Białaczka

Ten film opisuje technikę barwienia komórek szpiku kostnego za pomocą barwienia May-Grünwald Giemsa. W protokole zabarwimy mysie komórki białaczki szpikowej, komórki C149, w celu analizy morfologii i zliczania różnicowego.

Ten film opisuje wzbogacanie limfocytów T ze śledziony myszy poprzez selekcję negatywną za pomocą separatora magnetycznego. Technika ta polega na ukierunkowaniu na inne komórki w próbce w celu zubożenia za pomocą przeciwciał lub ligandów skierowanych przeciwko określonym antygenom powierzchniowym komórki.

Ten film opisuje technikę izolowania komórek c-kit dodatnich ze szpiku kostnego myszy. W protokole wyizolujemy komórki c-kit dodatnie od myszy transgenicznej, aby zweryfikować c-Fos i Dusp1 pojedynczo lub razem jako cele leków w białaczce.

Ten film opisuje protokół barwienia immunofluorescencyjnego BrdU. Technika ta pozwala na identyfikację komórek w różnych fazach cyklu komórkowego. Dodanie barwników DNA i znakowanie przeciwciał pozwala na szczegółową analizę losów komórek fazy S w późniejszym czasie.

Ten film opisuje technikę izolowania komórek przewlekłej białaczki limfocytowej (CLL) od krwi obwodowej. Dzięki temu protokołowi wyizolujemy komórki PBL z próbki krwi ludzkiego pacjenta w celu późniejszego wydajnego generowania frakcji jądrowych i cytoplazmatycznych.

Film wyjaśnia sposób oczyszczania limfocytów B poprzez celowanie immunomagnetyczne i separację od zawiesiny komórek jednojądrzastych krwi obwodowej. Metoda ta polega na znakowaniu niepożądanych typów komórek specyficznymi przeciwciałami lub ligandami (połączonymi z cząstkami magnetycznymi) skierowanymi przeciwko określonym białkom powierzchniowym komórki, które mają zostać usunięte z heterogenicznej zawiesiny komórkowej przez separację magnetyczną.

Ten film opisuje metodę przestrzennego rozdzielania trzech subpopulacji komórek białaczkowych: zawieszonych komórek białaczkowych swobodnie unoszących się w pożywce, jasnych komórek białaczkowych przylegających do powierzchni monowarstwy komórek mezenchymalnych zrębu oraz komórek białaczkowych ciemnych fazowo, które wyemigrowały pod monowarstwę mezenchymalnych komórek zrębu z kohodowli 2D.

Ten film opisuje szczegółowy protokół izolowania świeżego całego szpiku kostnego z tylnych kończyn myszy w celu zbadania całych wad BM u pacjentów z chorobami krwi, takimi jak białaczka.

Ten film opisuje separację komórek ostrej białaczki limfoblastycznej od komórek zrębu szpiku kostnego za pomocą żelowych dziesięciu usieciowanych kolumn dekstranu G-10. Metoda ta pomaga odzyskać populację komórek nowotworowych, które migrowały pod przylegającymi komórkami zrębu szpiku kostnego, generując populację komórek nowotworowych "przyciemnionych fazowo".

Film opisuje metodę pobierania próbek krwi obwodowej z zatoki zaoczodołowej myszy i dalszej izolacji komórek jednojądrzastych z krwi za pomocą wirowania w gradiacji gęstości.

Ten film opisuje technikę pobierania szpiku kostnego z kręgosłupa biodrowego i przygotowania wymazu do biopsji. W tym przykładzie przeprowadzamy aspirację szpiku kostnego od pacjenta z ostrą białaczką szpikową (AML) i badamy komórki, aby sprawdzić, czy nie ma mierzalnej choroby resztkowej (MRD), ważnego biomarkera prognostycznego.

Ten film opisuje protokół generowania komórek dendrytycznych - kluczowych komórek prezentujących antygen, które aktywują limfocyty T - ze szpiku kostnego dorosłej myszy.

Ten film opisuje protokół izolowania HSPC ze szpiku kostnego i sortowania ich za pomocą techniki fluorescencyjnie aktywowanego sortowania komórek, która jest metodą uzyskiwania pojedynczo sortowanych HSPC. Hodujemy te posortowane komórki, aby uzyskać klony HSPC.

Ten protokół opisuje technikę izolowania fluorescencyjnie znakowanych komórek nowotworowych ostrej białaczki limfoblastycznej (T-ALL) komórek nowotworowych z dorosłego danio pręgowanego i ilościowego oznaczania ich za pomocą niebieskiego barwnika trypanowego.

Poniższy protokół opisuje metodę izolowania populacji bocznej komórek nowotworowych ostrej białaczki limfoblastycznej (T-ALL) komórek T, składającej się z komórek macierzystych, od dorosłego danio pręgowanego. W populacji bocznej brakuje wyraźnych markerów komórkowych, dlatego do ich izolacji używamy testu wypływu barwnika Hoechst 33342.

Ten film opisuje protokół ścinania chromatyny za pomocą trawienia enzymatycznego nukleazy mikrokokowej. Ścinanie chromatyny jest niezbędnym krokiem w immunoprecypitacji chromatyny lub przepływie pracy ChIp, który pomaga badać interakcję białko-DNA w ludzkich komórkach przewlekłej białaczki szpikowej. W protokole funkcji ścinanie chromatyny odbywa się za pomocą sonikacji.

Ten film opisuje selektywne uszkadzanie ludzkich komórek białaczkowych za pomocą ultradźwięków o niskiej częstotliwości. To zastosowanie ultradźwięków o niskiej częstotliwości w przedklinicznych warunkach in vitro pokazuje, że można osiągnąć zniszczenie komórek w celu zbadania i porównania wpływu sonikacji na białaczkę i normalne komórki.

Ten artykuł opisuje protokół testu XTT, który jest testem kolorymetrycznym do oceny żywotności komórek i aktywności mitochondriów.

Film opisuje stopniowy test znakowania impulsowego komórek ssaków za pomocą bromodeoksyurydyny (BrdU) do pomiaru proliferacji komórek. Wychwyt BrdU pozwala na czasowe śledzenie komórek, które znajdowały się w fazie syntezy w określonym momencie, bez konieczności synchronizacji komórek.

Ten film opisuje technikę długoterminowej kohodowli 2D komórek białaczkowych z komórkami zrębu szpiku kostnego w celu zbadania ich interakcji z mikrośrodowiskiem szpiku kostnego. Model kokultury 2D wykorzystuje komórki ostrej białaczki limfoblastycznej oraz zrębu szpiku kostnego lub osteoblasty, które wpływają na fenotyp komórek nowotworowych. Badanie to pomoże w badaniu mechanizmów, które leżą u podstaw przeżycia komórek białaczkowych wspomaganych szpikiem kostnym podczas ekspozycji na...

Ten film opisuje przygotowanie frakcji subkomórkowych z komórek białaczkowych, co jest metodą generowania frakcji komórkowych i jądrowych z komórek białaczkowych. Frakcje jądrowe i cytoplazmatyczne można wykorzystać do dalszej analizy.

Ten protokół zapewnia biochemiczne podejście do pomiaru wskaźnika zakwaszenia zewnątrzkomórkowego (ECAR) i wskaźnika zużycia tlenu (OCR) pierwotnych komórek białaczkowych za pomocą testu strumienia zewnątrzkomórkowego. Ocena profilu metabolicznego tych komórek pomaga scharakteryzować ich zapotrzebowanie, co prowadzi do spersonalizowanej terapii.

Ten film opisuje protokół testu immunoprecypitacji chromatyny (ChIP), który jest klasyczną techniką demonstracji interakcji białko-DNA. Technika ta służy do identyfikacji docelowych genów w ludzkich komórkach przewlekłej białaczki limfocytowej.

Ten film opisuje protokół walidacji genetycznej poprzez transfer docelowych genów za pomocą retrowirusów w liniach komórkowych przewlekłej białaczki szpikowej. Retrowirusy działają jako mediator w przenoszeniu materiału genetycznego do komórki białaczkowej w procesie zwanym transdukcją, który umożliwia długotrwałą ekspresję genu docelowego. Metodę tę można zastosować do dowolnych komórek docelowych w celu walidacji genetycznej i opracowania terapeutycznego.

Ten film opisuje protokół dla jednostki tworzenia kolonii na bazie metylocelulozy lub testu CFU, który pomaga zidentyfikować i policzyć liczbę kolonii utworzonych przez komórki białaczkowe w odpowiedzi na leczenie związkami przeciwnowotworowymi.

Ten film wyjaśnia ilościową metodę wysokosprawnej chromatografii cieczowej z odwróconymi fazami (RP-HPLC) do pomiaru metabolizmu adenozyny i powiązanych puryn generowanych przez konsumpcję AMP w środowisku zewnątrzkomórkowym komórek raka białaczkowego. Protokół opisuje czuły, specyficzny, wiarygodny i powtarzalny test RP-HPLC opracowany i zwalidowany do oznaczania ilościowego zewnątrzkomórkowych nukleotydów purynowych i nukleozydów wytwarzanych przez oczyszczone komórki przewlekłej białaczki...