Ocena funkcji prawej komory w eksperymentalnych modelach tętniczego nadciśnienia płucnego

Summary

Prezentacja szczegółowych metod oceny funkcji prawej komory poprawi jakość i wiarygodność badań nad nadciśnieniem płucnym, oferując solidne ramy dla przyszłych badań i zwiększając odtwarzalność w różnych laboratoriach.

Abstract

Nadciśnienie płucne (PH) jest przewlekłym schorzeniem związanym ze zmniejszonym przeżyciem, co czyni go krytycznym obszarem badań. Eksperymentalne modele PH znacznie poszerzyły naszą wiedzę na temat jego patofizjologii i ułatwiły projektowanie małych badań obserwacyjnych i klinicznych. Kluczowe znaczenie ma jednak ustanowienie ustandaryzowanych metodologii w celu zapewnienia porównywalności między różnymi badaniami eksperymentalnymi i grupami badawczymi. Standaryzacja nie tylko zwiększa odtwarzalność, ale także sprzyja współpracy między zespołami badawczymi.

W tym filmie przedstawiamy kroki metodologiczne wymagane do dokładnej analizy parametrów funkcjonalnych PH. Obejmują one ocenę echokardiograficzną, inwazyjne nakłucie prawej komory (RV) i obliczenie wskaźnika Fultona. W odniesieniu do echokardiografii szczegółowo przedstawiono pomiar czasu przyspieszenia tętnicy płucnej i współczynnika czasu wyrzutu płucnego, a także obliczanie wydajności RV. Jeśli chodzi o pomiary inwazyjne, opisano podstawowe procedury, w tym protokoły znieczulenia, optymalne ułożenie zwierząt, konfigurację wentylacji mechanicznej, precyzyjne otwieranie ściany klatki piersiowej, wizualizację RV i techniki nakłuwania RV.

Metodologia rozwarstwiania komór (wskaźnik Fultona) jest szczegółowo wyjaśniona, podobnie jak obliczanie stosunku RV do lewej komory do przegrody, skorygowane o masę ciała zwierzęcia. Wierzymy, że szczegółowa prezentacja tych metod poprawi jakość i wiarygodność badań nad pH, oferując solidne ramy dla przyszłych badań i zwiększając odtwarzalność w różnych laboratoriach.

Introduction

Odpowiedni funkcjonalny pomiar funkcji prawej komory (RV) u małych zwierząt stał się niezbędny od czasu wzrostu liczby badań z wykorzystaniem modeli zwierzęcych w naukach o układach oddechowych i sercowo-naczyniowych. Istnieje kilka zwierzęcych modeli nadciśnienia płucnego (PH), wykorzystujących monocrotaline¹, hypoxia² lub Sugen + hypoxia³. Dobrze posłużyły do odkrycia nowych ścieżek patofizjologicznych^1,4 i badania nowych potencjalnych metod leczenia farmakologicznego⁵ i niefarmakologicznego⁶

Protocol

Protokół badania został zatwierdzony przez Komitet Etyki ds. Wykorzystania Zwierząt (CEUA) Uniwersytetu Federalnego w Rio de Janeiro pod numerem procesu 043/22. Wszystkie procedury były zgodne z Zasadami Opieki nad Zwierzętami Laboratoryjnymi oraz Przewodnikiem Narodowej Akademii Nauk Stanów Zjednoczonych dotyczącym opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych. Badanie było zgodne z wytycznymi ARRIVE¹¹.

1. Przygotowanie zwierząt i protokół eksperymentalny

1. Oblicz liczbę zwierząt zgodnie z wcześniejszymi raportami¹².
   UWAGA: Biorąc pod uwagę, że różnice w RVSP m....

Results

Dla analiz statystycznych, każda zmienna została przetestowana pod kątem normalności i wariancji za pomocą testu Shapiro-Wilka. Dane są prezentowane jako średnie ± odchylenia standardowego. Niesparowany test t zastosowano do porównania stężeń cząstek w grupie kontrolnej (CTRL) i grupy tętniczego nadciśnienia płucnego (PAH) (p<0,05).

Zmiany echokardiograficzne w zwierzęcym modelu PAH
Rysunek 4 pokazuje, że stosunek PAT/PET był niższ.......

Discussion

TNP jest postępującą chorobą charakteryzującą się nadmierną przebudową naczyń krwionośnych, która sprzyja wzrostowi oporu naczyniowego płuc, co skutkuje zwiększonym obciążeniem następczym RV¹⁴. W związku z tym RVSP stanowi zmienną funkcjonalną, która bezpośrednio koreluje z ciężkością WWA¹⁵. Z biegiem czasu reakcją adaptacyjną RV jest kompensacyjny przerost koncentryczny (mierzony wskaźnikiem Fultona)¹⁶ i rozszerzenie komór (mierzone średnicą odpływu.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Odczynniki
Alcohol 70%	Czarnogóra	ALC70-001
Żel przewodzący	Mercor	CG-002
Roztwór soli fizjologicznej (NaCl 0,9%)	BioPharma	SAL-009
Instruments
19 G zestaw	żył skóry głowyDescarpack	SVS-19G
Zakrzywione kleszcze kelly	ABC instrumentos cirurgicos	CKF-003
Kleszcze Kelly	ABC instrumentos cirurgicos	KF-004
Igły (18, 22 i 26 G)	Descarpack	NDL-MIX
szalka Petriego	GlassLab	PD-150
Żyletka	ABC instrumentos cirurgicos	RB-005
Skalpel	ABC instrumentos cirurgicos	SC-006
Nożyczki	ABC instrumentos cirurgicos	SCIS-007
Linia do szwów	ABC instrumentos cirurgicos	SUT-008
Strzykawki (1, 3 i 5 ml)	Descarpack	SYR-135
Kaniula tracheostomijna	Pęseta MedTech	TC-010
	ABC instrumentos cirurgicos	TWZ-011
Drugs
Dextroketamina chlorowodorek 5%	Cristá lia	DXT-005	87,5 mg/kg dootrzewnowy
Izofluran 1 ml/ml 240 mL	Crist&aaostry; lia	ISO-240	2,5% roztwór do inhalacji
Chlorowodorek lidokainy 1%	Cristá lia	LID-001	400 &mikro; L podskórnie miejscowo
Monocrotaline	Sigma-Aldrich	C2401	60 mg/kg dootrzewnowy
bromek Pancuronium 2 mg/ml	Crist&aaacute; lia	PAN-002	2 mg/kg dożylnie
Heparyna sodowa 5000 j.m./ml	Crist&aaostry; lia	HEP-5000	rozcieńczony 1:4 w 1 ml
chlorowodorku ksylazyny 2%	Syntec	XYL-002	12,5 mg/kg dootrzewnowo
Sprzęt
GraphPad Prism 9 GraphPad	Software, Inc	GP9
Sieciowy wieloparametrowy monitor weterynaryjny LifeWindow 9x	Digicare Zdrowie zwierząt	LW9x
Oprogramowanie LabView	National Instruments, Corp.	Oprogramowanie LV-2019
MATLAB R2019a (wersja)	MathWorks, Inc.	MATLAB-2019
Monitor i przetwornik sygnału	MedTech	MST-015
Waga precyzyjna	Sartorius	PS-020
R540 Myszy& Maszyna do znieczulenia szczurów	RWD Life Schience Co., LTD	R540-ANA
Scale	Ohaus	SCL-025
Wentylator mechaniczny Servo-i	Getinge AB	SERVO-I	FiO2 = 21%; objętość oddechowa = 8 ml/kg, częstość oddechów = 70 uderzeń na minutę i PEEP = 3 cmH2O
Oprogramowanie SonoView	System SONOTEC Ultraschallsensorik Halle GmbH	SV-2020
UGEO HM70A	Samsung Eletrô nica da Amazô nia LTDA	HM70A
G*Power 3.1.9.7	Uniwersytet Dü sseldorf, Niemcy	gpower