Test chwytania zdobyczy: metoda badania zachowania larw danio pręgowanego podczas chwytania zdobyczy

- Na początek umieść larwę danio pręgowanego w komorze rejestracyjnej, takiej jak studnia ze szklanym dnem, w której larwa może pływać. Zbierz pantofelki, zdobycz, za pomocą mikropipety i umieść je w komorze rejestracyjnej. Następnie umieść małą kroplę wody na środku szkiełka nakrywkowego i umieść ją nad komorą, aby uniknąć pęcherzyków powietrza.

Teraz umieść komorę na systemie oświetleniowym wyposażonym w białą lampę pierścieniową LED, aby wyeliminować cienie i sprawić, że organizmy będą dobrze widoczne. Obserwuj zachowanie podczas chwytania zdobyczy za pomocą behawioralnego systemu rejestrowania. Gdy tylko ofiara pojawi się w zasięgu wzroku, larwa zbiega oczy i skręca w J, aby zorientować swoje ciało w kierunku ofiary i chwyta ją. Możemy określić ilościowo zachowanie podczas chwytania zdobyczy, rejestrując liczbę pantofelków pozostających w komorze w danym okresie czasu. W poniższym protokole ocenimy zachowanie larwy danio pręgowanego podczas chwytania zdobyczy po laserowej ablacji określonych neuronów.

- Po ustawieniu systemu rejestracji behawioralnej i umieszczeniu larwy w komorze rejestrującej zgodnie z protokołem tekstowym, za pomocą mikropipety należy pobrać 50 pantofelków i umieścić je w komorze rejestrującej. Aby umieścić szkiełko nakrywkowe na górze komory nagraniowej, nałóż niewielką kroplę wody na szkiełko nakrywkowe przed umieszczeniem go na powierzchni wody komory nagraniowej, aby uniknąć wprowadzania powietrza do komory.

Umieść komorę nagrywania w systemie oświetleniowym. Następnie rozpocznij nagrywanie poklatkowe z prędkością 10 klatek na sekundę przez 11 minut. Na koniec przeprowadź analizę zgodnie z protokołem tekstowym.