Sortowanie komórek białaczkowych w oparciu o kolumnę G-10: metoda oczyszczania komórek ostrej białaczki limfoblastycznej z komórek zrębu szpiku kostnego

0 views • 2:57 min • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- Na początek dodaj trypsynę do płytki zawierającej komórki białaczkowe hodowane jednocześnie z komórkami zrębu szpiku kostnego w celu dysocjacji komórek. Odwirować i ponownie zawiesić osad za pomocą wstępnie podgrzanego podłoża, aby utrzymać żywotność komórek. Kolumna G-10 zawiera usieciowane kulki dekstranu, które pęcznieją w wodzie, tworząc matrycę żelową.

Zrównoważyć kolumnę G-10 wstępnie podgrzanymi mediami, aby wypełnić przestrzeń między kulkami, zapewniając powolne usuwanie mediów z kolumny. Utrzymuj odpowiednią temperaturę w kolumnie, aby zapobiec tworzeniu się pęcherzyków powietrza. Powoli załaduj mieszaninę komórek na kulki żelowe w kolumnie G-10. Inkubować komórki na kolumnie G-10 w temperaturze pokojowej przez żądany czas. W oparciu o charakterystykę i wielkość powierzchni komórek, kulki żelowe preferencyjnie ograniczają większe komórki zrębu szpiku kostnego, umożliwiając oddzielenie komórek białaczkowych.

Dodaj wstępnie podgrzane podłoże do kolumny i zbierz zawiesinę komórek białaczkowych. Odwirować zawiesinę komórek i ponownie zawiesić osad w odpowiednim buforze. Do dalszej analizy wykorzystaj czystą populację komórek białaczkowych. W poniższym przykładzie oddzielimy czystą populację komórek białaczkowych od kokultury zrębu za pomocą kolumny G-10.

- Przy całkowicie zamkniętym kurku dla każdej subpopulacji, użyj pipety o pojemności 1000 mikrolitrów, aby dodać całą objętość komórek o objętości 1 mililitra, kroplami, na wierzch jednej z przygotowanych kolumn G-10, upewniając się, że komórki pozostają na wierzchu lub wewnątrz granulki G-10. Pozostawić komórki do inkubacji na osadzie G-10 przez 20 minut w temperaturze pokojowej. Następnie dodaj od 1 do 3 mililitrów świeżej, wstępnie podgrzanej pożywki do kolumny i otwórz kurek tak, aby pożywka powoli opuszczała kolumny w dół.

Kontynuuj dodawanie wstępnie podgrzanego podłoża do kolumn w odstępach od 1 do 2 mililitrów. Po zebraniu łącznie od 15 do 20 mililitrów komórek białaczkowych zamknij kran i zakręć probówkę zbiorczą. Następnie odwiruj ogniwa i ponownie zawieś osad w odpowiednim buforze do dalszej analizy.

07:47

Test wypływu na podstawie proteoliposomów w celu określenia właściwości pojedynczych cząsteczek kanałów i transporterów Cl

Related Videos

0 Views

09:42

Wytwarzanie mysich przeciwciał monoklonalnych za pomocą technologii Hybridoma

Related Videos

0 Views

15:04

PeptiQuick, jednoetapowa inkorporacja białek błonowych do biotynylowanych peptydysków w celu usprawnienia testów wiązania białek

Related Videos

0 Views

03:44

Żniwa subpopulacji białaczkowej: metoda przestrzennego oddzielania subpopulacji komórek białaczkowych od kokultury 2D

Related Videos

0 Views

03:06

Negatywna selekcja immunomagnetyczna: metoda oczyszczania limfocytów B z komórek jednojądrzastych krwi obwodowej

Related Videos

0 Views

14:06

Izolacja podzbiorów prekursorowych komórek B z krwi pępowinowej

Related Videos

0 Views

10:18

Od plamki 2DE-Gel do funkcji białka: lekcja wyciągnięta z HS1 w przewlekłej białaczce limfocytowej

Related Videos

0 Views

08:01

Sortowanie komórek aktywowane fluorescencją w celu oczyszczenia plazmocytoidalnych komórek dendrytycznych ze szpiku kostnego myszy

Related Videos

0 Views

09:57

Kompleksowy protokół pobierania i przetwarzania szpiku kostnego do pomiaru mierzalnej choroby resztkowej i białaczkowych komórek macierzystych w ostrej białaczce szpikowej

Related Videos

0 Views

09:01

Cytometria przepływowa w celu oceny komórek macierzystych białaczki w pierwotnej ostrej białaczce szpikowej i w ksenoprzeszczepach pobranych od pacjenta, w momencie diagnozy i obserwacji

Related Videos

0 Views

Last updated: 25 July 2026