Suszenie chemiczne: przygotowanie próbki biologicznej do skaningowej mikroskopii elektronowej (SEM)

- Na początek zacznij od odwodnienia i wysuszenia utrwalonej próbki, aby zmniejszyć zniekształcenia próbki spowodowane usuwaniem gazów i ciekłej wody przy obniżonym ciśnieniu roboczym konwencjonalnych skaningowych mikroskopów elektronowych, SEM.

Aby odwodnić próbkę, należy ją przemyć zwiększającym się stężeniem etanolu w wodzie, aż do osiągnięcia 100% etanolu. Następnie powtórzyć ten proces z chemicznym środkiem suszącym w etanolu, aż próbka zostanie przemyta czystym środkiem suszącym. Przenieść próbkę i czynnik suszący do naczynia do odparowywania. Przykryj go minimalną ilością dodatkowego środka osuszającego i pozostaw do wyschnięcia na noc w dygestorium.

Następnie zamontuj przygotowaną próbkę na górze króćca mikroskopu za pomocą węglowej taśmy klejącej. Na koniec nałóż srebrną farbę na krawędzie kikuta, a następnie od krawędzi króćca do każdej z próbek, aby zmniejszyć nagromadzenie nadmiaru elektronów, co może spowodować niepożądane artefakty obrazu.

W tym eksperymencie muszki owocowe, Drosophila melanogaster, są przygotowywane do analizy SEM przy użyciu środka suszącego HMDS.

- Aby przygotować Drosophila melanogaster, zanurz znieczulone muchy w 1 mililitrze utrwalacza na 2 godz