JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Biologia
0 wyświetleń • 2:01 min. • April 30th, 2023
- Aby rozpocząć, odpipetuj kroplę buforu na czystą podkładkę preparacyjną. Następnie umieść wysuszoną żywą larwę na kropli. Drosophila, podobnie jak inne stawonogi, ma otwarty układ krążenia, w którym serce pompuje hemolimfę po całym ciele, kąpiąc narządy wewnętrzne. Aby uwolnić hemolimfę, która jest połączoną krwią i płynem śródmiąższowym stawonogów, użyj kleszczy i otwórz naskórek, półsztywną zewnętrzną powłokę larw.
Następnie wyrzucić tuszę i przenieść roztwór hemolimfy z płytki rozwarstwiającej do schłodzonego roztworu buforowego w probówce mikrowirówkowej. Na koniec użyj hemocytometru, aby policzyć liczbę hemocytów, komórek w hemolimfie, które zostały zebrane. W tym protokole pobierzemy hemolimfę z larw Drosophila melanogaster.
- Rozpocznij zbieranie hemolimfy, dodając 10 mikrolitrów 1x PBS do probówki mikrowirówki i umieszczając probówkę na lodzie. Następnie umieść 10-mikrolitrową kroplę 1x PBS na czystej podkładce preparucyjnej. Wybierz pojedynczą larwę i wysusz ją, umieszczając ją na chusteczce higienicznej. Następnie przenieś go do kropli PBS na podkładce preparcyjnej.
Za pomocą kleszczy delikatnie rozerwij i odwróć naskórek, aby uwolnić hemolimfę, a następnie wyrzuć tuszę
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych