$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Gdy komórki osiągną konfluację, muszą być subhodowane lub pasażowane. Brak subhodowli zlewających się komórek powoduje obniżenie indeksu mitotycznego i ostatecznie śmierć komórki. Pierwszym krokiem w subkulturze jest oderwanie komórek od powierzchni naczynia do hodowli pierwotnej za pomocą trypsynizacji lub środków mechanicznych. Powstała w ten sposób zawiesina komórek jest następnie dzielona lub ponownie wysiewana do świeżych kultur. Kultury wtórne są sprawdzane pod kątem wzrostu i okresowo karmione, a następnie mogą być subkulturowane w celu wytworzenia kultur trzeciorzędowych. Czas między pasażami komórek różni się w zależności od linii komórkowej i zależy od tempa wzrostu.