JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Biologia
0 wyświetleń • 2:59 min. • April 30th, 2023
- W probówce zawierającej bufor M9 zbierz do 150 robaków hermafrodytycznych na pożądanym etapie rozwoju. Usunąć bakterie z robaków, przemywając je buforem M9 i odwirowując próbkę.
Obejrzyj probówkę pod mikroskopem preparacyjnym podczas usuwania supernatantu, aby zapobiec utracie próbki. Przenieś robaki do szklanego naczynia z minimalną objętością buforu M9. Dodaj lewamizol, aby znieczulić robaki.
Zlokalizuj głowę robaka i gardło lub jelito przednie, które zawiera dwie struktury w kształcie cebulki. Użyłem dwóch igieł, aby przeciąć robaka za gardłem. Upewnij się, że sekcja została zakończona szybko, aby uniknąć wpływu na tkankę.
Gdy naskórek zostanie przerwany, dwa ramiona gonad są wytłaczane lub wypychane z ciała z powodu wewnętrznego ciśnienia robaka.
W tym przykładzie przeanalizujemy gonady dorosłych robaków w celu analizy immunofluorescencyjnej.
- Wybierz od 100 do 150 robaków w pożądanym stadium rozwoju i zbierz je w 1,5-mililitrowej probówce mikrowirówkowej zawierającej 100 mikrolitrów buforu M9. Następnie napełnij probówkę mikrowirówkową 900 dodatkowymi mikrolitrami buforu M9 i odwiruj ją z prędkością 1,000 razy g przez 1 minutę w temperaturze pokojowej.
Pod mikroskopem prepa
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych