Test odpowiedzi optokinetycznej: metoda pomiaru ostrości wzroku u danio pręgowanego

0 wyświetleń4:02 min • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- Zabezpiecz znieczuloną rybę na platformie tak, aby jej oczy i skrzela wystawały poza krawędź platformy. Ustaw rybę pionowo w cylindrze wypełnionym wodą w dobrze oświetlonym bębnie, który może się swobodnie obracać. Gdy ryba ożyje, na co wskazują skrzela i ruchy gałek ocznych, umieść w bębnie kratę lub wzór naprzemiennych białych i czarnych pionowych pasków. Teraz umieść solidny okluder nad paskami w widoku lewego oka.

Rozpocznij rotację i zapisz odpowiedź optokinetyczną OKR dla prawego oka. OKR składa się z odruchowych ruchów gałek ocznych w odpowiedzi na bodziec wizualny. Zastąp wzór coraz mniejszymi czarno-białymi paskami, aż ruch gałek ocznych przestanie być obserwowany. Wykonaj tę samą procedurę dla lewego oka.

Aby obliczyć jednooczną ostrość wzroku, zdolność do rozróżniania drobnych szczegółów, zmierz odległość od środka soczewki oka do wzoru i długość najmniejszego wzoru pary białych i czarnych pasków, przy których zaobserwowano ruch gałek ocznych. W przykładowym protokole użyjemy odpowiedzi optokinetycznej do pomiaru ostrości wzroku monocznego i obuocznego u dorosłych danio pręgowanego.

- Badania optokinetyczne prowadzone są za pomocą specjalnie skonstruowanego urządzenia rejestrującego wykorzystującego bęben obrotowy o średnicy 14,5 centymetra, mikroskopu stereoskopowego z regulowanymi ustawieniami natężenia światła, komputera oraz kamery do przechwytywania obrazów i nagrywania. Sterowany komputerowo mikrokontroler służy do regulacji prędkości obracającego się bębna i kierunków wirowania. Używając ryb, które są utrzymywane w standardowych warunkach, rozpocznij analizę od znieczulenia ryby w 0,016% tricainie przez dwie do trzech minut, a następnie umieść ją na małej platformie z oczami i skrzelami zawieszonymi nad krawędzią.

Aby utrzymać rybę w stanie unieruchomionym, unikając obrażeń, połóż cienką gąbkę lub ręcznik na ciele ryby i przypnij dwa do trzech kawałków pianki nad rybą, upewniając się, że ruch ogona jest ograniczony. Umieść rybę w cylindrycznym zbiorniku wypełnionym wodą, który mieści się w obracającym się bębnie urządzenia rejestrującego OKR. Użyj magnesów na platformie, aby ustawić rybę pionowo z oczami w odległości około 7.3 centymetra od krawędzi bębna.

Gdy ryba obudzi się ze znieczulenia i zaobserwuje się normalny oddech i losowe ruchy gałek ocznych, umieść siatkę bazową o częstotliwości 0,07 cykli na stopień lub CPD w obracającym się bębnie i włącz elementy sterujące komputera, aby rozpocząć obracanie i przechwytywanie wideo. Po wywołaniu początkowego OKR przez kratę podstawową, należy na chwilę wstrzymać obrót i wymienić kratę na mniejszą kratę o wyższej częstotliwości przestrzennej. Powtarzaj ten proces z sekwencyjnie mniejszymi kratami, aż nie będzie już można uzyskać OKR-u. Aby zweryfikować utratę OKR, po zmodyfikowanym podejściu do klatki schodowej, przetestuj ponownie z najmniejszą kratą, która spowodowała OKR, a następnie z kratą, która nie wywołała odpowiedzi, aby zweryfikować utratę OKR.

Aby uzyskać pomiary ostrości monokularu, umieść plastikowy okluder na paskach przylegających do przeciwległego oka i powtórz proces zbierania danych. Następnie przełącz się na drugie oko, zmieniając położenie okludera i wykonując pomiary. Użyj referencyjnego paska pomiarowego pod zbiornikiem rybnym, aby zanotować odległość każdego oka od paska w celu wykonania dokładnych pomiarów ostrości.

Aby określić ostrość wzroku, oblicz CPD za pomocą następującego wzoru, gdzie a to odległość od środka soczewki do siatki, a h to długość jednego cyklu najmniejszej siatki, przy której zaobserwowano OKR. Do połączonych pomiarów ostrości wzroku należy użyć średniej wartości obliczonej zarówno dla lewego, jak i prawego oka.

13:01

Wykorzystanie mikroskopii fluorescencyjnej arkuszy świetlnych do obrazowania rozwoju oka danio pręgowanego

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

10:07

Badanie cukrzycy oczami ryby: mikrodysekcja, wizualizacja i analiza naczyń naczyniowych siatkówki dorosłego tg(fli:EGFP) danio pręgowanego

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

11:01

Przygotowanie świeżych plastrów siatkówki od dorosłego danio pręgowanego do eksperymentów obrazowania ex vivo

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

09:39

Test behawioralny do pomiaru reakcji danio pręgowanego na zmiany natężenia światła

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:59

Wykorzystanie odpowiedzi optokinetycznej do badania funkcji wzrokowych danio pręgowanego

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

05:51

VisioTracker, innowacyjne, zautomatyzowane podejście do analizy okulomotorycznej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

02:20

Test odpowiedzi fotomotorycznej: metoda pomiaru reakcji behawioralnej larw danio pręgowanego na nagłą zmianę warunków oświetleniowych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

03:04

Test unikania danio pręgowanego i thigmotaxsji: wysokoprzepustowa metoda badania zachowania larw w odpowiedzi na awersyjny bodziec wzrokowy

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

04:56

Odpowiedź optokinetyczna jako ilościowa miara ostrości wzroku u danio pręgowanego

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:34

Prosty test behawioralny do badania funkcji wzrokowych u Xenopus laevis

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

Ostatnia aktualizacja: 1 sierpnia 2026