JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Biologia
0 wyświetleń • 2:53 min. • April 30th, 2023
- Pościć dorosłą rybę przez 24 godziny przed wstrzyknięciem, aby opróżnić przewód pokarmowy i stworzyć dodatkową przestrzeń w jamie brzusznej. W dniu zabiegu znieczulij rybę tricainą i umieść ją w szczelinie w mokrej gąbce stroną brzuszną skierowaną do góry.
Następnie należy odpipetować żądaną ilość roztworu do wstrzykiwań na kawałek folii laboratoryjnej i wciągnąć ją do igły insulinowej. Umieść igłę między płetwami brzusznymi pod kątem 45 stopni od przedniej i tylnej osi ciała i delikatnie wepchnij ją w linii środkowej. Wsuń igłę o około 1 do 2 milimetrów do jamy brzusznej, przestrzeni między ścianą brzucha a narządami wewnętrznymi i powoli wstrzyknij interesujący Cię roztwór. Odczekaj pięć sekund przed wyciągnięciem igły, aby uniknąć rozlania. Teraz ostrożnie wyjmij igłę.
Po wstrzyknięciu należy szybko przenieść rybę do zbiornika regeneracyjnego zawierającego świeżą wodę w zbiorniku. Jeśli ryba nie zacznie od razu pływać, zakręć wodą w pobliżu skrzeli, aby pomóc jej dojść do siebie po znieczuleniu. W przykładowym protokole wstrzykniemy roztwór Mycobacterium marinum do zmutowanej ryby RAG1 w celu zbadania infekcji.
- Najpierw wyciśnij 5 mikrolitrów kropli rozcieńczonego roztworu b
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych