Kokultura 3D komórek raka płuc z CAF: system modelowy in vitro do badania progresji guza
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 3:36 min. • April 30th, 2023
- W kokulturach 3D wiele typów komórek jest hodowanych razem w matrycach, takich jak macierz błony podstawnej, która naśladuje naturalne mikrośrodowisko macierzy zewnątrzkomórkowej, ułatwiając interakcje komórka-komórka i komórka-macierz. Aby ustanowić osadzoną kokulturę 3D, przygotuj jednolitą zawiesinę fibroblastów związanych z rakiem lub CAF i komórek raka płuc pobranych w stosunku dwa do jednego, w macierzy błony podstawnej. Utrzymuj zawiesinę na lodzie, aby zapobiec krzepnięciu matrycy w temperaturze otoczenia.
Przenieść odpowiednią objętość zawiesiny na płytkę do hodowli komórkowej. Inkubować w temperaturze 37 stopni Celsjusza przez wymagany czas, aby wspólnie osadzić komórki w matrycy. Aby ustanowić nałożoną kokulturę 3D, należy przygotować zawiesinę komórek raka płuc w macierzy błony podstawnej, w pożądanej gęstości komórek. Utrzymywać zawiesinę na lodzie. Odpipetować odpowiednią objętość zawiesiny macierzy komórkowej do płytki do hodowli komórkowej. Inkubuj w temperaturze 37 stopni Celsjusza, aby skonfigurować osadzoną monokulturę komórek rakowych.
Następnie przenieś żądaną objętość CAF zawieszonych w preferowanych pożywkach hodowlanych na osadzone komórki rakowe. W kokult
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych