Drosophila Test agresji: metoda badania plastyczności behawioralnej u much

- Aby ocenić agresję u much, użyj zamkniętej komory bojowej wyposażonej w dwa punkty wejścia i przegrodę, aby utrzymać badanych oddzielnie przed próbą. Umieść źródło pożywienia na środku komory, aby wywołać konflikt dla much. Następnie załaduj wcześniej odizolowane i oznaczone samce przez punkty wejścia po obu stronach areny. Usuń przegrodę i zapisz spotkania much, aby określić ilościowo agresję.

Aby ustanowić dominację, samiec wykazuje stereotypowe zachowania ofensywne, które zwiększają intensywność, od zbliżania się i gonienia przeciwnika po rzucanie się, zachowanie wskazujące na agresję, w którym atakująca mucha unosi się wysoko na tylnych łapach i rzuca się na przeciwnika, próbując go złapać. Z kolei przeciwnik wykazuje zachowania obronne, takie jak ucieczka w odwrocie napastnika. W ten sposób z walki wyłania się przegrany i zwycięzca, a w każdym przeciwniku tworzy się wspomnienie porażki lub zwycięstwa.

W przykładowym protokole zobaczymy, w jaki sposób układ, który eliminuje obchodzenie się ze zwierzętami podczas testu agresji, jest używany do badania tworzenia pamięci u much, które przegrały swoją pierwszą walkę, co określa się mianem efektu "przegranego".

- Rozpocznij eksperymenty behawioralne od włożenia plastikowych przegród do każdej komory bojowej. Wyjmij bawełnianą zatyczkę z rurki izolacyjnej i umieść rurkę pod otwartym otworem z boku urządzenia. Pozwól muchy wejść do komory bojowej za pomocą negatywnej geotaksji. Następnie zamknij przesuwną ścianę po wejściu muchy do komory. Powtórz procedurę, aby wprowadzić drugą muchę do komory bojowej po drugiej stronie aparatu.

Następnie umieść urządzenie z powrotem w oświetlonej pozycji nagrywania wideo. Rozpocznij nagrywanie wideo i usuń plastikową przegrodę, aby umożliwić muchom interakcję. W przypadku eksperymentów z efektem "przegranego" nagrywaj pierwsze walki przez 20 minut, aby zapewnić utworzenie silnych relacji dominacji. Po 20 minutach delikatnie włóż plastikową przegrodę do komór bojowych, aby oddzielić muchy i zatrzymać wideo.

- Aby wywołać silną mentalność "przegranego", upewnij się, że muchy nawiążą i utrzymają relację dominacji podczas pierwszych walk, a następnie zminimalizuj przeszkadzanie zwierzętom podczas wkładania przegród w celu oddzielenia much.

- Po 10-minutowym okresie odpoczynku rozpocznij nagrywanie i delikatnie wyjmij plastikową przegrodę. Pozostaw muchy do interakcji przez dodatkowe 20 minut. Zatrzymaj nagrywanie po 20 minutach. Aby zakończyć eksperyment, usuń muchy z komór behawioralnych za pomocą ujemnej geotaksji, odwracając procedurę opisaną wcześniej.