JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Biologia
0 wyświetleń • 4:39 min. • April 30th, 2023
- Zacznij od pulsacyjnego znieczulenia Drosophila wraz z buforem w blenderze, aby rozbić muchy na małe kawałki. Przefiltruj mieszaninę przez siatkę, aby usunąć duże części ciała. Następnie pozwól jajom zatonąć, podczas gdy większe fragmenty pozostaną na powierzchni i można je usunąć.
Powtórz ten proces, używając mniejszej siatki, aby usunąć dodatkowe zanieczyszczenia. Zbierz jaja do fiolki, a jeśli jaja mają być leczone lekiem, zrób to w tym momencie. Następnie usuń płyn i zastąp go utrwalaczem. Dodaj heptan, aby utrwalacz przeniknął przez błonę otaczającą jajo.
Następnie zmyj utrwalacz za pomocą PBS. Aby zabarwić oocyty, usuń ochronne błony zewnętrzne, aby umożliwić penetrację przeciwciał. Odpipetować oocyty na matową część szkiełka podstawowego. Umieść szkiełko nakrywkowe na jajach i delikatnie zwiń szkiełko nakrywkowe ruchami w przód iw tył, aby mechanicznie oddzielić błonę kosmówkową i błonę witelinową od jaja. Oocyty są teraz gotowe do barwienia.
W przykładowym protokole będziemy przygotowywać oocyty w mejozie I do barwienia i wizualizacji aparatu wrzecionowego.
- Na początek wstępnie przetnij wnętrze 5-mililitrowej probówki i pipety Pasteura z PTB, aby zapobiec przywieraniu o
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych