepływem laminarnym.
  3. Podgrzej 4-dołkową płytkę z pożywką oocytową IVM w temperaturze 37 °C w wilgotnym powietrzu zawierającym 5%CO2 i 5%O2 co najmniej 6 godzin przed użyciem.

4. Podanie znieczulenia na sali operacyjnej

  1. Sprawdź imię i nazwisko pacjenta przed podaniem znieczulenia.
  2. Znieczulenie dożylne pacjenta przez anestezjologa.

5. Pobieranie komórek jajowych

  1. Oznacz etykiety imieniem i nazwiskiem, datą i identyfikatorem na szalkach i probówkach hodowlanych.
  2. Ułóż pacjentkę w pozycji litotomii pęcherza moczowego; stale dezynfekuj, układaj i szoruj pochwę ciepłym roztworem soli fizjologicznej.
  3. Umieść sondę ultradźwiękową w pochwie; zeskanuj i zapisz liczbę pęcherzyków w obu jajnikach. Znajdź miejsce najbliżej jajnika jako miejsce nakłucia i unikaj jelita, pęcherza moczowego i dużych naczyń krwionośnych.
  4. Odessać płyn pęcherzykowy.
    1. Przed nakłuciem przemyć igłę środkiem ściernym o stabilnym pH (patrz Tabela materiałów).
    2. Wstrzyknąć 19 G, jednostrumieniową igłę aspiracyjną do jajników pod kontrolą ultradźwięków.
    3. Nakłuj większe mieszki włosowe z wyraźnymi granicami najbliżej sondy. W niskiej pozycji szybko wstrzyknąć roztwór płuczący uzupełniony 25 j./ml heparyny. Odessać płyn pęcherzykowy igłą pod ciśnieniem 80-90 mmHg, lekko obracając igłę, aby zassać jak najwięcej płynu pęcherzykowego. Nakłuć inne mieszki włosowe od bliskiej do dalszej strony na tej płaszczyźnie.
      UWAGA: Podczas aspiracji płyn pęcherzykowy zawierający oocyty spłynie do sterylnej probówki o pojemności 10 ml pod podciśnieniem. Heparyna może zmniejszać lepkość płynu pęcherzykowego, aby ułatwić proces aspiracji.
    4. Wyjąć igłę z jajnika (trzymać igłę w ścianie pochwy). Dostosuj kierunek sondy ultradźwiękowej i nakłuj pozostałe mieszki włosowe w innych płaszczyznach. Spróbuj odessać wszystkie mieszki włosowe o średnicy ~5-9 mm.
      UWAGA: Dostosuj pozycję sondy, aby przez cały czas znajdowała się jak najbliżej jajników. Uciskaj sklepienie pochwy z odpowiednią siłą, aby zmniejszyć uraz i krwawienie.
    5. Wyciągnij igłę po zakończeniu w jednym jajniku, umyj igłę medium manipulacyjnym i nakłuj drugą stronę tą samą metodą.
      UWAGA: Całkowite aspiracje mieszków włosowych w ciągu 25-30 min.
  5. Przenieś płyn pęcherzykowy z sali operacyjnej do laboratorium IVF w ciągu kilku minut po potwierdzeniu imienia i nazwiska pacjenta oraz numeru identyfikacyjnego
    UWAGA: Odessany płyn pęcherzykowy należy przenieść na stanowisko laboratoryjne IVF tak szybko, jak to możliwe, aby zapobiec krzepnięciu.
  6. Wykryj aktywny krwotok w jamie miednicy za pomocą ultradźwięków w trybie B po nakłuciu wszystkich mieszków włosowych. Włóż wziernik i skieruj końcówkę na tylną sklepienie, aby wykryć aktywne krwawienie w miejscu nakłucia.
    UWAGA: Nie należy obserwować aktywnego krwawienia w miejscu wkłucia pochwy, jeśli pozycja jajnika jest normalna, a pobieranie komórek jajowych jest wykonywane ostrożnie. W przypadku lekkiego krwawienia, które utrzymuje się nawet po ucisku, trzymaj sterylny kompres z gazy w pochwie przez 2-4 godziny. Kontroluj nadmierne krwawienie z małych tętnic za pomocą klamer z kleszczami naczyniowymi przez 2-4 godziny. Krwawienie w jamie miednicy lub jajnika, które zdarza się rzadko, powinno być opanowane za pomocą elektrokoagulacji za pomocą operacji laparoskopowej.

6. Chirurgia ginekologiczna

  1. W zależności od potrzeb i stanu pacjenta należy wykonać odpowiednią operację ginekologiczną po pobraniu komórek jajowych.
    1. Wykonaj laparoskopową operację wiercenia jajników u pacjentek z zespołem policystycznych jajników (PCOS) z opornością na klomifen
      2. .
    2. Wykonaj łagodną operację ginekologiczną u niepłodnych pacjentek przed leczeniem ART, taką jak histeroskopowa miomektomia, polipektomia, przezszyjkowa resekcja przegrody i laparoskopowa chirurgia jajowodów oraz ooforocystektomia.
    3. Wykonaj jajnikomię w celu kriokonserwacji płodności u pacjentów z rakiem lub chorobą hematologiczną, którzy muszą otrzymać chemioradioterapię.
      UWAGA: Te operacje ginekologiczne są podstawowymi i standardowymi operacjami klinicznymi. Wytyczne operacyjne w różnych krajach i szpitalach powinny być stosunkowo podobne.

7. Wykonaj IVM

UWAGA: Wykonaj cały proces IVM na płaskim homotermicznym pomieszczeniu o temperaturze 37 °C.

  1. Przefiltrować zasysany płyn pęcherzykowy za pomocą sitka do komórek nylonowych o wielkości 70 μm. Kilkakrotnie przepłukać probówkę hodowlaną i sitko wstępnie podgrzanym podłożem o stabilnym pH. Upewnij się, że wszystkie niedojrzałe COC zostały całkowicie przeniesione do naczynia hodowlanego. Zebrać przefiltrowany płyn, przepłukać i wyhodować kulturę na szalce Petriego o wymiarach 100 x 15 mm.
  2. Zbadaj COC (Rysunek 2) pod stereoskopem z 40-krotnym powiększeniem. Szybko przenieś niedojrzałe zwierzęta do wstępnie ogrzanej pożywki oocytowej IVM.
    UWAGA: Wybierz odpowiednie powiększenie w zależności od nawyku operatora.
  3. Zapisz liczbę hodowanych niedojrzałych COC.
  4. Poinformuj pacjenta o liczbie wyhodowanych COC. Omów pobieranie nasienia z pacjentami i ich partnerami. Wykonaj ekstrakcję nasienia zgodnie z normalną procedurą.
  5. Hodować niedojrzałe COC w temperaturze 37 °C w wilgotnym powietrzu zawierającym 5% CO2 i 5%O2 przez 28-32 godzin.
  6. Oceń dojrzałość oocytów.
    1. Ogołocić wzgórki z komórek poprzez wielokrotne pipetowanie za pomocą szklanej pipety Pasteura pod stereoskopem z 40-krotnym powiększeniem. Zbadaj ekstruzję ciała polarnego (PB), aby określić etap rozwoju oocytów. Zobacz Rysunek 2 dla reprezentatywnych obrazów oocytów w COC, metafazie II (MII), metafazie I (MI) i pęcherzykach rozrodczych (GV) o wyraźnych cechach morfologicznych.
      UWAGA: Użyj pionowego płomienia (np. palnika Bunsena), aby dostosować średnicę szklanej pipety Pasteura do wielkości oocytu.
    2. Policz oocyty MII i zapisz ich liczbę.
    3. Wybierz dojrzałe oocyty do zapłodnienia in vitro lub witryfikacji.
      UWAGA: Plemniki należy pobrać w dniu, w którym oocyty dojrzewają do zapłodnienia in vitr, ale nie do witryfikacji oocytów.
    4. Hodować niedojrzałe oocyty w stadium GV i MI w oryginalnej pożywce hodowlanej IVM z komórkami wzgórka przez kolejne 10-14 godzin. Powtórz kroki 7.6.2-7.6.3.

8. Wykonaj ICSI lub witryfikację oocytów

  1. Postępuj zgodnie ze standardową procedurą centrum rozrodu8.

9. Hodowla zarodków i kriokonserwacja zarodków

  1. Postępuj zgodnie ze standardową procedurą centrum rozrodu8.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Do grudnia 2019 roku metodę OP-IVM zastosowano w celu zachowania płodności u 274 pacjentek. Wyniki embriologiczne i reprodukcyjne u 158 pacjentek w latach 2014–2016 zostały opublikowane w poprzedniej pracy.8Poniższy przykład omawia procedurę zastosowaną u pacjentki z PCOS, u której w 2016 roku przeprowadzono OP-IVM. Pacjentka jest 28-letnią kobietą z rozpoznaniem pierwotnej niepłodności, torbieli przydatka lewego oraz PCOS. W dniu 28 września poddano ją laparoskopo...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Opisana w tym artykule metoda OP-IVM rozszerza się na konwencjonalne zastosowania IVM i łączy IVM po pobraniu komórek jajowych z rutynową operacją ginekologiczną. Oocyty, które zostałyby utracone podczas operacji ginekologicznej, mogą być teraz wykorzystane do IVF-ET lub FP bez dodatkowego ryzyka chirurgicznego. OP-IVM został po raz pierwszy użyty do pobrania oocytów przed wierceniem jajników u pacjentek z PCOS. Jego zastosowanie wkrótce rozszerzyło się na pacjentów niepłodnych, którzy wymagają łagodnej chirurgii ginekol...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

Ta praca była wspierana przez granty z China National Key R&D Program (nr 2017YFC1002000, 2018YFC1004001, 2019YFA0801400), Narodowej Fundacji Nauki Chin (nr 81571386, 81730038), Funduszu Innowacji CAMS dla Nauk Medycznych (2019-I2M-5-001) oraz Specjalnego Projektu Badawczego Rozwoju Zdrowia Kapitału Chińskiego (2018-2-4095).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Igły aspiracyjne 19 G jednokanałoweCook, AustraliaK-OPS-7035-REH-ET
Płytka 4-dołkowaCorning
70 μ m nylonowy sitko komórkoweFalcon, USA352350
CO2 InkubatorThermo
Culture oilVitrolife, Szwecja10029,OVOIL Krok 3.2.
FSH & LHFerring Zdrowie Reprodukcyjne, NiemcyMENOPUR®
Szklana pipeta PasteuraHilgenberg GmbH, Niemcy3154102-26
G-MOPS mediumo stabilnym pH medium do mycia igły przed nakłuciem
IVM mediumOrigio, DaniaART-1600-B
Czyste ławki z przepływem laminarnym SzalkaESCO
Thermo Fisher Scientific, Dania263991
Pożywka o stabilnym pH przeznaczona do wspomagania obsługi i manipulacji oocytami i zarodkami poza inkubatoremVitrolife, Szwecja10130, G-MOPS PLUSStep 7.1.
Roztwór do płukaniaCook, AustraliaK-SIFB-100
StereoskopNikon
Petriego

Bibliografia

  1. Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count. Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).
  2. Yang, Z. Y., Chian, R. C. Development of in vitro maturation techniques for clinical applications. Fertility and Sterility. 108 (4), 577-584 (2017).
  3. Hatirnaz, S., et al. Oocyte in vitro maturation: A sytematic review. Turkish Journal of Obstetrics and Gynecology. 15 (2), 112-125 (2018).
  4. Gremeau, A. S., et al. In vitro maturation or in vitro fertilization for women with polycystic ovaries? A case-control study of 194 treatment cycles. Fertility and Sterility. 98 (2), 355-360 (2012).
  5. Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count. Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).
  6. Sahin, C., et al. Which should be the preferred technique during laparoscopic ovarian cystectomy. Reproductive Sciences. 24 (3), 393-399 (2017).
  7. Xiao, J., et al. Impact of hemostatic methods on ovarian reserve and fertility in laparoscopic ovarian cystectomy. Experimental and Therapeutic. 17 (4), 2689-2693 (2019).
  8. Song, X. -L., et al. Enhancing the scope of in vitro maturation for fertility preservation: transvaginal retrieval of immature oocytes during endoscopic gynaecological procedures. Human Reproduction. 35 (4), 837-846 (2020).
  9. Magnusson, Å, Källen, K., Thurin-Kjellberg, A., Bergh, C. The number of oocytes retrieved during IVF: a balance between efficacy and safety. Human Reproduction. 33 (1), 58-64 (2018).
  10. Larose, H., et al. Gametogenesis: A journey from inception to conception. Current Topics in Developmental Biology. Wellik, D. M., et al. 132, Academic Press. 257-310 (2019).
  11. Broer, S. L., Broekmans, F. J. M., Laven, J. S. E., Fauser, B. C. J. M. Anti-Müllerian hormone: ovarian reserve testing and its potential clinical implications. Human Reproduction Update. 20 (5), 688-701 (2014).
  12. Arce, J. C., La Marca, A., Mirner Klein, B., Nyboe Andersen, A., Fleming, R. Antimüllerian hormone in gonadotropin releasing-hormone antagonist cycles: prediction of ovarian response and cumulative treatment outcome in good-prognosis patients. Fertility and Sterility. 99 (6), 1644-1653 (2013).
  13. Katayama, K. P., et al. Ultrasound-guided transvaginal needle aspiration of follicles for in vitro fertilization. Obstetrics and Gynecology. 72 (2), 271-274 (1988).
  14. Dellenbach, P., et al. Transvaginal sonographically controlled follicle puncture for oocyte retrieval. Fertility and Sterility. 44 (5), 656-662 (1985).
  15. Hirata, T., et al. Concomitant ovarian drilling and oocyte retrieval by laparoendoscopic single-site surgery led to live birth using in vitro maturation of oocyte and transfer of frozen-thawed blastocyst in woman with polycystic ovary syndrome. Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 40 (5), 1431-1435 (2014).
  16. Deutinger, J., et al. Follicular aspiration for in vitro fertilization: sonographically guided transvaginal versus laparoscopic approach. European Journal of Obstetrics, Gynecology, and Reproductive Biology. 26 (2), 127-133 (1987).
  17. Tanbo, T., Henriksen, T., Magnus, O., Abyholm, T. Oocyte retrieval in an IVF program. A comparison of laparoscopic and transvaginal ultrasound-guided follicular puncture. Acta Obstetricia et Gynecologica Scandinavica. 67 (3), 243-246 (1988).
  18. Nagy, Z. P., et al. Pregnancy and birth after intracytoplasmic sperm injection of in vitro matured germinal-vesicle stage oocytes: case report. Fertility and Sterility. 65 (5), 1047-1050 (1996).
  19. Söderström-Anttila, V., Mäkinen, S., Tuuri, T., Suikkari, A. -M. Favourable pregnancy results with insemination of in vitro matured oocytes from unstimulated patients. Human Reproduction. 20 (6), 1534-1540 (2005).
  20. Hwang, J. L., Lin, Y. H., Tsai, Y. L. In vitro maturation and fertilization of immature oocytes: a comparative study of fertilization techniques. Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 17 (1), 39-43 (2000).
  21. Walls, M., Junk, S., Ryan, J. P., Hart, R. IVF versus ICSI for the fertilization of in-vitro matured human oocytes. Reproductive Biomedicine Online. 25 (6), 603-607 (2012).
  22. Park, J. H., Jee, B. C., Kim, S. H. Comparison of normal and abnormal fertilization of in vitro-matured human oocyte according to insemination method. Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 42 (4), 417-421 (2016).
  23. Ho, V. N. A., Pham, T. D., Le, A. H., Ho, T. M., Vuong, L. N. Live birth rate after human chorionic gonadotropin priming in vitro maturation in women with polycystic ovary syndrome. Journal of Ovarian Research. 11 (1), 70(2018).
  24. Zheng, X., et al. Effect of hCG priming on embryonic development of immature oocytes collected from unstimulated women with polycystic ovarian syndrome. Reproductive Biology and Endocrinology. 10, 40(2012).
  25. Tannus, S., et al. Predictive factors for live birth after in vitro maturation of oocytes in women with polycystic ovary syndrome. Archives of Gynecology and Obstetrics. 297 (1), 199-204 (2018).
  26. Cohen, Y., et al. Decreased pregnancy and live birth rates after vitrification of in vitro matured oocytes. Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 35 (9), 1683-1689 (2018).
  27. Yazdanpanah, F., Khalili, M. A., Eftekhar, M., Karimi, H. The effect of vitrification on maturation and viability capacities of immature human oocytes. Archives of Gynecology and Obstetrics. 288 (2), 439-444 (2013).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Sprostowanie


Formal Correction: Erratum: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery
Posted by JoVE Editors on 6/26/2023. Citeable Link.

An erratum was issued for: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery. The Protocol and Representative Results sections were updated.

Step 3.2 of the Protocol was updated from:

Add 0.5 mL of IVM medium supplemented with 0.075 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.075 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.

to:

Add 0.5 mL of IVM medium supplemented with 0.75 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.75 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.

The legend for Figure 2 was updated from:

Figure 2: Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) MII, (C) MI, (D) GV stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.

to:

Figure 2: Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) GV, (C) MI, (D) MII stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.

Tagi

aspiracja niedojrza ych p cherzyk wkompleks kumulus oocytpo ywka do IVMwstrzykiwanie plemnika do cytoplazmyzachowanie p odno ciwspomagane technologie prokreacyjneprowadzenie pod kontrol USG

Powiązane artykuły