JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 3:19 min. • April 30th, 2023
Zacznij od umieszczenia kawałka wosku kostnego na dwóch płytkach do hodowli komórkowych oznaczonych jako test i kontrola. Odpipetować odpowiednią ilość bioluminescencji wyrażającej komórki raka piersi w każdym środku płytki i inkubować płytki przez określony czas, aby wspomóc przyczepianie komórek. Umieść mały eksplant kostny na wosku kostnym na płytce testowej i zabezpiecz go, wywierając nacisk.
Powoli wlej pożywkę do hodowli komórkowych z płodową surowicą bydlęcą, suplementem wzrostu, na każdą stronę płytki, aby zanurzyć eksplant i inkubować w temperaturze 37 stopni Celsjusza przez określony czas. Tkanka kostna na płytce testowej uwalnia rozpuszczalne czynniki, takie jak cytokiny i kinaza SRC, które przyciągają komórki raka piersi, powodując ich migrację. Dodaj podłoże do każdej płytki i umieść płytki w komorze obrazowania bioluminescencyjnego.
Komórka rakowa wykazująca ekspresję białka bioluminescencyjnego utlenia substrat i emituje światło. Określ ilościowo proliferację, mierząc całkowitą liczbę fotonów emitowanych przez każdą komórkę za pomocą oprogramowania. Komórki rakowe na płytce testowej powinny namnażać się szybciej niż komórki na płytce kontrolnej. W poniższym protokole
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych