Name: Enkapsulacja komórek rakowych PuraMatrix (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-12-17T17:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 8 s
Description: Poznaj metodę enkapsulacji komórek rakowych CAR5 w żelu PuraMatrix dla badań nad rakiem jajnika. Technika ta tworzy trójwymiarowe struktury przypominające mikrometastazy, umożliwiając lepsze odwzorowanie warunków in vivo.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Uwagi techniczne:
<ul>
 <li>Żelowanie jest inicjowane przez dodanie soli. Dlatego KLUCZOWE jest, aby żadne sole nie miały kontaktu z PuraMatrix do momentu, gdy pożądane jest żelowanie; ekspozycja na sole o bardzo niskiej sile jonowej (np. &lt; 0,05 M) spowoduje nieodwracalną żelatynizację.</li>
 <li>Pozostałe przygotowane roztwory zapasowe mogą zostać wykorzystane w późniejszym terminie, pod warunkiem że nie miały kontaktu z solami. Ponowna sonikacja nie jest wymagana.</li>
 <li>Pęcherzyki powietrza można usunąć poprzez rozdzielenie PuraMatrix na a ليكwoty do sterylnych probówek, a następnie odwirowanie.</li>
 <li>Należy zachować szczególną ostrożność podczas wymiany pożywki, ponieważ aspiracja może łatwo naruszyć strukturę żelu PuraMatrix.</li>
</ul>
Materiały:
BD PuraMatrix RAD16 Peptide Hydrogel-1% (Katalog nr 354250): Całkowite stężenie peptydów w nierozcieńczonej mieszaninie wynosi 10 mg/ml.
<ul>
<li>Sonikator w kąpieli wodnej lub wstrząsarka wirująca (vortex)</li>
<li>płytka do hodowli komórkowej z 96 dołkami</li>
<li>Pożywki do hodowli komórkowych</li>
<li>Sterylnie filtrowana woda (H2O)2O</li>
<li>Sterylna filtrowana 20% sacharoza</li>
<li>Komórki (wszystkie w zagęszczeniu 5 0 komórek/dołek): OVCAR-5</li>
</ul>
Wszystkie etapy należy przeprowadzić w warunkach aseptycznych.
Procedura:
<ol>
	<li>Poddać 1% PuraMatrix (RAD16) działaniu kąpieli sonicznej w sonicatorze przez 30 minut w celu zmniejszenia lepkości przed użyciem.</li>
	<li>Roztwór PuraMatrix 1% można teraz rozdzielić do sterylnych probówek w celu ułatwienia przyszłych eksperymentów.
	<ol class="lalpha">
		<li>Należy unikać tworzenia się pęcherzyków powietrza; w przypadku ich powstania wystarczy odwirować sterylne probówki zawierające PuraMatrix przy 10 obr./min (30 x g) przez 5 minut.</li>
		<li>Całkowite stężenie peptydów w nierozcieńczonej mieszaninie wynosi 10 mg/ml.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Dwa zestawy po 4 dołków zostaną wysiane przy całkowitym stężeniu peptydów wynoszącym odpowiednio 2,5 mg/ml i 1,25 mg/ml.</li>
	<li>Rozcieńcz PuraMatrix w każdej z przygotowanych studni za pomocą 0.2 μm przefiltrowano sterylnie 20% sacharozę i 13,3% sacharozę do całkowitych stężeń peptydów odpowiednio 5 mg/ml i 2,5 mg/ml, aby uzyskać 2-krotne stężenie BD PuraMatrix w 10% sacharozie.
	<ol class="lalpha">
		<li>Aby przygotować 20% sacharozę, rozpuścić 10 g sacharozy, a następnie dopełnić objętość wodą do 50 ml.</li>
		<li>Roztwory sacharozy o stężeniu 13% i 10% można przygotować poprzez rozcieńczenie 20% roztworu stokowego.
		<ol class="lroman">
			<li>13% sacharozy (na każde 10 ml): 6,5 ml 20% sacharozy + 3,5 ml sterylnej wody H2O2O.</li>
			<li>10% sacharozy (na każde 10 ml): 5,0 ml 20% sacharozy + 5,0 ml sterylnej wody H2O2O.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
 </li>
	<li>Przygotować mieszaninę główną (master mix) peptydu PuraMatrix w ilości dostosowanej do liczby studni, które zamierza się wysiać. (Patrz przykład poniżej). Następnie podzielić mieszaninę na poszczególne probówki, tak aby każda zawierała 25 ml mieszaniny głównej.
	<ol class="lalpha">
		<li>Mieszaninę master mix należy przygotować w dwukrotności pożądanego stężenia końcowego całkowitej ilości peptydów, ponieważ podczas wysiewania zostanie ona rozcieńczona równą objętością komórek. <img src="/files/ftp_upload/1692/1692_fig11.jpg" alt="Schemat stężenia peptydów z procesem rozcieńczania PuraMatrix do eksperymentów badawczych." data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="rycina 1"></li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przygotować zawiesiny komórkowe poprzez trypsynizację monowarstwowych kultur komórek.
	<ol class="lalpha">
		<li>Dla każdej kolby T-75 można zastosować 2 ml 0,05% trypsyny z EDTA.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Zneutralizować trypsynę poprzez dodanie pożywki do hodowli komórkowej zawierającej 10% inaktywowanej ciepłem płodowej surowicy bydlęcej (użyć co najmniej 2 ml pożywki na każdy 1 ml trypsyny zużytej w poprzednim kroku).</li>
	<li>Odwirować komórki przy 100 obr./min (~ 30 x g) przez 5 minut w celu otrzymania osadu komórkowego.
 <ol>
		<li>Resuspendować komórki w 10% sterylnej, filtrowanej sacharozie.</li>
		<li>Należy policzyć komórki, a następnie ponownie odwirować próbkę przy 10 obr./min (~ 30 x g) przez 5 minut w celu usunięcia śladowych ilości soli znajdujących się w pożywce.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Resuspenduj komórki OVCAR-5 w 10% sacharozie w stężeniu 2,0 x 105 komórek/ml, tak aby końcowa liczba komórek w każdej studzience wynosiła 5 0 komórek. 
Poniższe kroki należy wykonać szybko. </li>
 <li>Dodaj 25 μl z 2,0 x 105 zawiesiny komórek/ml do pierwszej pojedynczej probówki zawierającej 25 μl mieszaniny master mix PuraMatrix, zgodnie z powyższym schematem.
 <ol class="lalpha">
 <li>Szybko wymieszaj poprzez pipetowanie (około 5 razy w górę i w dół) w probówce, unikając wprowadzania pęcherzyków powietrza.</li>
 <li>Następnie pipetować 50 μl mieszaninę zawiesiny komórkowej i PuraMatrix do odpowiedniej studni płytki 96-dołkowej.</li>
 <li>Rozpocząć żelowanie preparatu BD PuraMatrix poprzez delikatne pipetowanie 150 μl pożywkę do hodowli komórkowych (RPMI + 10% FBS) przy ściankę studzienki <img src="/files/ftp_upload/1692/1692_fig12.jpg" alt="Proces zawiesiny komórkowej, rozcieńczanie w Puramatrix, schemat układu eksperymentalnego, rozkład próbek w probówkach." data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="rycina 2"></li>
 </ol>
 </li>
 <li>Powtórz kroki opisane w punkcie 8, aż wszystkie dołki zostaną wysiane.</li>
 <li>Po 30 minutach Bardzo delikatnie usuń ok. 2/3 pożywki za pomocą 200 μl pipetą w celu wyrównania pH hydrożelu.
 <ol class="lalpha">
 <li>NIE NALEŻY UŻYWAĆ ASSPIRATORA PRÓŻNIOWEGO, PONIEWAŻ MOŻE TO ZABURZYĆ STRUKTURĘ MACIERZY </li>
 <li>Umieść końcówkę pipety w dołku w taki sposób, aby nie dotykała warstwy PuraMatrix, i delikatnie usuń pożywkę z dołka. </li>
 <li>Należy zachować ostrożność, aby nie naruszyć matrycy podczas hodowli komórek w PuraMatrix. </li>
 </ol>
 </li>
 <li>Bardzo delikatnie dodaj 150 μl świeżej pożywki hodowlanej do boku studzienki zawierającej komórki enkapsulowane w PuraMatrix.</li>
 <li>Wymieniaj pożywkę hodowlaną w każdej studzience co 48 godzin na świeżą pożywkę, uważnie powtarzając kroki 10 i 1.</li>
 </ol>
Reprezentatywne wyniki:
<img src="/files/ftp_upload/1692/1692_fig1tmb.jpg" alt="Progresja wzrostu komórek, obraz mikroskopowy, dni 1–7, przedstawiająca zmiany rozmiaru i struktury, skala 10 µm." border="0" data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="rycina 1"> Rysunek 1. Komórki OVCAR-5 zostały enkapsulowane zgodnie z opisanym powyżej protokołem. Obrazy pozyskano przy użyciu odwróconego mikroskopu Olympus FV10 wyposażonego w laser Spectra-Physics DeepSee Ti:Sapphire nastrojony na 750 nm. Sesje obrazowania przeprowadzono w 1., 3., 5. i 7. dobie po wysianiu. Do obrazowania przez PuraMatrix wykorzystano obiektyw imersyjny wodny 40x o dużej odległości roboczej (Olympus LUMPLFLN 0,8 NA). Objętości trójwymiarowe gromadzono poprzez pozyskiwanie stosów obrazów w 1.47 μm kroki osiowe. Dwa detektory bez skanowania (non-descanned) rejestrowały emisję autofluorescencji przy użyciu filtrów pasmowych dla światła fioletowego (40-490 nm) oraz zielonego (510-550 nm). Końcowe obrazy oraz filmy z serii przekrojów głębokościowych (depth stack movies) przetworzono w programie ImageJ poprzez połączenie obu kanałów detekcji. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/1692/1692_fig1.jpg">kliknij tutaj</a> aby zobaczyć powiększoną wersję rysunku 1.

<ol><li>Gelain, F., Bottai, D., Vescovi, A., Zhang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Designer+self-assembling+Peptide+nanofiber+scaffolds+for+adult+mouse+neural+stem+cell+3-dimensional+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Designer self-assembling Peptide nanofiber scaffolds for adult mouse neural stem cell 3-dimensional cultures.</a> PLoS One. 1, e119-e119 (2006).</li>
</ol>

enkapsulacja komórek nowotworowych w puramatrix

PuraMatrix Encapsulation of Cancer Cells

Coraz więcej dowodów wskazuje na to, że hodowla komórek nowotworowych w trzech wymiarach dokładniej odtwarza złożoność biologii guza. Wiele z tych modeli wykorzystuje zrekonstytuowaną błonę podstawną pochodzenia zwierzęcego, która zawiera zmienną ilość czynników wzrostu i cytokin mogących wpływać na wzrost tych modeli hodowli komórkowych. W niniejszej pracy szczegółowo opisujemy przygotowanie i zastosowanie PuraMatrix, dostępnego komercyjnie samoorganizującego się żelu peptydowego, który jest wolny od materiałów pochodzenia zwierzęcego oraz patogenów, w celu enkapsulacji i namnażania linii komórkowej raka jajnika OVCAR-5. Rozpoczynamy od opisu sposobu przygotowania PuraMatrix przed użyciem. Następnie demonstrujemy, jak prawidłowo mieszać PuraMatrix z zawiesiną komórkową, aby enkapsulować komórki w hydrożelu. Po dodaniu pożywki do hodowli komórkowej lub wstrzyknięciu do środowiska fizjologicznego, komponent peptydowy PuraMatrix szybko samoorganizuje się w 3D hydrożel, który wykazuje włóknistą strukturę w skali nanometrów ze średnią wielkością porów wynoszącą 5-200 nm1Dodatkowo demonstrujemy, jak propagować kultury hodowane w enkapsulowanym PuraMatrix. Po enkapsulacji w PuraMatrix komórki OVCAR-5 organizują się w trójwymiarowe struktury acinarne, które bardziej przypominają morfologię guzków mikroprzewlekłych obserwowanych w praktyce klinicznej niż jednowarstwowe modele in vitro. Za pomocą mikroskopii konfokalnej przedstawiamy wygląd reprezentatywnych komórek OVCAR-5 enkapsulowanych w PuraMatrix w 1., 3., 5. i 7. dniu po wysiewaniu. Wykorzystanie PuraMatrix do hodowli komórek nowotworowych powinno poprawić nasze zrozumienie choroby i pozwolić na ocenę odpowiedzi na leczenie w systemach modelowych o większej wartości prognostycznej klinicznie.

W tym filmie pokazano, jak enkapsulować i hodować komórki nowotworowe w PuraMatrix, dostępnym komercyjnie samoorganizującym się żelu peptydowym.

Enkapsulacja komórek nowotworowych w PuraMatrix

Coraz więcej dowodów wskazuje na to, że hodowanie komórek nowotworowych w trzech wymiarach dokładniej odtwarza złożoność biologii guza. Wiele z tych...

Modele monowarstwowych kultur komórkowych są niezwykle użytecznymi narzędziami w badaniu różnych chorób, w tym nowotworów. Modele te nie odtwarzają jednak trójwymiarowego środowiska obserwowanego in vivo. Niniejszy film zaprezentuje zastosowanie pure Matrixx, dostępnego komercyjnie samomonitującego się żelu peptydowego, do enkapsulacji i namnażania linii komórkowej raka jajnika CAR five.Zawiesinę komórkową miesza się z czystym Matrixx i pożywką do hodowli komórkowej. Pożywkę dodaje się w celu zainicjowania procesu z czystym Matrixx; gdy komórki są enkapsulowane i hodowane w czystym Matrixx, pięć komórek formuje struktury 3D ASIN R, które przypominają morfologię guzków mikroprzewrotowych. Cześć, jestem Adnan Abbi.Jestem stypendystą badawczym w laboratorium dr TBA Hassan w Woman Center for Photo Medicine w Massachusetts General Hospital. Dzisiaj zaprezentujemy protokół enkapsulacji i hodowli linii komórkowej raka jajnika w syntetycznej macierzy zwanej pure matrix. Model ten wykorzystujemy w naszym laboratorium do oceny odpowiedzi na leczenie raka jajnika.Zacznijmy zatem. Hydrożel peptydowy BD 1%pure matrix RAD 16 posiada całkowite stężenie peptydów wynoszące 10 mg/mL przed użyciem. Zmniejsz lepkość matrycy pure matrix, umieszczając ją w łaźni wodnej i poddając sonikacji przez 30 minut, zachowując warunki sterylne po zakończeniu sonikacji.Rozdziel 1% roztwór czystej macierzy do sterylnych probówek. Aby ułatwić przyszłe eksperymenty, należy unikać powstawania pęcherzyków powietrza; w przypadku ich powstania wystarczy odwirować sterylne probówki zawierające czystą macierz przy 1000 RPM przez pięć minut. W tej demonstracji przygotujemy dwa zestawy po cztery dołki z całkowitym stężeniem peptydów wynoszącym odpowiednio 2,5 mg/mL oraz 1,25 mg/mL. Przygotuj dwie mieszaniny główne (master mix) czystego peptydu macierzy, opierając się na liczbie dołków, które zamierzasz zasiać, co w tym przypadku wynosi osiem.Każdy master mix należy przygotować w dwukrotnym pożądanym stężeniu końcowym całkowitego peptydu, ponieważ podczas wysiewania zostanie on rozcieńczony równą objętością komórek; aby przygotować master mixy, należy rozcieńczyć czystą macierz sterylną 10%sucrose oraz 13,3%sucrose do całkowitych stężeń peptydów wynoszących odpowiednio 5 mg/mL i 2,5 mg/mL, aby uzyskać dwukrotne stężenie czystej Matrixx w 10%Sucrose, a następnie odmierzyć 25 µL master mixów do ośmiu oddzielnych probówek. Master mixy z czystą macierzą są teraz gotowe do enkapsulacji komórek. W tym doświadczeniu enkapsulowana i namnażana będzie linia komórek raka jajnika CAR5; przed trypsynizacją należy inkubować komórki w 10 mL sterylnego PBS bez wapnia i magnezu przez 15 do 20 minut.Odssać PBS i poddać monowarstwę hodowli komórkowej trypsynizacji, a następnie zneutralizować trypsynę poprzez dodanie pożywki do hodowli komórkowej zawierającej 10% inaktywowanej termicznie płodowej surowicy bydlęcej. Należy użyć co najmniej dwóch mililitrów pożywki na każdy mililitr trypsyny zastosowany w poprzednim kroku. Następnie przenieść komórki do probówek wirówkowych i odwirować je przy 1000 RPM przez pięć minut, aby uzyskać osad komórkowy.Po wirowaniu resuspenduj osad komórkowy w 10% sterylnie filtrowanej sacharozie. Policz komórki i ponownie odwirowuj przy 1000 RPM przez pięć minut. Aby usunąć śladowe ilości soli znajdujących się w medium, resuspenduj komórki w 10% sacharozie do stężenia 2 × 10⁵ komórek na mililitr, tak aby końcowa liczba komórek na studzienkę wynosiła 5 000 komórek.Komórki są teraz gotowe do enkapsulacji w czystym Matrixx. Następujące kroki enkapsulacji komórek w czystej macierzy muszą być wykonane szybko: do pierwszej pojedynczej probówki zawierającej 25 µL master mixu czystego Matrixx należy dodać 25 µL wcześniej przygotowanej zawiesiny komórek. Całość należy szybko wymieszać poprzez pipetowanie w górę i w dół w probówce około pięciu razy, uważając, aby nie wprowadzić pęcherzyków powietrza.Następnie pipetuj 50 µL mieszaniny zawiesiny komórkowej z czystą macierzą Matrixx do odpowiedniej dołka płytki hodowlanej 96-dołkowej. Rozpocznij żelowanie czystej macierzy BD, delikatnie pipetując 150 µL pożywki do hodowli komórkowej wzdłuż ścianki dołka. Powtórz kroki enkapsulacji komórek dla pozostałych dołków.Należy pamiętać, że kroki te muszą być wykonywane szybko, a cała procedura enkapsulacji dla jednej studzienki powinna zostać zakończona przed przejściem do następnej. Po wysianiu komórek do wszystkich ośmiu studni należy pozostawić je na 30 minut. Po 30 minutach, używając pipety 200 µL, należy umieścić końcówkę pipety w studni w taki sposób, aby nie dotknęła ona warstwy czystej macierzy, i bardzo ostrożnie usunąć medium ze studni. Należy usunąć około dwóch trzecich medium, aby zrównoważyć pH hydrożelu.Nie należy używać aspiratora próżniowego, ponieważ zakłóci to strukturę matrycy. Następnie, bardzo ostrożnie, nalać 150 µL świeżej pożywki do hodowli komórkowych na ściankę dołka zawierającego komórki enkapsulowane w czystym Matrixx. W ten sam sposób, jak pokazano wcześniej, usunąć dwie trzecie pożywki i dodać świeżą pożywkę do pozostałych dołków.Wymieniaj pożywkę hodowlaną w każdym dołku co 48 godzin na świeżą pożywkę. Komórki Ocar five zostały zamknięte w kapsułkach zgodnie z opisaną procedurą. Przedstawiono reprezentatywne renderingi 3D obrazów komórek OR five zamkniętych w kapsułkach i hodowanych w czystej macierzy w dniach 1, 3, 5 i 7.Właśnie zaprezentowaliśmy sposób enkapsulacji w kulturze linii komórkowej raka jajnika OCar5 w syntetycznej matrycy o nazwie Pure Matrixx. Przy stosowaniu Pure Matrixx należy pamiętać, że niniejszy protokół został zoptymalizowany dla linii komórkowej OCar5. Każdy badacz będzie musiał zoptymalizować i dostosować protokół do konkretnie wykorzystywanej linii komórkowej.I pamiętajcie, że podczas wymiany pożywki bardzo ważne jest, aby nie naruszyć warstwy matrycy, ponieważ jest ona bardzo delikatna; nigdy nie odsysajcie cieczy i zawsze używajcie pipety. To wszystko. Bardzo dziękujemy za oglądanie i życzymy powodzenia w eksperymentach.

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

PuraMatrix Enkapsulacja komórek nowotworowych

Opisany tutaj test oczyszczania mezotelium wykorzystuje komórki znakowane fluorescencyjnie oraz mikroskopię wideo poklatkową do wizualizacji i ilościowego pomiaru interakcji między wielokomórkowymi sferoidami raka jajnika a monowarstwami komórek mezoteliów. Test ten modeluje wczesne etapy przerzutowania raka jajnika.

Test oczyszczania mezotelialnego in vitro modelujący wczesne etapy przerzutowania raka jajnika

Cytotoksyczna aktywność fenantrydyny PJ-34 w komórkach nowotworowych przechodzących mitozę została udokumentowana w czasie rzeczywistym za pomocą obrazowania konfokalnego na żywo. PJ-34 zlikwidował ludzkiego raka piersi Komórki MDA-MB-231 zawierające extracentrosomy w mitozie. W przeciwieństwie do normalnej dwuogniskowej mitozy, pozacentrosomy nie były skupione w dwóch biegunach wrzeciona w obecności PJ-34.

Śmierć komórki związana z nieprawidłową mitozą obserwowana przez obrazowanie konfokalne w żywych komórkach rakowych

Natywna matryca pochodząca z fibroblastów pochodząca z inżynierii tkankowej jest nowym narzędziem do generowania substratu zrębu, który wspiera proliferację i różnicowanie komórek nabłonkowych. W artykule przedstawiono protokół stosujący tę metodologię do oceny wpływu różnych typów komórek zrębu na biologię komórek nowotworowych.

Inżynieria tkankowa mikrośrodowiska zrębu guza z zastosowaniem do inwazji komórek rakowych

Ten artykuł zawiera szczegółowe metodologie wykorzystania testów trójwymiarowych (3D) do ilościowego określenia inwazji komórek raka piersi. W szczególności omawiamy procedury wymagane do skonfigurowania, takie jak testy, kwantyfikacja i analiza danych, a także metody badania utraty integralności błony, która ma miejsce podczas inwazji komórek.

Kwantyfikacja inwazyjności komórek raka piersi za pomocą modelu trójwymiarowego (3D)

Tutaj prezentujemy protokół enkapsulacji komórek katabolicznych, które zużywają lipidy do produkcji ciepła w tkance tłuszczowej w jamie brzusznej i zwiększają rozpraszanie energii u otyłych myszy.

Enkapsulacja termogenicznych preadipocytów do przeszczepu do magazynów tkanki tłuszczowej

Ta metoda ocenia inwazję komórek rakowych ze sferoid na otaczającą matrycę 3D.  Sferoidy są generowane metodą hodowli wiszącej kropli, a następnie osadzane w matrycy składającej się z materiałów błonowych i kolagenu typu I.  Inwazja sferoid jest następnie monitorowana.

Test sferoidalny komórek rakowych do oceny inwazji w warunkach 3D

Tutaj opisujemy metodę długoterminowej mikroskopii poklatkowej do długotrwałego śledzenia pojedynczych komórek w odpowiedzi na terapie przeciwnowotworowe.

Po drugiej stronie lustra: mikroskopia poklatkowa i podłużne śledzenie pojedynczych komórek w celu zbadania terapii przeciwnowotworowych

Dostosowaliśmy przepuszczalną mikroporowatą wkładkę membranową do naśladowania mikrośrodowiska guza (TME). Model składa się z mieszanej hodowli komórek, pozwala na uproszczone generowanie wysoce wzbogaconych pojedynczych populacji komórek bez użycia znakowania fluorescencyjnego lub sortowania komórek oraz pozwala na badanie komunikacji międzykomórkowej w obrębie TME w warunkach normalnych lub stresowych.

Naśladownictwo mikrośrodowiska guza: prosta metoda generowania wzbogaconych populacji komórek i badania komunikacji międzykomórkowej

Tutaj opisujemy metodę hodowli trójwymiarowej do analizy morfologii komórek pierwotnego raka piersi, a także do badania ich bezpośrednich/pośrednich interakcji z monocytami i wyników, takich jak degradacja kolagenu, rekrutacja komórek odpornościowych, inwazja komórek i promowanie stanu zapalnego związanego z rakiem.

Analiza komunikacji między monocytami a pierwotnymi komórkami raka piersi w trójwymiarowym systemie opartym na ekstrakcie z macierzy zewnątrzkomórkowej (ECME)

Interakcje komórkowe parakrynne i juktakrynowe odgrywają ważną rolę w wielu procesach biologicznych, w tym w progresji guza, odpowiedziach immunologicznych, angiogenezie i rozwoju. W tym przypadku stosuje się metodę hodowli proksymalnej do badania sygnalizacji parakrynnej, w której utrzymywane są zlokalizowane stężenia wydzielanych czynników, jednocześnie zapobiegając bezpośredniemu kontaktowi komórkowemu.

Metoda hodowli proksymalnej do badania sygnalizacji parakrynnej między komórkami

Poznaj metodę enkapsulacji komórek rakowych CAR5 w żelu PuraMatrix dla badań nad rakiem jajnika. Technika ta tworzy trójwymiarowe struktury przypominające mikrometastazy, umożliwiając lepsze odwzorowanie warunków in vivo.

Enkapsulacja komórek nowotworowych w PuraMatrix

Przeglądaj więcej filmów