JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Biologia
0 wyświetleń • 3:06 min. • April 30th, 2023
- Na początek usuń głowę znieczulonej dorosłej muchy. Przykryj odciętą muchę roztworem zawierającym sól fizjologiczną buforowaną fosforanami lub PBS i albuminę surowicy bydlęcej lub BSA, aby uniknąć wysuszenia. Przytrzymaj muchę za klatkę piersiową za pomocą kleszczy, a następnie pociągnij brzuch drugą parą kleszczy, aby odsłonić jelita. Ponieważ uprawa lub worek do przechowywania żywności będzie przymocowany do klatki piersiowej, delikatnie odciągnij jelito od klatki piersiowej.
Po oderwaniu odciągnij uprawę od brzucha, aby rozłożyć jelito. Oderwij tylny koniec muchy, aby zacząć uwalniać jelito z jamy brzusznej. Kontynuuj szarpanie jelita, aby wyciągnąć całą tkankę z brzucha. Po uwolnieniu usuń jelito przednie, kanaliki Malpighiego, jelito tylne i jajniki, aby pozostawić tylko wycięte jelito środkowe, główne miejsce trawienia u muchy.
W przykładowym protokole przeanalizujemy jelita środkowe od młodych i starych dorosłych much, które zostaną poddane dalszej analizie za pomocą sortowania komórek aktywowanych fluorescencją lub FACS.
- Przed rozpoczęciem sekcji znieczulij jedną fiolkę z 40 muchami dwutlenkiem węgla na standardowym łóżku muchowym. Następnie za pomocą żyletki odetnij gł
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych