Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Przedstawione tutaj jest dojrzewanie komórek jajowych in vitro (OTO-IVM), dostępna technika w laboratorium medycznego wspomaganego rozrodu (MAR), oferująca realistyczne dodatkowe opcje zachowania płodności pacjentkom, które potrzebują kriokonserwacji tkanki jajnika.
Witryfikacja dojrzałych oocytów jest standardem opieki mającej na celu zachowanie płodności u kobiet zagrożonych niepłodnością. Jednak kriokonserwacja tkanki jajnikowej (OTC) jest nadal jedyną opcją zachowania płodności u kobiet, które muszą pilnie rozpocząć leczenie gonadotoksyczne lub u dzieci przed okresem dojrzewania. Podczas przygotowania kory jajnika do kriokonserwacji usuwa się tkankę rdzeniową. Rosnące pęcherzyki antralne znajdują się na granicy granicy granicy styku kora-rdzeń jajnika i są pękane podczas tego procesu, uwalniając ich kompleks wzgórko-oocytowy (COC). Poprzez dokładne zbadanie pożywki i rozdrobnionej tkanki rdzeniowej, te niedojrzałe kompleksy wzgórko-oocyty można zidentyfikować bez ingerencji w procedurę OTC. Niedojrzałe oocyty pochodzące z tkanki jajnikowej mogą być z powodzeniem dojrzewane in vitro, tworząc dodatkowe źródło gamet do zachowania płodności. Jeśli OTC jest wykonywany w laboratorium medycznego wspomaganego rozrodu lub w jego pobliżu, wszystkie niezbędne narzędzia do dojrzewania in vitro (IVM) i witryfikacji oocytów mogą być pod ręką. Ponadto, po remisji i życzeniu dziecka, pacjentka ma wiele możliwości przywrócenia płodności: przeszczep tkanki jajnikowej lub transfer zarodka po inseminacji witryfikowanych/ogrzewanych komórek jajowych. W związku z tym dojrzewanie komórek jajowych w warunkach in vitro (OTO-IVM) może być cenną techniką wspomagającą zachowanie płodności.
Opcje zachowania płodności (FP) dla kobiet, które planują leczenie gonadotoksyczne, terapię zmiany płci, lub kobiet, które mają genetyczne predyspozycje do przedwczesnej niewydolności jajników, zależą od stanu zdrowia i wieku pacjentki, dostępnych ram czasowych, rodzaju leczenia, preferencji pacjentki i procedur FP dostępnych w wybranym centrum płodności. Witryfikacja dojrzałych oocytów uzyskanych po stymulacji jajników gonadotropinami i pobraniu komórek jajowych w cyklu laboratoryjnym wspomaganego rozrodu medycznego (MAR) jest uważana za preferowaną opcję dla FP1,2. Jednak w przypadku dziewcząt przed okresem ....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Obecne badanie OTO-IVM zostało zatwierdzone przez lokalną Komisję Etyczną UZ-Bruksela (dodatek do projektu 2008/068 i projektu 2022/303). Wszyscy pacjenci podpisali pisemną świadomą zgodę. Każdy pacjent był indywidualnie oceniany przez lekarza specjalistę medycyny rozrodu, pielęgniarkę nawigatora i onkologa kierującego w celu skomponowania optymalnego planu leczenia FP, biorąc pod uwagę preferencje pacjenta14. Krótko mówiąc, pacjenci kwalifikujący się do OTC pilnie potrzebują FP i mają mniej niż 36 lat14. Aby połączyć OTC z OTO-IVM, chemio- lub radioterapia nie mogła być stosowana w ciągu 6 miesięcy poprzedzających OTC.<....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
W ciągu ostatniej dekady, 98 pacjentkom poddanym resekcji jajników lub biopsji jajników z powodu OTC zaoferowano również OTO-IVM. Przedstawione tutaj wyniki są aktualizacją programu klinicznego opublikowanego wcześniej7,13. Niedojrzałe oocyty uzyskane w trakcie przetwarzania tkanki jajnikowej dojrzewały in vitro, głównie przez 30 godzin. Ze względów praktycznych lub ze względu na niską dojrzałość dopuszczono jednak bardziej elastyczny czas dojrzewania, w.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Priorytetem procedury FP jest zawsze manipulacja i zamrożenie kory jajnika zgodnie ze standardowym protokołem operacyjnym, który został zatwierdzony w klinice. Wadą FP jest brak standardowego protokołu dostępnego w opublikowanej literaturze dotyczącej OTC i OTO-IVM. Trudno jest ocenić skuteczność i zasadność technik i adaptacji, ponieważ istnieje duża luka czasowa między zamrażaniem/witryfikacją a rozmrażaniem/ogrzewaniem w warunkach klinicznych. Jeśli zostaną wprowadzone zmiany w protokole OTC w celu zwiększenia wydajno.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Autorzy nie mają konkurencyjnych interesów finansowych.
Ta praca została przeprowadzona w laboratorium IVF w Brukseli IVF, Universitair Ziekenhuis of VUB, Bruksela. Autorzy chcieliby podziękować wszystkim członkom zespołu laboratorium IVF w Brukseli za ich wysokie umiejętności, dokładność i elastyczność potrzebne do stworzenia jednostki zajmującej się zachowaniem płodności w laboratorium MAR.
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| 1000 &mikro; L końcówki filtrów | Eppendorf/VWR International | 613-6780 | COC search |
| Chłodnica stołowa | Fisher Scientific | 15-350-54 | Pokrywka chłodnicy stołowej służy do przygotowania tkanki, uchwyt na rurkę chłodnicy stołowej do przechowywania kriowiali z chłodzonym medium zamrażającym |
| Naczynie do hodowli komórek Corning, bez obróbki, 100 mm | Corning/VWR International | 430591 | Naczynie do preparacji tkanek jajnikowych |
| CryoSure-DMSO | WAK Chemicals | 0482 | Krioprotektant do kriokonserwacji tkanek jajników |
| Cumulase | Origio/CooperSurgical | 16125000A | Rekombinowany ludzki enzym hialuronidazowy do usuwania komórek wzgórka po |
| IVM Spray odkażający: Suprox | Medipure LTD | MP016 | Roztwór dezynfekujący do aseptycznego obchodzenia się z urządzeniem bakteriobójczym i sporobójczym |
| Skalpele jednorazowe | Swann-Morton | 0511 | Preparat tkanki jajnikowej |
| Falcon 14 ml probówka z polistyrenu z okrągłym dnem, z zatrzaskiem, sterylny | Falcon/VWR International | BDAA352057 | Medium |
| Sitko Falcon Cell 70 i mikro; m | Falcon/VWR International | 352350 | Filtr do eliminacji zanieczyszczenia krwinkami czerwonymi i wyszukiwania COC |
| Kontrola zamarzania Kriokomora i regulator temperatury w ampułkach | Cryologic | CL-8800i CC60AS | Maszyna do powolnego zamrażania |
| FSH: Menopur 75 IU | Ferring | BE197504 | Hormon folikulotropowy: Suplement do podłoża IVM |
| Pipeta manipulacyjna 290-310 i mikro; m | Vitrolife | 15538 | COC search: delikatny transfer COC bez uszkadzania połączenia oocyta-wzgórek komórkowy |
| hCG: Brevactid 5000 IE | Ferring | 5008001036 | ludzkiej gonadotropiny kosmówkowej: Suplement do IVM średniej |
| probówki o wysokim poziomie bezpieczeństwa | CryoBioSystem | 022252 | kriowialny, zgrzewany do bezpiecznego krioprzechowywania, |
| rozwiązanie HSA | Vitrolife | 10064 | Albumina surowicy ludzkiej: suplement do pożywki IVM |
| Leibovitz's L-15 medium | Life Technologies Europe | 31415-029 | Pożywka do przygotowania tkanek jajnikowych |
| System MediCult IVM | Origio/CooperSurgical | 82214010 | podłoże do IVM zawierające zarówno pożywkę LAG, jak i IVM. Pożywkę IVM należy uzupełnić zgodnie z opisem w protokole |
| Nożyczki fino METZENBAUM 140 mm | Chirurgiczne | VIZ08280314 | Nożyczki średniej wielkości do wstępnego usuwania rdzenia |
| Naczynia 4-dołkowe Nunc do IVF | Nunc/VWR International | 144444 | Pobieranie COC podczas poszukiwania COC i hodowli IVM |
| Zapłodnienie Nunc Invitro Szalka Petriego z wentylowaną pokrywą, 60 mm, bez pirogeny, sterylna | termiczna Scientific/VWR | NUNC150270 | Naczynie do wyszukiwania COC |
| Pożywka do obsługi oocytów: Płuczące podłoże z heparyną | Origio/CooperSurgical | 10765060 | Medium wyszukiwania COC |
| Ovoil | Vitrolife | 10029 | olej do hodowli IVM |
| penicyliny/streptomycyny | Life Technologies Europe | 15140-148 | Suplement do podłoża do stosowania bez recepty |
| Nożyczki, zakrzywione, Długa 150 mm, ostrze 20 mm | Chirurgiczna konserwacja | VIREBST999-SC | Małe nożyczki do usuwania resztek rdzenia |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Ten artykuł został opublikowany
Film wkrótce dostępny