JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Biologia
0 wyświetleń • 3:02 min. • April 30th, 2023
- Jednym ze sposobów określenia funkcji genu jest obniżenie jego ekspresji i obserwacja efektu. Oligomery morfolino są często stosowane w badaniach nad powalaniem u danio pręgowanego. Morfolino to syntetyczna cząsteczka podobna do DNA o długości około 25 zasad, która hamuje ekspresję genów docelowych.
W celu leczenia morfoliną należy umieścić znieczuloną rybę z częściowo amputowaną płetwą ogonową na płytce iniekcyjnej i umieścić płytkę pod mikroskopem stereoskopowym. Wstrzyknąć tylko stronę grzbietową, podczas gdy niewstrzyknięta strona brzuszna działa jako kontrola. Morfolinosy mogą funkcjonować na dwa sposoby, w zależności od sekwencji, do której dążą. Po pierwsze, łączą się z miejscem rozpoczęcia translacji na mRNA i zapobiegają syntezie białek poprzez blokowanie translacji.
Po drugie, może wiązać się ze złączem intron-ekson na pre-mRNA i uniemożliwiać prawidłowe splicing, co skutkuje wadliwym transkryptem, który zostanie zdegradowany przez komórkę. Później zbadaj płetwy ogonowe pod kątem wyrostka. Różnice między odrastaniem regionów leczonych morfoliną i nieleczonych wskazują, że docelowe białko odgrywa rolę w regeneracji płetw. W tym protokole użyjemy morfolinosów w ramach tes
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych