JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 4:39 min. • April 30th, 2023
- Test strumienia zewnątrzkomórkowego pomaga badać metabolizm komórkowy poprzez pomiar dwóch głównych szlaków energetycznych - glikolizy i oddychania mitochondrialnego. Podczas glikolizy komórki metabolizują glukozę i wydzielają mleczan do przestrzeni zewnątrzkomórkowej wraz z protonami, co określa się za pomocą pomiaru wskaźnika zakwaszenia zewnątrzkomórkowego lub ECAR. Podczas oddychania mitochondrialnego komórki wykorzystują tlen do produkcji ATP, mierzonej poprzez określenie wskaźnika zużycia tlenu lub OCR.
Komórki rakowe wykazują wysoki wychwyt glukozy, ponieważ zmieniają swoje tempo przemiany materii, aby przystosować się i utrzymać nieuregulowaną proliferację komórkową. Aby przeanalizować metabolizm w komórkach rakowych, najpierw zmontuj mikropłytkę do analizy strumienia zawierającą przylegającą monowarstwę komórek rakowych i uwodniony wkład czujnika. Przenieś zespół płyt do analizatora strumienia. Wewnątrz analizatora sondy czujnika opadają, tworząc przejściową mikrokomorę. Aby zmierzyć strumień zewnątrzkomórkowy, port iniekcji wprowadza związki testowe do mikropłytki w określonych punktach czasowych.
W zależności od metabolizmu komórkowego zmienia się stężenie dostępnego t
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych