JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Biologia
0 wyświetleń • 5:51 min. • April 30th, 2023
- Zbierz żywe zarodki Drosophila i usuń ich nieprzezroczyste pasmówki. Następnie na szklane szkiełko nakrywkowe nałóż linię kleju heptanowego, który jest klejem taśmowym rozpuszczonym w płynnym heptanie. Aby móc poradzić sobie z zarodkami z odwążówką, ostrożnie ułóż próbki w rzędzie na kleju.
Przenieś szkiełko nakrywkowe do komory odwadniającej, aby częściowo wysuszyć zarodki. Zapobiegnie to wyciekowi cytoplazmatycznemu podczas lub po wstrzyknięciach. Następnie usuń szkiełko nakrywkowe i przykryj zarodki olejem halowęglowym, aby zapobiec dalszemu odwodnieniu, jednocześnie umożliwiając dyfuzję tlenu do zarodków.
Aby wykonać mikroiniekcję, należy użyć systemu do mikroiniekcji na kompatybilnym mikroskopie. Patrząc przez oczy, zidentyfikuj zarówno zarodki, jak i igłę wstępnie załadowaną roztworem do wstrzykiwań. Otwórz igłę i upewnij się, że wytwarza ona spójne i odpowiedniej wielkości krople płynu. Następnie należy wprowadzić igłę do wnętrza zarodka i wstrzyknąć odpowiednią objętość. Wyjmij igłę i przejdź do następnej, powtarzając wstrzyknięcie dla pozostałych zarodków.
W przykładowym protokole zobaczymy demonstrację mikroiniekcji zarodka Drosophila do badań obrazowych podziału komóre
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych