5.6: Podawanie związków I

1. Wstrzyknięcie podskórne

1. Ręcznie przytrzymuj mysz za pomocą jednoręcznego przytrzymywania krępowania. Po uchwyceniu pozwól myszy spocząć na stole lub innej bezpiecznej powierzchni. Pamiętaj, aby unikać wywierania nacisku na korpus myszy.
2. Oprzyj piętę dłoni na stole, aby uniknąć nadmiernego obciążenia myszy, które może utrudnić oddychanie. Myszy można również unieruchomić w urządzeniu komercyjnym. W przypadku szczurów najlepiej jest użyć komercyjnego urządzenia przytrzymującego.
3. Chwyć skórę i pociągnij w górę, aby stworzyć namiot ze skóry. W przypadku korzystania z urządzenia przytrzymującego może być konieczne użycie kleszczy do uchwycenia skóry przez szczelinę na górze.
4. Wbić igłę równolegle do kręgosłupa, skierowaną od głowy u podstawy fałdu skórnego namiotu. Skieruj igłę z dala od głowy, aby uniknąć możliwości przebicia czaszki, ponieważ kość czaszki myszy jest bardzo cienka. Szczury mają tendencję do podnoszenia głowy, co może spowodować umieszczenie zastrzyku w mięśniach szyi.
5. Włóż igłę skos do góry, aby umożliwić delikatne wślizgiwanie się w skórę. Zwróć uwagę, że igła jest wsuwana poniżej palców chwytających skórę. Aby zwiększyć bezpieczeństwo podczas wstrzykiwania przedmiotów niebezpiecznych biologicznie, skórę chwyta się kleszczami, eliminując w ten sposób możliwość zranienia igłą.
6. Odciągnąć tłok, aby sprawdzić, czy jest prawidłowo umieszczony. Jeśli powietrze zostanie zassane do strzykawki, oznacza to, że końcówka igły nie znajduje się pod skórą i będzie musiała zostać pobrana i ponownie położona. Jeśli po odciągnięciu tłoka występuje ciśnienie wsteczne, oznacza to prawidłowe umieszczenie igły i możliwość kontynuowania wstrzykiwania.
7. Wstrzykiwać substancję powoli, równomiernym ruchem. Aby zapobiec utracie przedmiotu do wstrzykiwań, należy zrobić przerwę po wstrzyknięciu, lekko obrócić igłę pod skórą i ścisnąć skórę w miejscu wstrzyknięcia, jednocześnie wyjmując igłę.

Rysunek 1. Wstrzyknięcie podskórne u myszy.

2. Iniekcja dootrzewnowa

1. W tej technice wstrzykiwania u myszy stosuje się metodę ręcznego krępowania jedną ręką. Wyreguluj rękę tak, aby znajdowała się wystarczająco wysoko na szyi, aby zapobiec obracaniu się myszy.
2. Chwyć luźną skórę na karku między kciukiem a palcem wskazującym.
3. Ustabilizuj tylne ćwiartki, przypinając luźną skórę wzdłuż grzbietu między drugim, trzecim i czwartym palcem a podstawą kciuka lub umieszczając ogon między trzecim a czwartym palcem.
4. Wstrzyknięcie IP u szczura wymaga dwóch osób, jednej do przytrzymania szczura, a drugiej do wykonania wstrzyknięcia.
   1. Chwyć szczura za ramiona, używając palca wskazującego i środkowego po obu stronach szyi oraz dłoni z tyłu. Kciuk oraz trzeci i czwarty palec powinny otaczać klatkę piersiową, aby zapobiec ruchom do przodu lub do tyłu. Ułożenie palców po obu stronach szyi zapobiega obracaniu głowy przez szczura.
   2. Podnieś szczura i obróć go, aby odsłonić brzuszny brzuch.
   3. Ustabilizuj tylne ćwiartki, mocno chwytając stopy i ogon i odsuwając je od ciała.
5. Ustaw mysz lub szczura tak, aby odsłonił brzuch, upewniając się, że jest skierowany do góry.
6. Przechyl zwierzę z głową skierowaną w dół pod kątem około 30°, aby jelita opadły do przodu.
7. Punkty orientacyjne iniekcji są następujące:
   1. Obszar, który ma zostać wstrzyknięty, jest otoczony czaszką wyimaginowaną linią biegnącą poziomo w poprzek ciała w górnej części biodra (od boku do boku).
   2. Linia środkowa to granica przyśrodkowa, rozpoznawana jako miejsce, w którym spotykają się włosy rosnące w przeciwnych kierunkach. U zwierząt bezwłosych linia środkowa rozciąga się w linii prostej od mieczykowatej do odbytu.
   3. Granica boczna to linia biegnąca od górnej części biodra do napletka u samca oraz od górnej części biodra i wzdłuż strzyków u samicy.
   4. Zapewnia to trójkątny obszar do bezpiecznego wstrzykiwania.
8. Wprowadzenie artykułu w obrębie punktów orientacyjnych
   1. Wbij igłę prostopadle do kręgosłupa, poza linią środkową, w trójkąt, jak opisano powyżej. Umieszczenie igły pod kątem 90° do płaszczyzny ciała pozwala na bezpieczne wstrzyknięcie z wykorzystaniem obu stron brzucha. Jest to szczególnie ważne w przypadku wielokrotnych wstrzyknięć, ponieważ minimalizuje uraz tkanki, umożliwiając naprzemienność miejsc wstrzyknięć.
   2. Gdy igła zostanie umieszczona pod kątem 90°, "wskoczy" w brzuch, co pozwoli na łatwiejsze określenie głębokości. Jest to również wizualna i dotykowa wskazówka, że igła jest prawidłowo ustawiona.
   3. Odessać strzykawkę, aby zapewnić umieszczenie w jamie otrzewnej, a nie w pęcherzu moczowym, jelicie lub strukturach naczyniowych.
   4. Należy unikać wstrzykiwania doogonowo samcowi myszy, aby zapobiec podawaniu artykułu do worka mosznowego. Należy unikać wstrzykiwania do smoczka samicy, aby zapobiec urazowi.

Rysunek 2. Punkty orientacyjne dla wstrzyknięcia dootrzewnowego u myszy.

3. Wstrzyknięcie domięśniowe

1. Unieruchomienie w tej technice dla myszy i szczurów wymaga albo dwóch osób, albo użycia rurki krępującej. Opisana tutaj jest metoda jednoosobowa wykorzystująca urządzenie krępujące.
   1. Umieścić zwierzę w urządzeniu przytrzymującym.
   2. Gdy zwierzę znajdzie się w tubie, chwyć za ogon, aby ustawić zwierzę z tylnymi nogami poza rurką.
   3. Chwyć skórę boku w czaszkowej części kości udowej, aby wyprostować nogę i zapobiec zgięciu kolana.
   4. Urządzenie przytrzymujące należy ustawić tak, aby stało na stole z głową zwierzęcia skierowaną w dół lub leżało na stole skierowanym w stronę ciała technika, aby umożliwić stabilizację urządzenia podczas wykonywania wstrzyknięcia.
   5. Punkty orientacyjne wstrzyknięcia są następujące: zarówno noga myszy, jak i szczura są małe, a mięśnie pośladkowe (mięśnie ud ogonowych) stanowią największą masę mięśniową w kończynie tylnej; Drugą co do wielkości masą mięśniową kończyny tylnej jest mięsień brzuchaty łydki (mięsień łydki). Wstrzyknięcie wykonuje się od strony ogonowej nogi.
      1. Zlokalizuj masę mięśniową pośladków za kością udową. Kość można wyczuć palpacyjnie, a duży mięsień jest łatwo wyczuwalny.
      2. Zwróć uwagę, że linia środkowa nogi od tylnej części biegnie od punktu stawu skokowego do ogona. Włosy często mają grzbiet, w którym się łączą, ponieważ rosną w przeciwnych kierunkach od powierzchni bocznej i wewnętrznej.
      3. Zastrzyki wykonuje się w kierunku bocznej części uda poza linią środkową. Zmniejsza to prawdopodobieństwo uszkodzenia nerwów i naczyń krwionośnych znajdujących się na przyśrodkowej powierzchni nogi.
      4. Iniekcje do mięśnia brzuchatego łydki wykonuje się od strony tylnej i ze starannym uwzględnieniem lokalizacji żyły odpiszczelowej bocznej.
   6. Wprowadzenie artykułu w obrębie punktów orientacyjnych
      1. Wbić igłę prostopadle do kości udowej poza linią środkową, jak opisano powyżej, na maksymalną głębokość 5 mm w przypadku mięśnia pośladkowego i maksymalnie 3 mm w przypadku mięśnia brzuchatego łydki.
      2. Aby uniknąć urazu mięśnia, należy zapobiegać obcemu ruchowi igły w tkance. Strzykawkę należy trzymać w taki sposób, aby nie wymagała zmiany pozycji ręki w celu wykonania wstrzyknięcia.
      3. Odessać strzykawkę, aby zapewnić umieszczenie jej w mięśniu, a nie w naczyniu krwionośnym.
      4. Wstrzykiwać materiał równomiernym, płynnym ruchem. Nie należy wstrzykiwać szybko, aby umożliwić powolne rozszerzanie mięśni. Szybkie wstrzyknięcie spowoduje uraz tkanki.

Rysunek 3. Wstrzyknięcie domięśniowe do mięśnia pośladkowego u szczurów.

4. Wstrzyknięcie dożylne z wykorzystaniem żyły ogonowej

1. Unieruchomienie zwierzęcia zależy od tego, czy zwierzę jest znieczulone, czy przytomne.
   1. Użyj cylindrycznej rurki krępującej dla przytomnych myszy lub szczurów, z wyjątkiem zwierząt bezwłosych lub nagich. Ze względu na tłustą naturę bezwłosych zwierząt trudno jest zmienić ich położenie i usunąć z akrylowych ograniczników, ponieważ ich skóra ma tendencję do przylegania do sztywnego plastiku. W ten sposób stosuje się elastyczny stożek z tworzywa sztucznego.
   2. Inne urządzenia iniekcyjne obejmują oświetlone platformy, podgrzewane platformy i sztywne plastikowe stożki, w których mysz jest utrzymywana w stożku ściśle z napięciem na ogonie.
   3. Znieczulone myszy mogą nie potrzebować ograniczeń.
   4. Ogrzej całe ciało lub tylko ogon, aby zapewnić rozszerzenie naczyń krwionośnych naczyń ogonowych.
      1. Ogrzej całe ciało za pomocą elektrycznej poduszki grzewczej ustawionej na podłożu lub koca z obiegową wodą.
      2. Umieść zwierzę w urządzeniu przytrzymującym, owinięte w źródło ciepła.
      3. Uważnie obserwuj zwierzę i usuń je ze źródła ciepła, gdy tylko naczynia krwionośne się rozszerzą. Rozgrzanie całego ciała można również osiągnąć za pomocą lampy grzewczej skierowanej do klatki. Podczas korzystania z lampy grzewczej zwierzęta muszą być uważnie obserwowane, ponieważ łatwo je przegrzać.
      4. Gdy rozgrzanie całego ciała nie jest możliwe, samo podgrzanie ogona można osiągnąć za pomocą ciepłych okładów z podgrzewanego ręcznika, butelki z gorącą wodą lub zanurzenia ogona w ciepłej wodzie. Należy zachować ostrożność, aby uniknąć poparzenia ogona, ponieważ butelki z gorącą wodą, podgrzane ręczniki i ciepła woda nie mają regulatorów temperatury. Często zdarza się, że źródła ciepła są początkowo przegrzane. Te źródła ciepła również szybko się schładzają.
   5. Stosowanie oleju tkankowego to kolejny sposób na poprawę wizualizacji naczyń krwionośnych.
      1. Zanurz aplikator z bawełnianą końcówką w oleju w chusteczce i nałóż olejek z dala od części ogona, która jest chwytana w celu stabilizacji. Olej tkankowy powoduje, że naczynia stają się wyraźniej zaznaczone.
      2. Na rynku dostępne są nietoksyczne oleje, które zawierają substancję chemiczną w preparacie, która powoduje ocieplenie skóry i rozszerzenie naczyń krwionośnych wraz z parowaniem. Olejki te nakłada się, a po kilku chwilach, gdy naczynka są już widoczne, nadmiar sebum wyciera się wacikiem.
      3. Wszystkie oleje mogą utrudniać utrzymanie ogona.
      4. W przypadku stosowania olejków iniekcja musi być wykonana natychmiast po wizualizacji naczyń.
   6. Punkty orientacyjne iniekcji są następujące:
      1. Boczne żyły ogonowe znajdują się po bokach ogona. Istnieją również naczynia biegnące wzdłuż grzbietowej i brzusznej linii środkowej ogona, które nie nadają się do celów iniekcyjnych.
      2. Zwierzę w unieruchomieniu można obrócić tak, aby naczynia boczne były skierowane do góry, co ułatwia wstrzyknięcie. Alternatywnie, ogon można obrócić, aby ustawić naczynia w bardziej akceptowalnej pozycji do wstrzyknięcia.
      3. Naczynia są bardzo powierzchowne. Stają się bardziej powierzchowne, gdy docierają do podstawy ogona.
   7. Wstrzyknięcie artykułu do żyły ogonowej wymaga umiejętności. Aby uniknąć urazu naczynia krwionośnego, należy zapobiegać obcemu ruchowi igły. Strzykawka jest trzymana w taki sposób, że nie wymaga zmiany pozycji ręki w celu wykonania wstrzyknięcia.
      1. Ustaw ogon tak, aby naczynie było widoczne i utrzymywane pod napięciem. Nie należy nadmiernie napinać ogona, ponieważ naczynie może zostać rozciągnięte, a przepływ krwi zmniejszony.
      2. Umieścić igłę bezpośrednio nad naczyniem tak daleko, jak to możliwe.
      3. Lekko dociśnij i wsuń igłę w ogon równolegle do kręgów. Unikaj pochylania igły w dół, ponieważ igła przebije naczynie. Igła powinna być widoczna w naczyniu, ponieważ jest wsunięta co najmniej 2 mm w światło.
      4. Wstrzykiwać materiał powolnym, płynnym ruchem, aby uniknąć pęknięcia naczynia.
      5. Zwróć szczególną uwagę na ogon podczas wstrzykiwania. Po prawidłowym włożeniu do naczynia materiał iniekcyjny wpływający do naczynia jest wyczuwalny bez oporu. Naczynie krwionośne powinno blednąć, gdy krew jest wypychana przez materiał do wstrzykiwań.
      6. Jeśli igła nie znajduje się w naczyniu, podczas wstrzykiwania wystąpi silny opór. W przypadku wstrzykiwania z siłą materiał wypełni przestrzeń podskórną, a ogon wzrośnie. Należy natychmiast przerwać pracę, ponieważ materiał przeznaczony do wstrzykiwania dożylnego może działać żrąco na otaczające tkanki. Wyjąć igłę i podjąć kolejną próbę wstrzyknięcia bardziej czaszkowo w ogon.
      7. Po udanym wstrzyknięciu należy wyjąć igłę i przyłożyć ucisk do miejsca wstrzyknięcia, aby zapewnić dobrą hemostazę przed powrotem zwierzęcia do klatki.

Rysunek 4. Wstrzyknięcie żyły ogonowej u myszy.

Podawanie związków jest często integralnym elementem badań na zwierzętach i należy ocenić wiele czynników, aby upewnić się, że związek jest dostarczany prawidłowo i w humanitarny sposób. Dwie główne drogi podania to dojelitowo - przez przewód pokarmowy i pozajelitowo - na zewnątrz przewodu pokarmowego. Główna różnica polega na tym, że jeśli związek jest podawany drogą dojelitową, ulega metabolizmowi wątrobowemu PRZED wejściem do krwiobiegu. Natomiast dowolną drogą pozajelitową, taką jak dożylna lub domięśniowa, substancja pomija to pierwsze przejście przez wątrobę, co zwykle skutkuje wyższą biodostępnością.

W tym pierwszym filmie z serii na temat podawania związków zaczniemy od omówienia czynników wpływających na wybór drogi podawania w ogóle. Następnie przyjrzymy się najczęstszym metodom wstrzykiwań pozajelitowych, w tym podskórnym w skrócie SC lub SubQ, dootrzewnowym lub IP, domięśniowym lub domięśniowym oraz dożylnym AKA IV.

Zacznijmy od przeglądu kilku rzeczy, o których należy pamiętać przed przystąpieniem do jakiejkolwiek procedury podawania związku. Pierwszym krokiem jest przygotowanie roztworu lub zawiesiny do wstrzyknięcia, a pierwszą podstawową kwestią przy przygotowywaniu substancji jest sterylność. Aby zapobiec przedostawaniu się patogenów do organizmu zwierzęcia, ważne jest, aby materiał do wstrzykiwań oraz igły i strzykawki, które mają być użyte, były sterylne.

Drugą kwestią jest zgodność fizjologiczna. Roztwór dozujący, niezależnie od tego, czy jest podawany dojelitowo, czy pozajelitowo, musi być fizjologicznie buforowany do odpowiedniego pH, aby związek był prawidłowo wchłaniany i aby zapobiec uszkodzeniu tkanek. Trzecim czynnikiem jest lepkość artykułu do wstrzykiwań, która odgrywa kluczową rolę w doborze igły. Zwykle igły o rozmiarze od 20 do 30 są używane w procedurach podawania pozajelitowego dla myszy i szczurów. Piasty tych igieł są zwykle oznaczone kolorami w celu ułatwienia identyfikacji.

Roztwór powinien mieć wystarczającą płynność, aby przejść przez co najmniej jedną z tych igieł. Jeśli rozwiązanie może przejść przez więcej niż jeden, to ogólnie rzecz biorąc, wybór jest najmniejszym możliwym miernikiem. Kolejnym czynnikiem jest objętość podanego leku, która wpływa na wybór strzykawki. Podobnie jak w przypadku igieł, należy wybrać możliwie najmniejszą strzykawkę potrzebną do dokładnego dozowania z prawidłową podziałką. Rozstaw igieł i objętość podawanego leku są również zależne od drogi leczenia oraz gatunku, wielkości i wieku podawanego zwierzęcia. Zapoznaj się z poniższą tabelą 1, aby zapoznać się z wartościami związanymi z trasami omówionymi w tym filmie. Ostatnią ważną kwestią jest szybkość wchłaniania, która różni się znacznie w zależności od drogi podania i może odgrywać rolę w wyborze najlepiej dopasowanej metody.

Porozmawiajmy teraz o szczególnych cechach rutynowo stosowanych metod iniekcji.

SC lub SubQ Injection umieszcza materiał między warstwami skóry a mięśniem w wirtualnej przestrzeni powstałej poprzez uniesienie skóry. Pozwala to na bezpieczne wstrzykiwanie większych objętości, ale szybkość wchłaniania jest wolniejsza niż w przypadku innych dróg, zapewniając bardziej trwały efekt. Podczas podawania IP, związek jest wstrzykiwany bezpośrednio do jamy otrzewnej. Jest to inna powszechna metoda stosowana do dostarczania dużych ilości roztworu. Chociaż wstrzyknięcie IP jest uważane za podanie pozajelitowe, mechanizm wchłaniania jest w rzeczywistości bardziej podobny do dawkowania doustnego.

Wstrzyknięcie domięśniowe dostarcza związek bezpośrednio do mięśnia pośladkowego lub mięśnia brzuchatego łydki. Substancja wstrzykiwana domięśniowo jest szybko wchłaniana ze względu na dużą liczbę naczyń w tkance mięśniowej, co może sprawić, że w niektórych przypadkach będzie to preferowana droga. Niewłaściwe lub powtarzające się wstrzyknięcie w mięsień może spowodować uszkodzenie nerwów, powodując paraliż lub martwicę mięśni. Wreszcie, wstrzyknięcie dożylne do żyły ogonowej zwierzęcia jest najskuteczniejszą drogą podawania, ponieważ substancja jest bezpośrednio wprowadzana do układu krążenia. Należy pamiętać, że związek należy wstrzyknąć do jednej z bocznych żył ogonowych znajdujących się po bokach ogona. Istnieje naczynie biegnące wzdłuż brzusznej linii środkowej ogona, które nie nadaje się do celów iniekcyjnych.

Teraz, gdy omówiliśmy tło, nauczmy się procedur, zaczynając od zastrzyków SC. W przypadku myszy chwyć zwierzę za ogon i pozwól mu odpocząć na innej bezpiecznej powierzchni, takiej jak pokrywa z drucianych prętów. Następnie ręcznie skrępuj zwierzę, unosząc skórę wokół szyi, tworząc namiot. Następnie połóż zwierzę na stole tak, aby tylne łapy opierały się o powierzchnię i oprzyj piętę dłoni na stole, aby uniknąć nadmiernego obciążenia zwierzęcia, które może utrudnić oddychanie.

Aby wykonać wstrzyknięcie, należy podnieść strzykawkę z roztworem, który ma być wstrzyknięty, i skierować igłę równolegle do kręgosłupa i z dala od głowy, aby uniknąć możliwości nakłucia czaszki. Następnie włóż igłę skosem skierowanym do góry, co pozwala na delikatne wślizgiwanie się w skórę. Odciągnąć tłok, aby sprawdzić, czy igła jest prawidłowo umieszczona. Jeśli po odciągnięciu tłoka występuje przeciwciśnienie, oznacza to, że igła znajduje się we właściwej pozycji. Jeśli powietrze zostanie zassane do tłoka, konieczne będzie przemieszczenie igły.

Po upewnieniu się, że igła jest prawidłowo umieszczona, należy wstrzykiwać powoli, równomiernym ruchem. Po wstrzyknięciu należy zrobić przerwę i lekko obrócić igłę pod skórą, aby zapobiec utracie przedmiotu do wstrzykiwań. Następnie należy uszczypnąć skórę w miejscu wstrzyknięcia i wyjąć igłę. Ta sama metoda może być stosowana u szczurów odsadzonych od piersi.

W przypadku dorosłych szczurów najpierw zwierzę musi zostać skrępowane za pomocą urządzenia, którego procedura została omówiona w filmie "Podstawy obchodzenia się z nim i krępowania" z tej kolekcji. Następnie można wykonać wstrzyknięcie SC w taki sam sposób, jak u myszy.

Następnie dowiemy się, jak wykonać wstrzyknięcie adresu IP. U myszy użyj techniki krępowania oburęcznego, aby ręcznie przytrzymać zwierzę, ponownie opisanej w filmie "Podstawy obsługi i krępowania". Upewnij się, że twoja niedominująca ręka jest umieszczona wystarczająco wysoko na szyi, aby zapobiec obracaniu się zwierzęcia. Ustabilizuj kończyny tylne, umieszczając ogon między trzecim a czwartym palcem lub mocno przypinając skórę między pozostałymi palcami a podstawą kciuka.

Następnie ustaw zwierzę tak, aby odsłoniło brzuch. Przechylić zwierzę z głową skierowaną w dół na 30? kąt, aby jelita mogły opadać do przodu. Punkt orientacyjny wstrzyknięcia można narysować w następujący sposób: narysuj wyimaginowaną linię, która rozciąga się poziomo w poprzek ciała, w górnej części biodra, od boku do boku. Następnie narysuj granicę przyśrodkową lub linię środkową wzdłuż linii, w której spotykają się włosy rosnące w przeciwnych kierunkach. Na koniec wyobraź sobie boczną granicę, która jest linią od góry bioder do napletka u mężczyzn i podążającą za strzykami u samic. Zapewnia to trójkątny obszar do bezpiecznego wstrzykiwania IP.

Następną metodą, którą omówimy, jest wstrzyknięcie IM. Unieruchomienie w tej technice zarówno dla myszy, jak i szczurów wymaga albo dwóch osób, albo użycia rurki przytrzymującej. Tutaj opiszemy metodę jednoosobową z wykorzystaniem urządzenia krępującego.

Najpierw umieść zwierzę w rurze i wyciągnij tylne nogi na zewnątrz, pociągnij ogon, aby ustawić zwierzę. Następnie chwyć skórę boku w czaszkowej części kości udowej, aby wyprostować nogę i zapobiec zgięciu kolana. Następnie ustawić urządzenie przytrzymujące w taki sposób, aby umożliwić wizualizację miejsca wstrzyknięcia.

Aby zidentyfikować punkt orientacyjny pośladków, zlokalizuj masę mięśni pośladkowych za kością udową. Kość można wyczuć palpacyjnie, a duży mięsień jest łatwo wyczuwalny. Zwróć uwagę na linię środkową, która biegnie od punktu stawu skokowego do ogona. Często można zobaczyć grzbiet, w którym włosy z powierzchni bocznej i wewnętrznej łączą się, rosnąc w przeciwnych kierunkach. Zazwyczaj, zastrzyki są wykonywane w kierunku bocznego aspektu poza linią środkową. Mięsień brzuchaty łydki to mięsień łydki, a wstrzyknięcie do tego mięśnia najlepiej wykonywać również od strony tylnej.

W przypadku mięśnia pośladkowego, w miejscu znajdującego się punktu orientacyjnego, wbij igłę na maksymalną głębokość około 5 mm. Należy unikać zmiany położenia strzykawki podczas wstrzyknięcia, aby zapobiec uszkodzeniu mięśni. Następnie zaaspiruj, aby upewnić się, że umieszczenie znajduje się w mięśniu, a nie w naczyniu krwionośnym. I na koniec, wstrzyknij materiał powoli i równomiernie, ponieważ szybkie wstrzyknięcie spowoduje uraz tkanki. Wyjąć igłę prostopadle, podążając tą samą drogą, którą ma miejsce wkłucia. W przypadku mięśnia brzuchatego łydki należy wprowadzić igłę na maksymalną głębokość 3 mm i wykonać wstrzyknięcie w taki sam sposób, jak w przypadku mięśnia pośladkowego.

Na koniec dowiedzmy się, jak wykonać wstrzyknięcie dożylne w żyły ogonowe gryzoni. Ta sama metoda ma zastosowanie zarówno dla myszy, jak i szczurów.

Umieść zwierzę w cylindrycznej rurce przytrzymującej i ogrzej całe ciało zwierzęcia za pomocą elektrycznej poduszki grzewczej ustawionej na MEDIUM na około 2-5 minut. Kontynuuj ogrzewanie zwierzęcia, aż naczynia krwionośne ulegną rozszerzeniu, czyli zauważalnie większemu. Pamiętaj, że boczne żyły ogonowe ogona znajdują się po bokach ogona. Tętnica, która znajduje się w brzusznej linii środkowej, nie nadaje się do celów iniekcyjnych. Obrócić urządzenie przytrzymujące i ustawić ogon w taki sposób, aby boczne żyły ogonowe były skierowane do góry i utrzymywane w napięciu. Nie należy stosować nadmiernego napięcia, ponieważ naczynie może zostać rozciągnięte, a przepływ krwi zmniejszony.

Umieść igłę skośnie bezpośrednio nad naczyniem krwionośnym tak dystalnie, jak to możliwe, i lekko dociśnij, aby wsunąć igłę w ogon równolegle do kręgosłupa. Wstrzyknij materiał powolnym, płynnym ruchem i zauważ, że naczynie blednie, gdy krew jest wypychana przez materiał do wstrzykiwań. Jeśli igła nie zostanie prawidłowo umieszczona w naczyniu, podczas wstrzykiwania wystąpi duży opór, a jeśli wstrzykniesz z siłą, materiał wypełni przestrzeń podskórną, a ogon będzie balonował. Należy natychmiast przerwać działanie, ponieważ materiał przeznaczony do wstrzykiwania dożylnego może działać żrąco na otaczające tkanki. Wyjąć igłę i podjąć kolejną próbę wstrzyknięcia, bardziej czaszkowo w ogon. Po udanym wstrzyknięciu należy wyjąć igłę i przyłożyć ucisk do miejsca wstrzyknięcia, aby zapewnić dobrą hemostazę przed powrotem zwierzęcia do klatki.

Teraz, gdy jesteś już zaznajomiony z typowymi metodami wstrzykiwań, przyjrzyjmy się niektórym zastosowaniom tych dróg podawania, innym niż dostarczanie leków.

W kilku eksperymentach myszom wstrzykuje się określony patogen w celu zbadania infekcji. W tym przypadku naukowcy wykorzystali drogę podskórną do wprowadzenia bakterii opornych na antybiotyki, które powodują zmiany chorobowe, a rozmiar tych zmian posłużył jako odczyt zjadliwości patogenu. Różni naukowcy są zainteresowani badaniem dystrybucji i przeżycia komórek macierzystych po dostarczeniu ogólnoustrojowym. W tym badaniu badacze przeprowadzili wstrzyknięcie do żyły ogonowej genetycznie oznakowanych nerwowych komórek macierzystych w modelu zwierzęcym stwardnienia rozsianego i zlokalizowali rozmieszczenie wstrzykniętych komórek w rdzeniu kręgowym i obszarach mózgu.

W innym eksperymencie naukowcy wstrzyknęli domięśniowo znakowane fluorescencyjnie mioblasty w zwierzęcy model dystrofii mięśniowej. Następnie przeprowadzono bioluminescencję, aby przeanalizować udaną implantację komórek macierzystych. Wreszcie, zastrzyki mogą być również wykorzystywane do generowania modeli zwierzęcych. Naukowcy przeprowadzili dootrzewnowe wstrzyknięcie dimetylonitrozoaminy - silnej toksyny wątrobowej - samcom szczurów rasy Wistar, aby wygenerować zwierzęcy model zwłóknienia wątroby, który następnie został wykorzystany do zbadania rozwoju choroby wątroby.

Właśnie obejrzałeś pierwszy odcinek JoVE na temat podawania związków, omawiający powszechnie stosowane zastrzyki pozajelitowe. Pamiętaj, że optymalna trasa dostarczania zależy od kilku czynników, w tym pH, objętości i lepkości wstrzykiwanego roztworu. Każda technika ma zalety i wady, które należy rozpatrywać w odniesieniu do potrzeb eksperymentalnych. Jak zawsze, dziękujemy za oglądanie!