JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 3:20 min. • April 30th, 2023
- Fale ultradźwiękowe o niskiej częstotliwości prowadzą do selektywnej lizy ludzkich komórek białaczkowych, a test XTT pomaga określić stopień tego uszkodzenia. Test działa na zasadzie, że enzymy mitochondrialne zdrowych komórek przekształcają żółty barwnik XTT w pomarańczowy związek zwany formazanem. Aby rozpocząć test, należy potraktować komórki beta-cyklodekstryną metylową, środkiem zubożającym poziom cholesterolu, a następnie poddać komórki sonifikacji o niskiej mocy, aby wywołać uszkodzenie komórek.
Wirować w celu granulowania komórek i dodać świeże podłoże do wzrostu komórek do osadu. Umieść komórki w pożądanym stężeniu na wielodołkowej mikropłytce i inkubuj ją przez noc. Teraz dodaj aktywowany roztwór XTT do komórek i inkubuj, aż w dołkach mikropłytki rozwinie się pomarańczowy kolor. Umieść płytkę w spektrofotometrze. Zmierz absorbancję przy 450 do 500 nanometrach, a następnie przy 630 do 690 nanometrach. Odejmij te dwie wartości, aby uzyskać dokładne wyniki. Wyższa wartość absorbancji w teście XTT wskazuje na wyższą aktywność enzymów mitochondrialnych i wyższą żywotność komórek.
W poniższym filmie zademonstrujemy zastosowanie testu XTT do określania skuteczności fal ultradź
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych