Barwienie May-Grunwald Giemsa: metoda barwienia komórek szpiku kostnego

0 wyświetleń3:12 min • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- May-Grunwald Giemsa, czyli barwienie MGG, to dwuetapowa procedura różnicowego barwienia komórek szpiku kostnego lub BMC. Aby rozpocząć barwienie, należy uzyskać skoncentrowany jednowarstwowy rozmaz BMC na szkiełku podstawowym. Pozostaw rozmaz do wyschnięcia na powietrzu. Najpierw potraktuj komórki barwnikiem majowo-grunwaldzkim zawierającym eozynę i błękit metylenowy rozpuszczony w metanolu.

Rozpuszczalnik metanol początkowo unieruchamia komórki. Błękit metylenowy, zasadowy barwnik o dodatnim ładunku netto, barwi kwaśne składniki komórkowe, takie jak kwasy nukleinowe. Eozyna, kwaśny barwnik z ujemnym ładunkiem netto, barwi podstawowe składniki komórkowe, takie jak cytoplazmatyczne białka kationowe. Potraktuj komórki roztworem buforowym o pH 6,8, aby barwnik mógł się wytrącić i dobrze związać z materiałami komórkowymi.

Dodatkowo potraktuj komórki barwnikiem Giemsa, zawierającym również barwniki kwasowe i zasadowe, aby wzmocnić ogólny efekt barwienia. Barwniki podstawowe, lazur i błękit metylenowy, intensyfikują plamę składników kwasowych, podczas gdy barwnik kwasowy, eozyna, wzmacnia plamę składników zasadowych.

Pod mikroskopem erytrocyty wydają się różowo-brązowe, a płytki krwi jako małe fioletowe kropki. Granulocyty mają fioletowo-niebieskie wielopłatkowe jądro i czerwoną granulowaną cytoplazmę. Agranulocyty są jasnoniebieskie z dużym fioletowo-różowym jądrem. W poniższym protokole pokazujemy barwienie MGG komórek szpiku kostnego.

- Aby przygotować komórki szpiku kostnego do barwienia, najpierw umieść je w jednorazowych komorach z wstępnie dołączonymi kartami filtracyjnymi, a następnie umieść komory w cytowirówce. Dodać 100 mikrolitrów buforu FACS do każdej komory karty filtracyjnej i krótko odwirować szkiełka. Pod koniec wirowania dodaj 100 mikrolitrów komórek do każdej komory i odwiruj komórki.

Następnie ostrożnie wyjmij szkiełka z komór w celu wysuszenia na powietrzu. Aby wybarwić komórki szpiku kostnego, zanurz szkiełka w słoiku Coplin zawierającym roztwór May-Grunwald na 5 minut. Następnie przenieś szkiełka do słoika z roztworem buforowym o pH 6,8 na 1 minutę. Następnie przenieś szkiełka do roztworu Giemsa R na 10 minut, a następnie przemyj je przez 10 sekund wodą o neutralnym pH.

Po umyciu pozostaw szkiełka do wyschnięcia na powietrzu i nałóż jedną kroplę podłoża montażowego na każdą próbkę. Następnie umieść jedną krawędź szkła nakrywkowego na szkiełku podstawowym i ostrożnie opuść szkło nakrywkowe na komórki, delikatnie dociskając, aby usunąć wszelkie pęcherzyki powietrza.

09:07

Analiza funkcji komórek tucznych in vivo przy użyciu myszy typu "mastucyjnego knock-in"

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

11:20

Ocena procesu inwazji i migracji komórek: porównanie testu ran drapanych opartego na mikroskopie wideo i testu z komorą Boydena

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

10:21

Proliferacja i różnicowanie mysich komórek prekursorowych mieloidu 32D/G-CSF-R

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

07:29

Preparat kości nieodwapnionej do badań histologicznych, histomorfometrycznych i fluorochromowych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

03:56

Aspiracja szpiku kostnego: metoda pozyskiwania szpiku kostnego w celu zbadania morfologii komórek

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

02:52

Barwienie Giemsa do testu tworzenia kolonii: procedura barwienia in vitro w celu oceny zdolności proliferacyjnej mezenchymalnych komórek macierzystych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

09:31

Zautomatyzowana kwantyfikacja interakcji komórek krwiotwórczych – komórek zrębu w obrazach histologicznych kości nieodwapnionej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:00

Szczegółowy protokół charakteryzujący mysią linię komórkową C1498 i związany z nią mysi model białaczki

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

09:57

Kompleksowy protokół pobierania i przetwarzania szpiku kostnego do pomiaru mierzalnej choroby resztkowej i białaczkowych komórek macierzystych w ostrej białaczce szpikowej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:15

In Situ Badanie mysiej megakariopoezy przy użyciu transmisyjnej mikroskopii elektronowej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

Ostatnia aktualizacja: 15 sierpnia 2026