JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Biologia
0 wyświetleń • 2:56 min. • April 30th, 2023
- Przenieś umyte C. elegans w płynie na szkiełko uprzednio pokryte polilizyną, związkiem, który pomoże skórkom robaków przykleić się do powierzchni szkła. Delikatnie dociśnij kolejny szklany suwak prosto w dół, tak aby krawędź wystawała poza dolny suwak. Aby unieruchomić robaki bez uszkodzeń, ściskaj zwierzęta, unikając ruchów bocznych. Następnie umieść szkiełka podstawowe z ułożonymi robakami na metalowym bloku w izolowanym pojemniku laboratoryjnym wypełnionym środkiem zamrażającym, takim jak ciekły azot lub suchy lód.
Metal jest skutecznym przewodnikiem temperatury, zapewniając, że powierzchnia bloku jest wystarczająco zimna, aby szybko zamrozić skórki robaka na obu szklanych powierzchniach. Po zamrożeniu szybko oddziel szklane szkiełka, aby rozsunąć lub rozłupać skórki robaków. Kontynuuj utrwalanie i barwienie tkanek, ponieważ przerwanie naskórka o niskiej przepuszczalności umożliwia chemicznym utrwalaczom i przeciwciałom barwiącym dostęp do wewnętrznych tkanek robaka. W poniższym protokole zobaczymy szczegółową demonstrację techniki krakingu przez zamrażanie i utrwalania tkanek.
- Najpierw przygotuj szkiełko, aby naprawić robaki. Odpipetować 30 mikrolitrów poli-L-lizyny na szki
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych