November 30th, 2006
Ten film i protokół mają pomóc nauki transfer jądra.
Robimy więc transfer jądrowy NU, ponieważ nasza grupa jest zainteresowana przeprogramowaniem. Jest to fascynujący proces, ponieważ zróżnicowane jądro można przeprogramować do stanu embrionalnego. Są to odczynniki SUM i HCCV, a to jest hialuronidaza.
I najpierw przygotowuję danie, z którego trafi do inkubatorów, aby zrównać się z CO2. To są krople, to kilka kropli dla Turinga, które pokryte olejem mineralnym. Kalibrują więc atmosferę CO2.
Teraz zrób upuść HCZB. Zostanie to użyte do prania. Jest to wysoki przez kilka dni i ponownie pokryty tym olejem mineralnym.
Ten haj, ten spada z hialuronidazą. Ta część tutaj to tylko krople HCCP. Są one przeznaczone do prania.
Służy to do usuwania komórek ulu ze strony O. Ten etap jest podgrzewany, więc będzie się nagrzewał, dopóki nie wrócę i nie zdobędę znaków oleju od myszy i nie pokryję wszystkiego olejem mineralnym. To tutaj są krople PVP do czyszczenia igły i do wkładania komórek, a to jest HCCB plus Cyla B. I tutaj dokonam manipulacji.
Okej, to jest kolor igły. To, co teraz robię, to wyciągam igłę. W porządku, teraz mam bardzo ładną igłę, bardzo cienką.
A teraz to jest mikro kuźnia. Muszę przeciąć igłę w określonej pozycji, aby mieć odpowiedni rozmiar pipety do trzymania. Podgrzewam szklaną kulę, schodzę na dół z igłą, która się do niej topi, a teraz jest rozbita.
Odpycham to. Widzisz, złamana igła jest idealna. Teraz schodzę tutaj, podkręcam temperaturę.
Teraz szklana kula zmieni kolor na czerwony, stopi się, popchnij szklaną kulę i to, tworzy krzywą. To wystarczy. Usuwam to.
Widzisz, a potem wkłuwam igłę. Właśnie zrobiliśmy pipetę przytrzymującą, która wkłada ją w tę głowicę. Teraz włóż go z powrotem do mikroskopu.
Mikropipeta, kapilara i napełniony rtęcią. Załadowałem go do tej końcówki. Rtęć obciąża tę kapilarnę tutaj rtęcią.
Wchodzi do środka. Ustaw igłę tutaj w tej głowie. Dokręć mocno, pociągnij do tyłu.
Obrócenie tutaj zgodnie z ruchem wskazówek zegara popchnie rtęć do przodu, abyś mógł ją zobaczyć. A teraz końcówka do oleju. Widzieć? Więc teraz przesuwam się w dół igły, aby uzyskać wizję.
Wyrzuć kilka kropelek rtęci i zassaj trochę QVP. W porządku. A następnie przesuń go ponownie w górę.
Podchodzę do HCCB i schodzę do. Głową przechodzę do P, czyli pipety myszy. Muszę przygotować kapilarę, aby wprowadzić go tutaj. Dzięki.Już.Dobrze.
Więc zrób trochę kapilary. Porządku. I w rurze. Ja jestem ley.
Pochodzę ze Szwajcarii i rozpocząłem tę pracę rok temu, a następnie przyjechałem do laboratorium K'S i zacząłem uczyć się transferu jądrowego. To naprawdę, jest tu wspaniałe miejsce i wspaniale się tu pracuje. I oczywiście jest to bardzo złożony eksperyment i podczas jego przeprowadzania może pojawić się wiele problemów.
Więc kiedy zaczynasz, możesz napotkać problemy, takie jak liza wielu komórek podczas zarodkowania lub podczas przenoszenia. Albo okazuje się, że nawet jeśli przeniesiesz się pomyślnie, nie rozwijają się. I zawsze jest, może być wiele powodów.
Chodzi mi o to, że możesz zacząć od systemu kultur wszystkich witryn. Tak więc zawsze potrzebne są jakieś kontrole, takie jak części kontroli genetycznej lub jacyś zapłodnieni cesarze, aby przetestować system hodowli, inkubatory. A potem musisz także poprawić umiejętności obsługi mikroskopu.
Więc po prostu potrzeba dużo praktyki, zanim będziesz w stanie niezawodnie ustawić stronę, a następnie przenieść się z powrotem. To tylko kwestia praktyki i zajmie nam to kilka tygodni lub miesięcy, zanim będziesz w tym dobry. A poza tym jest gotowy do długich eksperymentów.
Warto więc zarezerwować sobie na to cały dzień. A potem coś trudnego na początku to również pipetowanie myszką. Więc nie robić bąbelków, aby dobrze to kontrolować i nie stracić nadzoru, a zwłaszcza możesz również uszkodzić klona, szczególnie dlatego, że zewnętrzna warstwa, więc lucita jest otwarta, jest to faktycznie możliwe, kiedy ustasz, uszkodzisz ten klon i w pewnym sensie wycieka z tego sonaru lucita.
Więc kiedy też należy uważać, aby nie mieć oleju w tej fajce gębowej. Nie ssać za dużo i nie za dużo, ale to jest stosunkowo łatwe do zdobycia, ta umiejętność.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Ten film i protokół mają na celu pomoc w nauce transferu jądra, procesu, w którym zróżnicowany jądro komórkowe jest przeprogramowane do stanu zarodkowego.