Artykuł metodologiczny

Badanie fizjologicznych barier przenoszenia wirusa u mszyc za pomocą mikroiniekcji

DOI:

10.3791/700

14 maja 2008

W tym artykule

Podsumowanie

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Mszyce są skutecznymi przekaźnikami wirusów roślinnych. Mikroiniekcja wirusa mszyc, procedura, którą dzisiaj pokażemy, jest techniką pozwalającą naukowcom wstrzyknąć wirusa bezpośrednio do hemofelu mszycy, omijając jelito, jedną z 2 głównych barier przenoszenia wirusa w sposób krążący. Ta sama technika jest również stosowana do wstrzykiwania dsRNA dla RNAi.

Streszczenie

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Wirus bochenka ziemniaka (PLRV) z rodziny Luteoviridae infekuje rośliny psiankowate. Przenoszony jest przez mszyce, przede wszystkim mszycę brzoskwiniową. Kiedy niezainfekowana mszyca żeruje na zainfekowanej roślinie, zaraża się wirusem przez łyko roślinne. Po spożyciu wirus musi przejść z jelita owada do hemolimfy (krwi owada), a następnie musi przejść przez gruczoł ślinowy, aby zostać przeniesionym z powrotem do nowej rośliny. Mszyca może przyjmować różne wirusy podczas chrupania rośliny, jednak tylko niewielka część przejdzie przez jelita i gruczoły ślinowe, dwie główne bariery przenoszenia, aby zainfekować więcej roślin. W laboratorium wykorzystujemy rośliny pęcherzycowe do badania transmisji PLRV. U tego żywiciela objawy charakteryzują się zahamowaniem wzrostu i chlorozą międzynerwową (żółknięcie liści między nerwami, przy czym nerwy pozostają zielone). Film, który prezentujemy, przedstawia metodę wykonywania mikroiniekcji mszyc owadom, które nie są wektorem wirusów PLVR i sprawdza, czy jelita zapobiegają przenoszeniu wirusa. Film, który prezentujemy, przedstawia metodę wykonywania mikroiniekcji mszyc u owadów, które nie są wektorami wirusów PLVR i sprawdza, czy jelito lub gruczoł ślinowy zapobiega przenoszeniu wirusa.

Protokół

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Aby sprawdzić, czy mszyca jest w stanie przenosić wirusa, karmimy mszyce zainfekowaną tkanką przez 2 dni.
  2. Następnie pozwalamy mu żerować w zdrowej roślinie przez 5 dni. Roślina jest następnie poddawana fumigacji i po 3 tygodniach zaczynamy szukać objawów.
  3. Kiedy znajdziemy mszycę, która nie może przenosić wirusa, możemy ocenić, która z 2 barier powstrzymuje wirusa za pomocą procedury mikroiniekcji.
  4. Wirus jest wstrzykiwany bezpośrednio do hemoelu, omijając w ten sposób barierę transmisji jelitowej.

Proszę odwiedzić stronę Annual Reviews of Plant Biology, aby uzyskać więcej informacji na temat tego protokołu i odporności roślin na roślinożerność owadów.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Aphid MicroinjectionViral TransmissionGut BarrierSalivary GlandHemolymph InjectionPLRV TransmissionMicroinjection ProcedureVirus InjectionAphid VectorPlant Virus

Powiązane artykuły