Tutaj prezentujemy protokół odnerwienia współczulnego nerek (RDN) u myszy z nadciśnieniem wywołanym infuzją angiotensyny II. Zabieg jest powtarzalny, wygodny i pozwala na zbadanie mechanizmów regulacyjnych RDN na nadciśnienie tętnicze i przerost mięśnia sercowego.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Poprawa unerwienia nerek łagodziła nadciśnienie indukowane przez infuzję angiotensyny II
* These authors contributed equally
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Korzyści płynące z odnerwienia współczulnego nerek (RDN) na ciśnienie krwi zostały udowodnione w wielu badaniach klinicznych w ostatnich latach. Jednak mechanizm regulacyjny RDN na nadciśnienie pozostaje nieuchwytny. Dlatego ważne jest, aby ustalić prostszy model RDN u myszy. W tym badaniu mini pompy osmotyczne wypełnione angiotensyną II wszczepiono 14-tygodniowym myszom C57BL/6. Tydzień po wszczepieniu minipompy osmotycznej przeprowadzono zmodyfikowaną procedurę RDN na obustronnych tętnicach nerkowych myszy przy użyciu fenolu. Myszom dopasowanym pod względem wieku i płci podawano sól fizjologiczną i podawano jako grupę pozorowaną. Ciśnienie krwi mierzono na początku badania, a następnie co tydzień przez 21 dni. Następnie pobrano tętnicę nerkową, aortę brzuszną i serce do badania histologicznego za pomocą barwienia H&E i Massona. W tym badaniu przedstawiamy prosty, praktyczny, powtarzalny i ustandaryzowany model RDN, który może kontrolować nadciśnienie tętnicze i łagodzić przerost mięśnia sercowego. Technika ta może denerwować obwodowe nerwy współczulne nerek bez uszkodzenia tętnicy nerkowej. W porównaniu z poprzednimi modelami, zmodyfikowany RDN ułatwia badanie patobiologii i patofizjologii nadciśnienia tętniczego.
Wprowadzenie
Nadciśnienie jest główną przewlekłą chorobą sercowo-naczyniową na całym świecie. Niekontrolowane nadciśnienie może uszkodzić narządy docelowe i przyczynić się do niewydolności serca, udaru mózgu i przewlekłych chorób nerek1,2,3. Częstość występowania nadciśnienia tętniczego wzrosła w Chinach z 20% do 31% w latach 1991-2007. Liczba dorosłych z nadciśnieniem tętniczym w Chinach może się podwoić po niedawnej rewizji kryteriów diagnostycznych nadciśnienia (130/80 mmHg)4. Nadciśnienie tętnicze można kontrolować za pomocą leków, jednak około 20% pacjentów ni....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Wszystkie procedury eksperymentalne na zwierzętach były zgodne z odpowiednim Przewodnikiem etycznym dotyczącym opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych (publikacja NIH nr 85-23, poprawiona w 2011 roku) i zostały zatwierdzone przez komitety ds. badań na zwierzętach szpitala Huadong afiliowanego przy Uniwersytecie Fudan. Czternastotygodniowe samce myszy C57BL/6 (28-30g) zostały losowo podzielone na cztery grupy: grupa Sham, grupa Sham+Ang II, grupa RDN, grupa RDN+Ang II, n = 6 w każdej grupie. Wszystkie zwierzęta utrzymywano w określonych zamkniętych warunkach wolnych od czynników chorobotwórczych w pomieszczeniu o kontrolowanej temperaturze 24 ± 1 °C z 12-godzinny....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Statystyka
Wszystkie dane przedstawiono jako średnia ± odchylenie standardowe. W eksperymentach obejmujących trzy lub więcej warunków zastosowano jednoczynnikową analizę wariancji (ANOVA), a następnie testy post-hoc Bonferroniego do porównań między poszczególnymi grupami. Wartość p równa lub mniejsza niż 0,05 uznana została za istotną. Do wykonania wszystkich analiz statystycznych wykorzystano komercyjne oprogramowanie.
Wzrost ciśnienia tętniczego wywołany przez An.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
To, czy RDN może obniżać ciśnienie krwi, stało się kontrowersyjne od czasu publikacji negatywnego wyniku badania symplicity HTN-3 7,25. Jednak kilka badań klinicznych i eksperymentów na zwierzętach wykazało pozytywne i skuteczne wyniki RDN u ludzi i zwierząt z nadciśnieniemtętniczym 9,10,11,12,13,14,15,16,17.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Nie ma żadnych konfliktów interesów, finansowych lub innych, jak deklarują autorzy.
Podziękowania
Ta praca była wspierana przez Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Chin (81770420), Komisję Nauki i Technologii Gminy Szanghaj (20140900600), Szanghajskie Kluczowe Laboratorium Klinicznej Medycyny Geriatrycznej (13dz2260700), Szanghajską Miejską Kluczową Specjalizację Kliniczną (shslczdzk02801) oraz Centrum geriatrycznej choroby wieńcowej, Szpital Huadong Stowarzyszony z Uniwersytetem Fudan.
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Angiotensyna II | Sangon Biotech | CAS: 4474-91-3 | Aby wykonać model animolu z nadciśnieniem |
| Przeciwciało przeciw hydroksylazie tyrozyny | Abcam | ab137869 | Aby ocenić ekspresję TH nerwów nerkowych |
| Analiza ciśnienia krwi | Visitech Systems | BP-2000 | Zmierz ciśnienie krwi myszy |
| Mini-pompa osmotyczna | DURECT Corporation | CA 95014 | Aby napełnić Angiotensyną II |
| Norepinefryna Zestaw ELISA | Abcam | ab287789 | do pomiaru poziomu noradrenaliny w nerkach |
| Phenol | Sangon Biotech | CAS: 108-95-2 | Uszkodzić nerek współczulnych |
| Papier wagowy | Sangon Biotech | F512112 | Aby zniszczyć nerw nerkowy za pomocą papieru wagowego zanurzonego w fenolu; https://www.sangon.com/productDetail?productInfo.code=F512112. |
Bibliografia
- Messerli, F. H., Rimoldi, S. F., Bangalore, S. The transition from hypertension to heart failure: Contemporary update. JACC Heart Failure. 5 (8), 543-551 (2017).
- Lackland, D. T., et al. Implications of recent clinical trials....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
