Wszczepienie gruczolakoraka: metoda wszczepiania komórek rakowych do płuc myszy

- Najpierw wstrzyknij bleomycynę, nierybosomalny lek hybrydowy, dotchawiczo myszom na kilka dni przed wszczepieniem komórek rakowych w celu wywołania zwłóknienia w płucach. Następnie hoduj linie komórkowe raka płuc w pożywce do hodowli tkankowej. Przygotuj zawiesinę komórek rakowych, rozcieńczając komórki w PBS. Wstrzyknąć dootrzewnowo roztwór ketaminy i ksylazyny, aby znieczulić wstępnie kondycjonowaną mysz.

Teraz umieść mysz na platformie intubacyjnej, zawieszając jej przednie zęby tyłem o platformę. Otwórz usta i delikatnie wyciągnij język. Umieść cewnik w tchawicy, aż górna część dotrze do przednich zębów i dozuj żądaną ilość zawiesiny komórek rakowych w tchawicy, aby wszczepić bioluminescencyjne komórki rakowe do płuc.

Poczekaj, aż mysz wdycha całą objętość. Delikatnie wyjmij cewnik i umieść mysz na podkładce regeneracyjnej. Po kilku dniach wstrzyknij lucyferynę retro-orbitalnie do alternatywnych oczu i umieść mysz na imagerze.

Komórki rakowe wytwarzają lucyferazy, która przekształca lucyferynę w oksylucyferynę w obecności tlenu i emituje światło. Uzyskuj obrazy w celu monitorowania obciążenia guzem w płucach, obliczając luminoscore. W poniższym protokole wykonamy wszczepienie