Name: Określanie progu ciepła i bólu mechanicznego w stanie zapalnym skóry ludzi (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-01-14T00:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 21 s
Description: Poznaj metody oceny progu bólu cieplnego i mechanicznego u ludzi w stanie zapalnym skóry. Protokoły te pozwalają badaczom analizować przetwarzanie nocyceptywne przez włókna nerwowe C i A-delta.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Badanie bólu wywołanego ciepłem z użyciem termostymulatora TSA II
1. Wstęp
<ol>
<li>W tej procedurze wykorzystuje się analizator termoczujnikowy TSA II, dostępny w sprzedaży komercyjnej, który dostarcza bodźce cieplne do skóry za pomocą termody (Medoc Advanced Medical Systems, Durham, NC). Jednostka centralna generuje sygnał i przesyła go do termody. Sygnał ten jest sterowany przez dedykowane oprogramowanie, zazwyczaj zainstalowane na laptopie połączonym z jednostką centralną. Do jednostki centralnej przymocowany jest również ręczny sterownik, który pozwala badanemu na przerwanie nagrzewania termody.</li>
<li>Podawanych jest siedem sekwencyjnych i identycznych bodźców cieplnych z 30s odstępami między bodźcami. Bazowa temperatura termody jest ustawiona na komfortowy poziom 35ºC. Szybkość nagrzewania termody wynosi 1ºC/s, natomiast szybkość chłodzenia jest ustawiona na 10ºC/s. Maksymalna temperatura termody jest ustawiona na 52ºC.</li>
</ol>
2. Przygotowanie i szkolenie obiektów
<ol>
<li>Aby przygotować badanych do testu bólu termicznego, należy ich wygodnie posadzić w fotelu z funkcją odchylania, który zapewnia odpowiednie wsparcie dla głowy, ramion i nóg. Fotel powinien również umożliwiać łatwy dostęp do badanych obszarów ciała.</li>
<li>W pomieszczeniu testowym powinna panować komfortowa temperatura pokojowa oraz ciche i neutralne środowisko, wolne od rozpraszaczy.</li>
<li>Przed rozpoczęciem eksperymentu wszyscy uczestnicy powinni zostać odpowiednio przeszkoleni we wszystkich aspektach testu bólu termicznego. Szkolenie może odbyć się w dowolnym czasie przed eksperymentem.</li>
<li>Interakcje między badanymi a badaczami powinny być ograniczone do tych niezbędnych do zbierania danych. Odradza się żarty i niezobowiązujące rozmowy, ponieważ mogą one wpłynąć na spójność danych. Badani są informowani, że podczas eksperymentów interakcje będą celowo nieco monotonne i neutralne.</li>
<li>Instrukcje powinny być jasne, proste i spójne. Należy podkreślić, że ból jest subiektywny i nie ma prawidłowych ani błędnych odpowiedzi. Najważniejsza jest spójność. Próg bólu termicznego należy zdefiniować jako punkt pomiędzy odczuciem „prawie bolesnym” a „właśnie stało się bolesne”.</li>
<li>Kluczowe jest, aby badany dokładnie wiedział, czego spodziewać się podczas sesji testowej. Wszelkie „niespodzianki” mogą skutkować mniejszą spójnością danych, ponieważ mogą pojawić się czynniki zakłócające, takie jak lęk. Na przykład, jeśli do wyznaczenia progu bólu termicznego używa się siedmiu bodźców cieplnych, badany powinien o tym wiedzieć.</li>
<li>W dowolnym momencie badany może przerwać dalszy wzrost temperatury termody, naciskając przycisk w ręcznym kontrolerze. Możliwość kontroli zredukuje lęk badanego i sprawi, że dane będą bardziej wiarygodne.</li>
<li>Sesja szkoleniowa daje możliwość oceny wyników badanego. Najlepiej przeszkolić badanych podczas od dwóch do czterech cykli testowych, tak aby ich indywidualne progi bólu różniły się nie więcej niż o 0.8°C, a idealnie nie więcej niż o 0.6°C między dwoma ostatnimi cyklami. Osoby, które nie wykazują spójnych wyników, są zazwyczaj wykluczane z badania.</li>
</ol>
3. Wyznaczanie progu bólu
<ol>
<li>Aby rozpocząć cykle testowania progu bólu, zaznaczyć miejsce przyłożenia termody na skórze badanego. W tym eksperymencie testem bólu zostanie objęta ta sama zapalna zmiana skórna, która służyła do mikrodializy, aby zbadać substancje biochemiczne uwalniane w odpowiedzi na testy bólu.</li>
<li>Następnie rozpocząć każdy cykl, przykładając termodę do zaznaczonego obszaru skóry. Należy jak najdokładniej dopasować pozycję termody do zaznaczeń. Pozostawić temperaturę między skórą a termodą do czasu wyrównania do 35°C – jest to temperatura, która w bezpieczny sposób nie wywoła bólu. Zajmie to około 5 sekund, co zostanie zasygnalizowane odczytem 35°C na ekranie komputera.</li>
<li>Przed rozpoczęciem przekazać badanemu ręczny kontroler.</li>
<li>Podczas testowania należy stosować stały i delikatny nacisk, aby cała powierzchnia termody pozostawała w pełnym kontakcie ze skórą badanego.</li>
<li>Następnie uruchomić zaprogramowany algorytm testowy. Termoda zacznie nagrzewać się w tempie 1°C/s. Gdy tylko badany poczuje ból, naciśnie urządzenie ręczne.</li>
<li>Po naciśnięciu przycisku na urządzeniu ręcznym temperatura termody wywołująca ból zostanie automatycznie zarejestrowana, a następnie zacznie spadać w tempie 10°C/s aż do temperatury bazowej 35°C.</li>
<li>Sonda temperatury będzie automatycznie utrzymywana w 35°C przez 30 s, zanim temperatura ponownie zacznie rosnąć w tempie 1°C/s, aż do momentu ponownego naciśnięcia przycisku urządzenia ręcznego przez badanego. Tuż przed ponownym wzrostem temperatury termody należy przypomnieć badanemu, że zaraz to nastąpi. Pozwoli to badanemu zachować koncentrację.</li>
<li>Sekwencja ta będzie powtarzana do momentu zarejestrowania siedmiu odczytów temperatury. Należy obliczyć średnią z tych odczytów temperatury; jest to próg bólu termicznego.</li>
</ol>
Mechaniczne badanie bólu z wykorzystaniem punktowych sond nacisku
1. Wprowadzenie
<ol>
<li>Stosujemy wykonane na zamówienie, skalibrowane sondy naciskowe z punktowym punktem styku, ponieważ zapewniają one bardziej powtarzalne wyniki niż tradycyjnie używane i dostępne komercyjnie włókna von Frey. Sondy wykonane są z identycznych cylindrycznych drutów ze stali nierdzewnej (średnica 240 μm) zamontowanych na miedzianych prętach o różnych masach (1, 2, 4, 8, 16, 32, 49, 64 i 81 gramów), które swobodnie poruszają się wewnątrz szerszej, trzymanej w ręku rurki aluminiowej.</li>
<li>Te same ogólne warunki eksperymentalne, opisane dla testów bólu termicznego, mają zastosowanie do testów bólu mechanicznego. Badani powinni być odpowiednio przygotowani i przeszkoleni. Szczególnie ważne jest zapewnienie badanych, że sondy są tępe i nie przebiją skóry. Pomoże to osobom badanym zrelaksować się i dostarczyć spójne dane.</li>
</ol>
2. Wyznaczanie mechanicznego progu bólu
<ol>
<li>Aby wyznaczyć mechaniczny próg bólu, należy najpierw przyłożyć stalową końcówkę najlżejszej sondy prostopadle do skóry w centrum eksperymentalnie wywołanego stanu zapalnego zmiany.</li>
<li>Następnie trzymaną w ręku aluminiową rurkę należy opuścić w stronę skóry, nie dotykając jej. W ten sposób cała waga miedzianego pręta znajdującego się wewnątrz aluminiowej rurki spoczywa na stalowej końcówce sondy.</li>
<li>Badany wskazuje następnie, czy sonda wywołuje ból, odpowiadając „tak” lub „nie”.</li>
<li>Jeśli badany odpowie „nie”, należy użyć tej samej sondy lub kolejnej, cięższej. Algorytm ten nazywa się sekwencją stymulacji wznoszącej. Należy losowo określić, czy następna sonda będzie cięższa, czy o tej samej wadze, aby badany nie znał algorytmu.</li>
<li>Sondy należy stosować w sekwencji wznoszącej, dopóki badany nie odpowie „tak”. Średnią wagę dwóch ostatnich sond w tej serii zapisuje się jako pierwszy punkt zwrotny.</li>
<li>Po odpowiedzi „tak” należy rozpocząć sekwencję stymulacji zstępującej, używając sondy lżejszej lub tej samej co poprzednio. Należy losowo określić, czy następna sonda będzie lżejsza, czy o tej samej wadze, aby badany nie znał algorytmu.</li>
<li>Sondy należy stosować w sekwencji zstępującej, dopóki badany nie odpowie „nie”. Średnia waga dwóch ostatnich sond w tej sekwencji stanowi drugi punkt zwrotny.</li>
<li>Gdy badany odpowie „nie”, należy powrócić do sekwencji stymulacji wznoszącej. Należy naprzemiennie stosować sekwencje wznoszące i zstępujące, aż do zarejestrowania siedmiu punktów zwrotnych. Średnia z tych siedmiu punktów stanowi mechaniczny próg bólu.</li>
</ol>

<ol><li>Angst, M. S., Clark, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comment+on+Koltzenburg+et+al.%3A+Differential+sensitivity+of+three+experimental+pain+models+in+detecting+the+analgesic+effects+of+transdermal+fentanyl+and+buprenorphine%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Comment on Koltzenburg et al.: Differential sensitivity of three experimental pain models in detecting the analgesic effects of transdermal fentanyl and buprenorphine.</a> Pain. 126, 165-174 (2006).</li>
<li>Angst, M. S., Clark, J. D., Carvalho, B., Tingle, M., Schmelz, M., Yeomans, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokine+profile+in+human+skin+in+response+to+experimental+inflammation%2C+noxious+stimulation%2C+and+administration+of+a+COX-inhibitor%3A+A+microdialysis+study%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Cytokine profile in human skin in response to experimental inflammation, noxious stimulation, and administration of a COX-inhibitor: A microdialysis study.</a> Pain. , (2008).</li>
<li>Angst, M. S., Koppert, W., Pahl, I., Clark, J. D., Schmelz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short-term+infusion+of+the+mu-opioid+agonist+remifentanil+in+humans+causes+hyperalgesia+during+withdrawal%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Short-term infusion of the mu-opioid agonist remifentanil in humans causes hyperalgesia during withdrawal.</a> Pain. 106, 49-57 (2003).</li>
<li>Lotsch, J., Angst, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mu-opioid+agonist+remifentanil+attenuates+hyperalgesia+evoked+by+blunt+and+punctuated+stimuli+with+different+potency%3A+a+pharmacological+evaluation+of+the+freeze+lesion+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">The mu-opioid agonist remifentanil attenuates hyperalgesia evoked by blunt and punctuated stimuli with different potency: a pharmacological evaluation of the freeze lesion in humans.</a> Pain. 102, 151-161 (2003).</li>
</ol>

W niniejszym filmie przedstawiono algorytmy oceny progu bólu cieplnego i mechanicznego w zapalnej skórze ochotników. Odczuwanie bólu jest subiektywne. Gromadzenie wiarygodnych danych dotyczących bólu wymaga odpowiednich warunków testowych (np. ciszy i komfortu), gruntownego przeszkolenia uczestników badania z wbudowanymi środkami kontroli jakości danych (niezawodność test-retest), ścisłego przestrzegania zestandaryzowanego protokołu badania oraz unikania czynników zakłócających (np. stresu, lęku). Rzetelne subiektywne dane o wrażliwości na ból, połączone z interwencjami, takimi jak podanie leku przeciwbólowego, oraz gromadzeniem danych mechanistycznych, np. lokalnym uwalnianiem mediatorów nocyceptywnych, dostarczają cennych informacji na temat mechanizmów bólu oraz sposobów jego zapobiegania lub łagodzenia.

<table><tbody><tr><td>Analizator neurosensoryczny TSA-II</td><td>Narzędzie</td><td>Medoc Advanced Medical Systems</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sondy do badania punktowego nacisku</td><td>Narzędzie</td><td>Wykonane na zamówienie</td><td></td><td>Alternatywnie można zastosować dostępne komercyjnie włókna von Freya.</td></tr></tbody></table>

wyznaczanie progu bólu termicznego i mechanicznego w zapaleniu skóry u ludzi

Determining heat and mechanical pain threshold in inflamed skin of human subjects

W poprzednim artykule w Journal of Visualized Experiments zaprezentowaliśmy techniki mikrodializy skóry służące do pobierania specyficznych dla tkanki substancji biochemicznych odpowiedzialnych za nocycepcję i procesy zapalne u ludzi. W niniejszym artykule przedstawimy paradygmaty testowania bólu, które są często stosowane równocześnie z procedurami mikrodializy. Połączenie testów bólu z mikrodializą zapewnia kluczowe powiązanie między danymi behawioralnymi a biochemicznymi, co pozwala na zidentyfikowanie głównych substancji biochemicznych odpowiedzialnych za powstawanie i propagację bólu.
Przedstawiono dwa modele wywoływania bólu w zapalnej skórze uczestników badania. Pierwszy model wywołuje ból za pomocą bodźców termicznych. Ból wywołany ciepłem, opisany w tym miejscu, jest przekazywany głównie przez małe, niepochodzące z mieliny obwodowe włókna nerwowe nocyceptywne (włókna C). Drugi model wywołuje ból poprzez punktowe bodźce uciskowe. Ból wywołany punktowym uciskiem jest przekazywany głównie przez małe, zmielinizowane obwodowe włókna nerwowe nocyceptywne (włókna A-delta). Oba modele różnią się pod względem mechanistycznym i niezależnie badają przetwarzanie nocyceptywne przez dwie główne populacje obwodowych włókien nerwowych zaangażowanych w przesyłanie sygnałów bólowych.
Ból cieplny jest wywoływany za pomocą TSA II, dostępnego komercyjnie analizatora termoczujnego (Medoc Advanced Medical Systems, Durham, NC). Konfiguracja i dostarczanie bodźców są obsługiwane przez specjalistyczne oprogramowanie. Termody różnią się rozmiarem i kształtem, lecz zasadniczo składają się z metalowej płytki, którą można nagrzewać lub chłodzić z różną prędkością i przez różny czas. Algorytmy oceniające ból wywołany ciepłem są zróżnicowane. Wtórnie w przedstawionych tutaj eksperymentach uczestnicy badania są proszeni o wskazanie momentu, w którym zaczynają odczuwać ból, podczas gdy termoda w kontakcie ze skórą jest nagrzewana z określoną prędkością, zaczynając od temperatury, która nie wywołuje bólu. Temperatura termody, przy której badany zaczyna odczuwać ból, stanowi próg bólu cieplnego.
Ból mechaniczny wywołuje się za pomocą sond punktowych. Takie sondy są dostępne komercyjnie od kilku producentów (włoski von Freya). Jednakże dokładność włosów von Freya była krytykowana, dlatego wielu badaczy stosuje wykonane na zamówienie sondy do pomiaru nacisku punktowego. W przedstawionych tutaj eksperymentach stosuje się kolejno osiem wykonanych na zamówienie sond punktowych o różnych wagach – procedura ta nazywana jest algorytmem up-down – w celu zidentyfikowania punktów przełączenia percepcyjnego, czyli przejścia od braku odczuwania bólu do odczuwania bólu lub odwrotnie. Średnia waga powodująca przełączenie percepcyjne stanowi próg bólu mechanicznego.

Przedstawiono algorytmy oceniające progi bólu cieplnego i mechanicznego w eksperymentalnie wywołanym stanie zapalnym skóry u badanych ludzi. Dwa paradygmaty testowania bólu niezależnie badają przetwarzanie nocyceptywne przez dwie główne populacje obwodowych włókien nerwowych przekazujących ból, tj. nieumielinowane włókna C oraz małe umielinowane włókna A-delta.

Wyznaczanie progu bólu termicznego i mechanicznego w zapaleniu skóry u ludzi

W poprzednim artykule w Journal of Visualized Experiments zaprezentowaliśmy techniki mikrodializy skóry do pobierania specyficznych dla tkanki...

Niniejszy film prezentuje dwa protokoły badania bólu. Pierwszy model polega na przykładaniu ciepła do skóry w celu wywołania bólu. W tym teście badani są poddawani działaniu stopniowo zwiększanych temperatur za pomocą urządzenia Ther-Mode i proszeni są o wskazanie momentu, w którym poczuli ból.Temperaturą w trybie termicznym, w momencie gdy staje się ona bolesna, jest próg bólu termicznego. Drugi model wywołuje ból za pomocą nacisku mechanicznego. W tym przypadku do badanego przykładane są sondy o różnej wadze, a badany wskazuje, kiedy sonda staje się wystarczająco ciężka, aby wywołać ból.Te dwa paradygmaty badania bólu pozwalają na niezależną analizę przetwarzania nocyceptywnego przez dwie główne populacje obwodowych włókien nerwowych przewodzących ból: niezmielinizowane włókna C, które wykrywają piekący ból termiczny, oraz zmielinizowane włókna a delta, które wykrywają ostry ból mechaniczny. Witam, nazywam się Martin Angst i reprezentuję Katedrę Anestezjologii Uniwersytetu Stanforda.W poprzednim artykule opublikowanym w Journal of Visualized Experiments udokumentowaliśmy zastosowanie technik mikrodializy do tkankowo specyficznego pobierania substancji biochemicznych związanych z nocycepcją i zapaleniem u ochotników. Dzisiaj zaprezentujemy paradygmaty testowania bólu, których często używamy równolegle z technikami mikrodializy. Połączone stosowanie paradygmatów testowania bólu i technik mikroanalizy stanowi kluczowe ogniwo łączące dane behawioralne i biochemiczne, co pozwala nam na identyfikację substancji biochemicznych odpowiedzialnych za generowanie i propagowanie sygnałów bólowych.Zacznijmy zatem. W tej procedurze wykorzystano urządzenie TSA 2, dostępny w sprzedaży analizator termiczno-sensoryczny, który dostarcza bodźce cieplne do skóry. Za pomocą termometru jednostka centralna generuje i przesyła sygnał do termody.*Sygnał ten jest sterowany przez specjalistyczne oprogramowanie, zazwyczaj zainstalowane na laptopie podłączonym do jednostki centralnej. Do jednostki centralnej przymocowany jest również pilot sterujący, który umożliwia badanemu przerwanie ogrzewania termody. Podawanych jest siedem sekwencyjnych bodźców cieplnych z 30-sekundowymi odstępami między nimi.Podstawowa temperatura termostatu została ustawiona na komfortowe 35 °C. Szybkość nagrzewania termostatu została ustawiona na 1 °C na sekundę. Szybkość chłodzenia została ustawiona na 10 °C na sekundę, natomiast maksymalna temperatura termostatu została ustalona na 52 °C.Aby przygotować badanych do testu bólu termicznego, należy posadzić ich wygodnie w fotelu półleżącym, który zapewnia odpowiednie podparcie dla głowy, ramion i nóg. I proszę usiąść wygodnie. Czy chciałaby Pani kocyk? Tak. Dziękuję. Kocyk. Dobrze. Fotel powinien również umożliwiać łatwy dostęp do badanych obszarów ciała.Pomieszczenie badawcze powinno mieć komfortową temperaturę pokojową oraz zapewniać ciche i neutralne środowisko, wolne od rozpraszaczy przed rozpoczęciem eksperymentu. Wszyscy uczestnicy powinni zostać odpowiednio przeszkoleni we wszystkich aspektach badania. Szkolenie z zakresu testowania bólu może odbyć się w dowolnym momencie przed rozpoczęciem eksperymentu.Interakcje pomiędzy badanymi a badaczami powinny być ograniczone do tych niezbędnych do gromadzenia danych. Odradza się żarty i niezobowiązujące rozmowy, ponieważ mogą one negatywnie wpłynąć na spójność danych. Badani zostają poinformowani, że interakcje będą celowo w pewnym stopniu monotonne i neutralne.Podczas eksperymentów. Instrukcje powinny być jasne, proste i spójne. Podkreśl, że ból jest subiektywny i nie ma odpowiedzi prawidłowych ani błędnych.Najważniejsze jest zachowanie spójności. Przeprowadzimy dzisiaj testy bólu cieplnego i zależy nam na uzyskaniu bardzo powtarzalnych wyników. Chcielibyśmy, abyś potrafił wyraźnie zidentyfikować próg, czyli moment, w którym po raz pierwszy odczuwasz ból, aby Twoje odpowiedzi były w pełni spójne.Ważne jest, abyśmy zapewnili bardzo spokojne, ciche i niemal pozbawione bodźców otoczenie. Dobrze? Dlatego podczas całej procedury nie będziemy ze sobą rozmawiać. Nie będziemy mogli żartować ani rozmawiać o bieżącej polityce. Dobrze.Będziemy badać tylko stopę, skupiając całą naszą uwagę na samym teście bólu. Dobrze? Dobrze. I powtórzę, że dla nas bardzo ważne jest uzyskanie spójnych wyników. Jedynym sposobem, aby nam je zapewnić, jest utrzymanie środowiska w bardzo, bardzo spokojnym, mało interesującym i naprawdę dość nudnym stanie. Dobrze?Kluczowe jest, aby badany dokładnie wiedział, czego spodziewać się podczas sesji testowej. Wszelkie niespodzianki mogą prowadzić do mniej spójnych danych, ponieważ mogą powstać czynniki zakłócające, takie jak lęk; zdefiniuj próg bólu termicznego jako punkt między stanem „prawie bolesnym” a stanem „właśnie stał się bolesny”. Na przykład, jeśli do wyznaczenia progu bólu termicznego użyto siedmiu bodźców bólowych, badany powinien zostać o tym poinformowany.Zatem jak przebiega badanie? Będziemy mierzyć próg bólu cieplnego. Dobrze. Jest to punkt, w którym po raz pierwszy odczujesz ból. Zrozumiałe.Wykonanych zostanie siedem powtórnych ekspozycji. Dobrze. Między każdą z ekspozycji nastąpi 32-sekundowa przerwa. Dobrze. Sonda termiczna zostanie umieszczona na nodze.Zacznie się od komfortowej temperatury, która będzie stopniowo rosła do poziomów postrzeganych jako komfortowe, ciepłe, bardzo ciepłe, gorące i bardzo, bardzo gorące. Dobrze? W pewnym momencie nastąpi przejście od bardzo wysokiej temperatury do piekącego bólu. Gdy tylko poczuje Pan/Pani ten piekący ból, należy nacisnąć przycisk, a temperatura natychmiast spadnie do poziomu normalnego. Dobrze?Będzie to przerwa trwająca 32 s, która będzie się powtarzać. Dobrze? Dobrze. Ważne jest również, abyś wiedziała, że urządzenie jest tak ustawione, aby nie osiągnąć temperatury na tyle wysokiej, by faktycznie uszkodzić skórę. Zatem, choć możesz odczuwać piekący ból i będzie to sprawiać wrażenie, jakby skóra była przypalana, w rzeczywistości nie dojdzie do uszkodzenia tkanki.Zatem nie ma powodu do wahania. Nie musi Pan/Pani martwić się o zbyt wczesne naciśnięcie przycisku, nieco przed faktycznym odczuciem pierwszego impulsu bólu, ponieważ nie zostanie Pan/Pani zraniony/a. Och, dobrze. Dobrze.To istotna informacja. W dowolnym momencie badany może przerwać dalsze nagrzewanie termostatu, naciskając przycisk na pilocie sterującym. Możliwość sprawowania kontroli zredukuje lęk badanego i sprawi, że uzyskane dane będą bardziej wiarygodne.A jeśli będę mieć pytania dotyczące samego testowania, powinniśmy o nich porozmawiać teraz, czy zostawić je na później? Podczas szkolenia można zadawać pytania pomiędzy bodźcami. Dobrze. Kiedy będziemy faktycznie przeprowadzać badanie, nie będziemy mogli ze sobą rozmawiać. Dobrze.Dlatego ważne jest, aby szkolenie zostało przeprowadzone prawidłowo i abyśmy naprawdę zapoznali Pana/Panią z zakresem zadań. Dobrze. Następnie, podczas etapu zbierania danych w ramach badania, nie będziemy z Panem/Panią w ogóle rozmawiać. Dobrze? Dobrze. Myślę, że będę w stanie to zrobić.Dobrze, świetnie. Tak czy inaczej będziemy ćwiczyć. Sesja treningowa daje możliwość oceny wyników badanego obiektu.Najlepiej jest przeprowadzić szkolenie badanych podczas od dwóch do czterech cykli testowych, tak aby ich indywidualne progi bólu różniły się nie więcej niż o 0,8 °C, a idealnie nie więcej niż o 0,6 °C pomiędzy dwoma ostatnimi cyklami testowymi. Osoby, które nie wykazują spójnych wyników, są zazwyczaj wykluczane z badania.Bardzo dziękuję za dzisiejszą wizytę. Obawiam się, że nie będzie Pan/Pani mógł/mogła wziąć udziału w badaniu. Trudno jest zachować spójność w sposobie oceny bólu; niektórzy potrafią to robić, ale z jakiegoś powodu innym sprawia to dużą trudność. Dobrze.I po prostu nie byliśmy wystarczająco spójni, aby stanowić odpowiedniego kandydata do badania. Dobrze, dziękuję. Aby rozpocząć cykle testowania progu bólu, zaznacz miejsce przyłożenia termody na skórze badanego.W tym doświadczeniu ta sama zmiana zapalna skóry, która była wykorzystywana do mikrodializy, zostanie poddana testom bólowym. Aby zapoznać się z biochemicznymi odpowiedziami uwalnianymi w reakcji na testy bólowe, przed rozpoczęciem przekaż kontroler ręczny badanemu. Rozpocznij każdy cykl, przykładając termodę do zaznaczonego obszaru skóry, dopasowując położenie termody do oznaczeń jak najdokładniej.Stosuj stały i delikatny nacisk, aby cała powierzchnia termometru pozostawała w pełnym kontakcie ze skórą badanej osoby. W trakcie badania pozwól, aby temperatura między skórą a termometrem wyrównała się do 35°C, co jest temperaturą bezbolesną. Potrwa to około pięciu sekund i zostanie zasygnalizowane odczytem 35°C na ekranie komputera.Teraz należy uruchomić zaprogramowany algorytm testowy. Po 30 sekundach termometr rozpocznie nagrzewanie w tempie jeden stopień Celsjusza na sekundę. W momencie odczucia bólu badany naciśnie urządzenie ręczne.Po naciśnięciu przycisku temperatura termostatu zostanie automatycznie zarejestrowana i zacznie spadać w tempie 10 stopni Celsjusza na sekundę, aż do osiągnięcia temperatury bazowej 35 stopni Celsjusza. Sonda temperatury będzie automatycznie utrzymywana w 35 stopniach Celsjusza przez 30 sekund. Następnie temperatura zacznie ponownie rosnąć w tempie jednego stopnia Celsjusza na sekundę, aż do momentu ponownego naciśnięcia przycisku w urządzeniu przenośnym przez badanego.Poinformuj badanego, że temperatura termostatu za chwilę wzrośnie. Ponownie, pozwoli to utrzymać koncentrację badanego. Powtarzaj tę sekwencję, aż zarejestrowanych zostanie siedem pomiarów temperatury.Oblicz średnią z tych odczytów temperatury. Jest to próg bólu termicznego wywołujący ból mechaniczny. Zazwyczaj stosuje się punktowe sondy naciskowe, często nazywane włoskami von Freya.Są one przykładane do skóry, aż do momentu wygięcia się sondy. Chociaż włókna typu Von Frey są dostępne w sprzedaży, zaleca się stosowanie kalibrowanych sond do pomiaru nacisku punktowego wykonanych na zamówienie, ponieważ zapewniają one bardziej spójne wyniki. Sondy te są wykonane z identycznych cylindrycznych drutów ze stali nierdzewnej o średnicy 240 micronów.Są one zamocowane na miedzianych prętach o różnych masach, które swobodnie poruszają się wewnątrz szerszej, trzymanej w ręce aluminiowej rurki. W badaniu bólu mechanicznego zastosowane zostaną te same ogólne warunki eksperymentalne, co w przypadku testowania bólu termicznego. Podobnie przygotowanie i przeszkolenie badanych powinno odbywać się w ten sam sposób.Szczególnie ważne jest zapewnienie badanych, że sondy są tępe i nie przebiją skóry. Pomoże to badanym się rozluźnić i zapewni spójne dane. W celu wyznaczenia progu bólu mechanicznego.W pierwszej kolejności należy przyłożyć stalową końcówkę najlżejszej sondy prostopadle do skóry, w centrum eksperymentalnie wywołanej zmiany zapalnej. Następnie ręczną aluminiową rurkę opuszcza się w kierunku skóry, tak aby jej nie dotykać.W ten sposób cała waga pręta miedzianego wewnątrz opiera się na końcówce drutu stalowego. Następnie badany wskazuje, czy sonda wywołuje ból, odpowiadając tak lub nie. Jeśli badany odpowie nie, zostanie użyta kolejna, cięższa sonda.Algorytm ten nazywa się sekwencją stymulacji wstępującej. Stosuj bodźce w sekwencji wstępującej, dopóki badany nie odpowie twierdząco. Średnią wagę dwóch ostatnich bodźców w tej serii zapisuje się jako pierwszy punkt odchylenia po odpowiedzi twierdzącej badanego.Zacznij stosować malejącą sekwencję stymulacji, używając kolejnej lżejszej sondy. Stosuj sondy w sekwencji malejącej, dopóki badany nie odpowie przecząco. Średnia waga dwóch ostatnich sond w tej sekwencji stanowi drugi punkt przełomu; gdy badany odpowie przecząco, powróć do rosnącej sekwencji stymulacji. Przeplataj sekwencje rosnące i malejące aż do momentu zarejestrowania siedmiu punktów przełomu.Średnia z tych siedmiu punktów stanowi mechaniczny próg bólu. Algorytm ten można utrudnić poprzez losowe powtarzanie dowolnej sondy, która została właśnie użyta w sekwencji wstępującej lub zstępującej. Może to pomóc w utrzymaniu ślepej próby u badanego w kwestii wyboru kolejnej sondy.Przedstawiliśmy właśnie dwa paradygmaty testowania bólu: jeden z wykorzystaniem ciepła, a drugi z wykorzystaniem siły mechanicznej. Podczas wykonywania tych procedur ważne jest, aby badani mieli świadomość, że zawsze kontrolują natężenie zadawanego bólu i że to od nich zależy, co zostanie uznane za bolesne, a co nie. To wszystko.Dziękujemy za oglądanie i życzymy powodzenia w przeprowadzaniu eksperymentów.

determining-heat-mechanical-pain-threshold-inflamed-skin-human

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Określanie progu ciepła i bólu mechanicznego w stanie zapalnym skóry ludzi

Przedstawiono technikę pobierania in-vivo próbek płynu śródmiąższowego z odpowiednich miejsc w tkankach (w tym przypadku z eksperymentalnie wywołanego stanu zapalnego skóry) w celu pomiaru substancji biochemicznych pośredniczących w bólu i zapaleniu.

Ludzki bioanaliza in vivo do tkankowo swoistego pomiaru mediatorów nocyceptywnych i zapalnych

Przedstawiono testy rozlanego hamującego kontroli nocyceptywnej, sumowania czasowego oraz hiperalgezji ran u pacjentek położniczych. Testy te oceniają hamujące i pobudzające mechanizmy przetwarzania bólu i są tutaj wykorzystywane do oceny endogennej analizji w różnych momentach ciąży oraz w okresie okołoporodowym, aby pomóc w określeniu indywidualnego ryzyka wystąpienia bólu przewlekłego.

Paradygmat eksperymentalny do przewidywania bólu pooperacyjnego (PPOP)

W niniejszym opracowaniu opisujemy szybką, niezawodną i prostą procedurę określania najniższej temperatury, przy której szczury lub myszy wykazują zachowania nocyfencyjne, t. j. na próg termicznej nocycepcji (TNT). Metoda ta wykorzystuje powoli zwiększający się bodziec termiczny, co pozwala na precyzyjną i powtarzalną ocenę TNT przy minimalnym lub żadnym stresie dla zwierząt.

Szybkie oznaczanie progu termicznej nocycepcji u szczurów z cukrzycą

Elektroniczne pomiary von Freya są skuteczną i ulepszoną alternatywą dla klasycznych filamentów von Freya, ponieważ pozwalają na szybki i precyzyjny pomiar zmian w progach mechanicznego wycofywania gryzoni do stale stosowanych bodźców ciśnieniowych przed i po zdarzeniu zapalnym.

Pomiar zmian wrażliwości dotykowej w tylnej łapie myszy za pomocą elektronicznego aparatu von Freya

Modele ludzkiego bólu są cennymi narzędziami używanymi do oceny potencjału przeciwbólowego nowych związków i przewidywania ich skuteczności klinicznej, zwłaszcza gdy są używane w sposób zintegrowany. Chociaż implementacja tych modeli jest złożona, przy prawidłowym wykonaniu, modele bólu opisane w tym protokole mogą zapewnić przewidywalne i wiarygodne wyniki.

Określanie progów wykrywania bólu i tolerancji za pomocą zintegrowanej, multimodalnej baterii do zadań bólowych

Celem tej procedury jest zademonstrowanie zestawu technik ilościowych do pomiaru czucia i bólu u ludzi. Opisany sprzęt i techniki są powszechnie spotykane w klinikach leczenia bólu lub są łatwe do zdobycia.

Protokół testów manualnych do pomiaru czucia i bólu u ludzi

Oceniając ból w odpowiedzi na powtarzające się lub różne rodzaje standardowych bodźców, dynamiczne ilościowe testy sensoryczne (QST) mogą ujawnić zmiany w centralnym przetwarzaniu bólu. Przedstawiamy metody optymalizacji i indywidualizacji dwóch dynamicznych miar QST: sumowania czasowego (TS) i modulacji bólu warunkowego (CPM).

Dynamiczne ilościowe testy sensoryczne w celu scharakteryzowania przetwarzania bólu ośrodkowego

Ten artykuł skupia się na eksperymentalnym wywoływaniu bólu za pomocą stymulacji cieplnej (termicznej) i elektrycznej, rejestrując jednocześnie reakcje fizjologiczne, wzrokowe i parajęzykowe. Ma na celu zebranie ważnych danych multimodalnych do analizy bólu w oparciu o jego intensywność, jakość i czas trwania.

Sygnały multimodalne do analizy reakcji bólowych na bodźce termiczne i elektryczne

Dostarczony jest tutaj protokół, który szczegółowo opisuje kroki prowadzące do stworzenia zwierzęcego modelu przewlekłego bólu po niedokrwieniu (CPIP). Jest to dobrze rozpoznawalny model naśladujący ludzki złożony zespół bólu regionalnego typu I. Dalej oceniane są nadwrażliwości mechaniczne i termiczne, a także zachowania nocyfensywne wywołane kapsaicyną obserwowane w modelu szczurzym CPIP.

Model przewlekłego bólu po niedokrwieniu złożonego zespołu bólu regionalnego typu I u szczurów

Aby opracować nowatorskie interwencje terapeutyczne w celu zapobiegania i leczenia bólu pleców, potrzebne są modele zwierzęce, które zbadają mechanizmy i skuteczność tych terapii z perspektywy translacyjnej. Niniejszy protokół opisuje test BMS, znormalizowaną metodę oceny wrażliwości mechanicznej pleców u szczura.

Ocena wrażliwości mechanicznej pleców u szczura do mechanistycznego badania przewlekłego bólu pleców

Tutaj prezentujemy zmodyfikowany model bólu zapalnego z wstrzyknięciem karagenu zarówno tylnej łapy, jak i w celu oceny efektu przeciwbólowego.

Zmodyfikowany model bólu zapalnego do badania działania przeciwbólowego u myszy

Poznaj metody oceny progu bólu cieplnego i mechanicznego u ludzi w stanie zapalnym skóry. Protokoły te pozwalają badaczom analizować przetwarzanie nocyceptywne przez włókna nerwowe C i A-delta.

Wyznaczanie progu bólu termicznego i mechanicznego w zapaleniu skóry u ludzi

Przeglądaj więcej filmów